Poly(A)+RNA的分離純化
1) Poligo(dT)-纖維素層析法提取poly(A)+RNA裝柱與填柱1. 取oligo(dT)-纖維素0.5~1.0 g,用0.1 mol/L NaOH重懸。2. 用oligo(dT)-纖維素(0.5~1.0 ml柱體積)灌注DEPC處理過的一次性柱子(或塞以無菌玻璃毛的巴式滴管,300℃烘烤滅菌4 h)。用3倍柱體積DEPC處理過的水洗滌柱子。3. 用無菌的1×裝柱緩沖液(用無菌的DEPC處理過的水稀釋2×的貯存液)洗滌柱子,直到流出液的pH值<8.0。用pH試紙測試。4. ......閱讀全文
Poly(A)+RNA的分離純化
1)??????Poligo(dT)-纖維素層析法提取poly(A)+RNA裝柱與填柱1.??????取oligo(dT)-纖維素0.5~1.0 g,用0.1 mol/L NaOH重懸。2.??????用oligo(dT)-纖維素(0.5~1.0 ml柱體積)灌注DEPC處理過的一次性柱子(或塞以無
分離純化總RNA
1)??????用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取純化組織和細胞中的RNA1.??????選取從組織細胞或細胞中提取RNA的適宜方法組織a.???????分離組織并立即置于液氮中。b.??????將約100 mg冰凍組織含液氮的研缽中,用研棒研磨。研磨過程中可加入液氮使組織保持冰凍狀態。c.???????
RNA的分離與純化
包括Northern雜交在內的許多分子生物學實驗均是以RNA為材料,mRNA的制備也需要一定質量的總RNA樣品,RNA的數量、純度與完整性將直接影響這些實驗的結果。RNA中rRNA的數量最多,占總量的80%~85%;tRNA及核內小分子RNA占15%~20%;mRNA僅占1%~5%。由于各種rRNA
Poly(A)+RNA Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶 poly( A)+RNA
試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)乙醇 TE 緩沖液。。實驗步驟 一 材料與設備1 ) 5 mol/L NaOH2 ) 寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素3) DEPC 處理的水4)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶 poly( A)+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素 DEPC 處理的水 1X 加樣緩沖液 洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶 poly( A)+RNA
大多數哺乳動物的信使 RNA( mRNA) 都帶冇 poly( A)+ 尾 ,使用本方案可以將帶Poly ( A) +的 RNA 從總 RNA 中分離出來。試劑、試劑盒NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液NaAc(pH5.2)乙醇TE
Oligo(dT)-纖維素層析分離Poly(A)+ RNA
Selection of Poly(A)+?RNA by Oligo(dT)-Cellulose ChromatographyJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, Austra
樣品RNA的分離與純化
含106個細胞液加等量純化溶液[4mol/L胍基硫氰酸鹽,25mmol/L檸檬酸pH7.0,0.5%肌氨酸(sarcosyl),0.1mol/l 2-巰基乙醇]。總體積為細胞沉淀4-5倍,混勻。加0.1體積2ml/L乙酸鈉(pH4.1),1體積酚(重蒸水上封),0.2體積CIAA,混勻器劇烈
poly(A)+ RNA的制備實驗
利用cND A微陣列技術可用于:(1)并行分析檢測成千上萬個基因的表達情況;(2)在新基因的發現、基因組功能的研究、疾病的預測和診斷、藥物靶標的確定和藥物毒性預測等多方面發揮著重要的作用。實驗方法原理大多數的信使RNA(mRNA)都帶有poly(A)尾,而結構RNA沒有。使用本工作方案,可以將帶po