非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的抗原進行定位檢測。不標記抗體法又可分為用標記物顯示和不同標記物顯示兩種方法。前者利用基因工程方法制備雙特異性抗體的F(ab′)2，一個Fab片段與標本中的抗原結合，一個Fab是抗體蛋白的結合片段。在抗體與標本作用后，再加入鐵蛋白與抗體結合，從而顯示組織內抗原的所在部位。后者則用磷酸鎢負染后，直接電鏡觀察。 二、材料及試劑 1．待檢病毒材料 如糞便，氣管分泌物、腦脊髓液、組織培養液等。 2．高速離心機 3．已知抗體 4．磷鎢酸 5．瓊脂糖 6．其它 三、操作方法 1．經典法 ① 將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰1......閱讀全文
非標記抗體免疫電鏡
原理?標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的抗
非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗
實驗方法原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
非標記抗體免疫電鏡技術
（一）??原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1．經典法（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H2?
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
(一) 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗——經典法
不標記抗體法通過系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的抗原進行定位檢測。分為用標記物顯示和不同標記物顯示兩種方法。用于（1）抗體觀察（2）免疫學研究。實驗方法原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有
非標記抗體免疫電鏡的操作步驟
1．經典法?（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫?血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H
免疫學技術專題：非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的
非標記抗體免疫電鏡實驗——快速法(瓊脂擴散法)
實驗方法原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡技術原理、材料和操作方法
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
免疫電鏡技術
近年來，免疫學方法與電鏡技術相結合，形成了一種免疫電鏡技術(Immunoelec-tronmicroscopy，IEM)，使抗原定位達到了亞細胞水平。該技術由以下環節組成：(一) 組織準備 用于免疫電鏡檢測的組織多種多樣，所以各自在組織制備時都具有其特點。一般講，組織力新鮮并進行無活動力狀態處理，例
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物，在不改變抗原抗體的免疫反應特異性，亦不降低酶活性條件下，與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫電鏡相關技術實驗—病毒顆粒免疫電鏡技術
病毒是極微小的生物體，用電鏡觀察時，由于其變形、損傷或雜質的存在，以及標本中病毒的數量有限，只靠其形態特點較難確切辨認。為了提高辨認的準確性，可應用特異性抗體，使其與病毒結合，在電鏡下可清晰地辨認特異性抗體及其結合的病毒。這種將免疫學檢測方法應用于電鏡檢查的技術就是免疫電鏡技術 (Immunoele
免疫電鏡術
中文名稱免疫電鏡術英文名稱immunoelectron microscopy;IEM定 義一種與免疫化學方法相結合的電鏡法。樣品先作免疫化學染色，再用電鏡觀察。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
酶免疫電鏡試劑
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基聯苯胺)加入10mlTris－HCl緩沖液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制時，避光進行
酶免疫電鏡技術
（一）??原理?酶免疫電鏡技術是利用酶的高效率的催化作用對其底物的反應形成不同的電子密度，借助于電子顯微鏡觀察，證明酶的存在，從而對抗原進行定位。（二）材料與試劑1．PBS液? 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液? 取5m
免疫細胞電鏡技術
免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻，但由于光學分辨率的限制，不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此，Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法，為在細胞超微結構水平研究抗原?抗體反應提供了可能。在此基礎上，相繼發展了雜交抗
掃描免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了掃描免疫電鏡技術的具體操作步驟，掃描免疫電鏡技術可為研究細胞或組織表面的三維結構與抗原組成的關系提供可能性。實驗原理免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即采用抗原抗體凝集
掃描免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了掃描免疫電鏡技術的具體操作步驟，掃描免疫電鏡技術可為研究細胞或組織表面的三維結構與抗原組成的關系提供可能性。實驗原理免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即采用抗原抗體凝集
酶免疫電鏡試劑
1．PBS液 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。 2．DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基聯苯胺)加入10mlTris－HCl緩沖液(0.05mMol/L pH 7.6)，加1%H2O20.5ml～1ml。配制時，避光進行，
免疫電鏡相關技術實驗——膠體金標記免疫電鏡技術
實驗材料病毒試劑、試劑盒膠體金儀器、耗材電子顯微鏡實驗步驟免疫膠體金標記技術又稱免疫金染色技術 (immunogold staining technique), 是 Faulk 和Taylor 于 1971 年發現直徑為 5~50nm 的膠體金 (colloidal gold) 在電鏡下具有很高的電
免疫電鏡相關技術實驗
實驗方法原理 該方法是用電鏡直接觀察病毒抗原與相應抗體結合后形成的大分子復合物。實驗材料 病毒試劑、試劑盒 抗體儀器、耗材 電子顯微鏡實驗步驟 直接將病毒抗原與對應抗體孵育后上電子顯微鏡觀察即可。具有簡單易行，抗原和抗體用量少在該時間內即可得到結果等優點，可用于檢出病毒或進行病毒分型，并已用于臨床診
免疫電鏡標本固定實驗
實驗步驟1. 血管灌注固定固定效果最好，能使超微結構得到很好的保存。灌注裝置由加壓氣球、壓力表、三通接頭和連接管道組成。不同的組織器官必須選擇合適的灌注壓力，詳見有關書籍。灌注固定一般維持 10～15 min。然后用相同的固定液繼續浸泡固定 2～4 h。2. 浸泡固定組織塊切小后立即投入到固定液中，
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗原理?冷凍蝕刻法(Freeze Ftching)，也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture)，是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是將樣品在液氮中冷凍，然后放到真空噴鍍儀中切斷，切斷后的切面上有細胞器，其間還有凍成洋的水分。再加熱使冰升華
免疫電鏡標本固定實驗
實驗方法原理 實驗步驟 1. 血管灌注固定固定效果最好，能使超微結構得到很好的保存。灌注裝置由加壓氣球、壓力表、三通接頭和連接管道組成。不同的組織器官必須選擇合適的灌注壓力，詳見有關書籍。灌注固定一般維持 10～15 min。然后用相同的固定液繼續浸泡固定 2～4 h。2. 浸泡固定組織塊切小后立即
冷凍蝕刻免疫電鏡技術
實驗概要本文介紹了冷凍蝕刻免疫電鏡技術，包括：冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術和斷裂—標記免疫電鏡技術。實驗原理冷凍蝕刻法(Freeze Ftching)，也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture)，是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是