如何設計引物(二)
Nucleotides:Stocks of nucleotides for PCR (or other procedure) are NEARLY ALWAYS dNTPs (deoxynucleotides), and concentrations is almost always given in EACH dNTP: that is, the given concentration is EACH nucleotide in the mix, NOT the total concentration. This means that a 2.5 mM dNTP mix for PCR contains 2.5 mM of EACH dNTP, and 10 mM TOTAL dNTPs.Example:i) Make up a 2.5 ......閱讀全文
如何設計引物(二)
Nucleotides:Stocks of nucleotides for PCR (or other procedure) are?NEARLY ALWAYS dNTPs (deoxynucleotides), and concentrations is almost always given i
如何設計PCR引物(二)
上回說到如何尋找保守序列,經過隆地熊我一番羅嗦,七七八八也該知道了些。當然,要想做到爐火純青,各位小白還得勤加練習。本回隆地熊我就要進入正題了,不然對不起這圖文題目。在做PCR引物設計前,首先得了解引物設計的基本原則。根據網上資料匯總(主要來自生物谷、生物秀、小木蟲、百度文庫等,特此一并感謝,具體不
如何設計引物(一)
Primers:i) Oligonucleotide primers are generally supplied as "so many OD units/ml" - but what does this?mean, in terms of mg/ml, or mmol/ml, etc?Given
如何利用LAMP引物設計平臺設計IMSA引物?-2
6. 更改ParameterCondition中默認的Normal至AT rich。默認顯示Normal說明我們所上傳VP1 gene的序列中GC含量位于40%-65%的正常范圍內。高于65%屬于GC rich;低于40%屬于AT rich。7. 再次點擊Generate時平臺顯示有1000或高于1
如何利用LAMP引物設計平臺設計IMSA引物?-3
(3)找到該文檔,郵件選擇打開方式為記事本,可得引物信息。再次點擊文檔,另存為Up-LF或Down-LB.txt文件。這里的第16套引物,我們需要它的下游環引物即LB,故名為Down-LB。這樣命名的目的是為了防止混淆;??????(4)同樣打開LAMP引物設計平臺(http://primerexp
如何利用LAMP引物設計平臺設計IMSA引物?-1
IMSA,全稱為isothermal multiple-self-matching-initiated amplification,中文名為等溫多自配引發擴增。該技術的詳細介紹可見本公眾號歷史文章:“分子診斷萬花筒” 開篇——等溫多自配引發擴增技術簡介。在這里隆地熊為大家介紹一種如何利用LAMP引物
如何設計PCR引物(一)
“如何設計PCR引物”看到這個題目后肯定有問“什么是PCR”的。對于這個問題,連小白都知道,您不知道,就只好去找百度哥咯。雖然百度哥肚子里其他的信息亂七八糟的,但是這個問題的答案還是蠻統一的,不會有誤導性,但問無妨。另外,也可以看看下圖老外給的簡介,英文不好請有道。跟“服裝設計”類似,設計PCR引物
引物設計的引物設計原則
1、引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般為40%-60%,以45-55%為宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之間,Tm值曲線以選取72度附近為佳,5'到 3
引物設計的引物設計原則
1、引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不能大于38bp;2、引物GC含量一般為40%-60%,以45-55%為宜,上下游引物GC含量和Tm值要保持接近;3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右,至少要在55-80℃之間,Tm值曲線以選取72度附近為佳,5'到 3
pcr如何設計引物?如何進行擴增?
引物長度和專一性常見的引物長度為18-30個堿基。 短的引物(≤15堿基)能非常高效地結合, 但是它們的專一性不夠。較長的引物能提高專一性,然而退火效率低,從而導致PCR產量低下。同時應避免編碼單一序列和重復序列的引物。平衡GC含量,避免GC-和AT-富集區域引物的GC含量應介于40%~60%之間。