抗體的標記方法
熒光色素標記抗體1．準備好凝膠濾柱以便完成結合反應后用于分離標記抗體和游離的熒光色素。分離球形蛋白使用排除極限為20 000～50 000的凝膠介質和細粒級凝膠（直徑約50μm）。所需凝膠濾柱的大小可根據偶聯反應的總體積×20來確定。依據廠家說明準備好濾柱，用20倍柱床體積的PBS灌注濾柱，直至緩沖液水平剛好降至低于柱床頂部，關閉濾紙底部的閥門或用塑膜黏土（或parafilm）封閉底端以使濾柱不再流動。2．用0.1mol/L的硼酸鈉或碳酸鈉配制濃度至少為2mg/ml的抗體溶液（pH9.0）。應避免引入含一級胺的外來分子。3．用無水DMSO（優級純）溶解FITC或TRITC至1mg/ml。每次標記反應時新鮮配制。4．每1ml蛋白溶液加50μl染液。染液須以每次5μl緩慢加入，加入時應輕輕地連續攪拌混勻。5．置4℃避光反應1h。6．加氯化銨至50mmol/L，室溫孵育2h。加入0.1％二甲苯氰和5％甘油。7．通過凝膠過濾分離結合物與......閱讀全文
熒光素標記抗體的操作步驟
? ? ? ? ? ?FITC熒光素標記抗體的操作步驟??????www.runwelltac.com當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴
酶標記抗體或抗原的制備
標記方法應符合：技術方法簡單、產率高，且重復性好；標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性；酶標志物穩定，應避免酶、抗體（抗原）以及酶標志物各自形成聚合物等。1.戊二醛交聯法：同源雙功能交聯劑（1）一步法：連接AP。?①優點：操作簡便、有效，重復性好。②缺點：交聯時分子間比例不嚴格，大小不一，影響效果。（
標記抗體的應用技術——125I標記單克隆抗體競爭結合試驗
實驗方法原理125I標記的單克隆抗體能與具有相應抗原的細胞結合，有數百倍以上未標記的特異性抗體同時存在的條件下，則標記抗體的結合受到競爭性抑制。根據不同稀釋度抗體分別與相同數量細胞結合后所測得的特異性計數值，可以計算出每個細胞表面的平均抗原密度以及抗原和抗體的親和力。實驗材料細胞McAb抗體試劑、試
非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡技術
（一）??原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
FITC標記抗體改良法
FITC標記抗體-改良法 試劑： 1.0.01mol/L pH7.2 配方。將NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g， 溶于2000ml三蒸水中，調整pH至7.2； 2.0.5mol/L pH9.0碳酸鹽緩沖液配法。量取0.5mol/L Na2CO3（5
FITC標記抗體Marsshall氏法
材料：抗體球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水、異硫氰酸熒光素、1%硫柳汞水溶液、三角燒瓶（25—50ml）、冰及冰槽（或1000ml燒杯）、電磁攪拌器、滅菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L 等；方法與步驟：
FITC標記抗體Chadwick氏法
FITC標記抗體-Chadwick氏法試劑：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、pH8.0的0.01mol/L 、1%硫柳汞；材料：離心機及離心管、三角燒瓶（25ml）、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）等；方法與步驟：抗體的準備。用0—4℃ pH8.
非標記抗體免疫電鏡實驗
實驗方法原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
FITC標記抗體Marsshall氏法
材料：抗體球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水、異硫氰酸熒光素、1%硫柳汞水溶液、三角燒瓶（25—50ml）、冰及冰槽（或1000ml燒杯）、電磁攪拌器、滅菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等； 方法
FITC標記抗體Chadwick氏法
試劑：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞；?材料：離心機及離心管、三角燒瓶（25ml）、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）等；?方法與步驟：1.?????? 抗體的準備。用0—4℃ pH8.0的PBS
酶標抗體標記效果測定
酶標抗體標記效果測定：測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。
用于標記抗體或抗抗體的酶有哪些特性？
用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室溫下穩定；反應產物易于顯現；能商品化生產。當前應用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應用最廣。
不同類型的標記抗體的介紹
1、熒光素標記 熒光色素是最常用于標記抗體的標記物之一。熒光素經恰當的激發可發光，從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細胞水平精確定位的方法。 2、酶標記 酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成，其應用范圍非常廣泛，結果即時可
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用2
? ?? 方便的設計以取得最大的效果：??? ? ? ?ReadiLink?快速抗體標記試劑盒利用胺反應性標記來制備共價標記的結合物。這些反應性標記選擇性地靶向并結合至目標抗體上的伯胺（例如賴氨酸殘基）。要標記您的抗體，只需將您的抗體溶液（濃度約1 mg / mL）與ReadiLink?
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用3
? ? ? ?表2. ReadiLink?xtra快速抗體標記試劑盒? 名稱 Ex（nm） Em（nm） 規格 貨號 ReadiLink?xtra Rapid iFluor?350抗體標記試劑盒 344 4
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用1
? ?? 用特定標簽標記抗體已成為生物科學和醫學研究中的重要且常規程序，標簽的范圍從視覺標記（例如熒光染料）到半抗原分子（例如生物素），標簽的作用有增強免疫復合物和蛋白質-蛋白質相互作用的可見性，以及用于蛋白質的分離和純化。?? ? ? ?在確定選擇哪種標簽類型時，應側重于抗體的下游應用。熒光標
新蛋白質交聯抗體的標記和修飾使用方法
介紹現在的研究中，一個大生物分子與另一個大分子的共價結合，如抗體與酶或酶與DNA的共價結合，仍是研究人員實驗中的重點之一。其中有幾種方法可用于交聯兩個生物分子。一種常見的方法是使用一種小分子交聯劑（如Sulfo-SMCC）。SMCC的一端有胺反應性NHS酯基與蛋白質的游離胺（-NH2）反應，另一端有
酶標記抗體試劑及器材的介紹
(1)0.1M PH6.8磷酸緩沖鹽水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8克，加蒸餾水至200ml。 (2)1.25%戊二醛液：取25%戊二醛50μl與PH6.8的PBS1ml混合。 (3)1M PH9.5碳酸鹽緩沖液：取1M
非標記抗體免疫電鏡的操作步驟
1．經典法?（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫?血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H
標記抗體、配體等常用的熒光探針
?標記抗體、配體等常用的熒光探針?共聚焦激光掃描顯微鏡不僅可用免疫熒光分析固定的細胞或組織切片，還可用于分析活細胞，得到特異性抗體或其他熒光免疫探針識別靶分子的表達、定位、分布變化等信息。標記抗體、配體或蛋白質等較通用的有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate，FITC
酶標記抗體技術的注意事項
1.在具備高質量HRP的條件下，所要標記的抗體也要活性高,效價高(最低1∶16),純度高，親和力好，這是保證標記物效價高，免疫活性好的首要條件。 2.所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴格掌握。所用試劑，最好(或必需)新鮮配制。如在戊二醛標記法中所用戊二醛應為新鮮純品，因戊二醛儲存過久可形成縮和
標記抗體的免疫放射技術(IRMA)
（一）原理? IRMA是采用過量的標記抗體與待測抗原的非競爭性結合反應，然后加入固相的抗原吸附劑以結合游離的標記抗體，離心去沉淀，測定上清液中的放射性強度，從而推算出待測樣品的抗原含量。???見表1。表1?? IRMA與RIA的區別IRMARIA標記物質抗體抗原標記物用量過量限量反應方式直接結合競爭
標記抗體的免疫放射技術(IRMA)
（一）原理??IRMA是采用過量的標記抗體與待測抗原的非競爭性結合反應，然后加入固相的抗原吸附劑以結合游離的標記抗體，離心去沉淀，測定上清液中的放射性強度，從而推算出待測樣品的抗原含量。（二）放射免疫檢測與免疫放射檢測(即IRMA與RIA)的區別見表13－4。表13－4?? IRMA與RIA的區別
FITC熒光素標記抗體的操作步驟
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下：F
標記抗體的免疫放射技術(IRMA)
（一）原理 IRMA是采用過量的標記抗體與待測抗原的非競爭性結合反應，然后加入固相的抗原吸附劑以結合游離的標記抗體，離心去沉淀，測定上清液中的放射性強度，從而推算出待測樣品的抗原含量。 （二）放射免疫檢測與免疫放射檢測(即IRMA與RIA)的區別 見表13－4。 表13－
非標記抗體免疫電鏡技術原理、材料和操作方法
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
關于測定血痕血型的試驗方法標記抗體法的基本介紹
標記抗體法，是指測定血痕血型的試驗方法。根據標記物質（如異硫氰熒光素、鐵蛋白、131碘、過氧化酶等）能直接或間接結合到抗體球蛋白上，而不影響抗原與抗體的特異性結合的原理，在特殊裝置下，借助標記物質的顯現，觀察是否含有相應抗原(直接法）或抗原抗體復合物（間接法），即可判定檢材血型。? 直接法與血
免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術
實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素（Fluorescein isothiocynate，FITC）或羅達明（Lissamine rhodamine B200，RB200）。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合，標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織