蛋白的濃縮方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!3,硫酸銨沉淀法:利用高濃度鹽將蛋白質析出(鹽析)選擇硫酸按是因為:鹽析有效性,pH范圍廣,溶解度高,溶液散熱少,經濟!4,(低溫)有機溶劑沉淀法:強調低溫(0-4度以下)是因為10度時蛋白會在有機溶劑中變性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+離子,pH值5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG時旨在個別情況下才會是蛋白質稍有變性!他溶解是散熱低,形成沉淀的平衡時間短,通常達到30%時蛋白質就會達到最大量的沉淀!6,超濾法:主要針對小體積蛋白質溶液(幾ml)此法更不易引起變性!不過得有濃縮器,不是哪個實驗室都有的!7,透析法:主要用于更換蛋白質的緩沖液!的有透析袋!不需要特殊的儀器!8,離子交換層析......閱讀全文
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 一、層析 在過去的 2 0 年中,蛋白質組學技術的日益
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗
預計在新奇的一級分子和生物仿制藥實體方面將會有突出的增長。一些進步的是改良的分析、開發和相互作用。現在已有許多用于去除關的方法,包括凍干、反向萃取、溶質析出,precipitation、透析(溶劑交換) 、超濾和層析技術。值得注意的是,在眾多微和設備發展的支持下,小型化和高通量的蛋白質分析取得了極大
Spectra/Gel濃縮劑使蛋白質溶液的濃縮過程及使用步驟
Spectra/Gel濃縮劑使蛋白質溶液的濃縮過程及使用步驟: 1、Spectra/Gel使蛋白質溶液的濃縮過程變得快捷,其以聚丙烯酸酯-多元醇制成,高親水性,吸水后膨脹,吸水力強。 2、這種高分子聚合物可與截留分子量(MWCO)從100到1,000,000道爾頓的透析膜配用,且不會污染樣品。
真空濃縮儀的操作方法
??? 真空濃縮儀主要用于濃縮液體或干燥樣品,利用真空時溶劑可在低溫中沸騰蒸發的原理達到快速濃縮的目的。由冷阱、泵、冷凝分離器、電磁閥、外置真空系統等部分組成。? 操作前? 1.操作時的環境溫度應保持在 15-35 ℃之間? 2.打開電源,濃縮儀蓋子解鎖,顯示屏顯示上次運行的參數? 3.安裝
氣體樣品的動態預濃縮方法
見《色譜》2001年1期P71.?????????????????????????????????氣體樣品的動態預濃縮方法?????????????????????????????苗??虹,??關亞風,??王涵文,??朱道乾????????????????????????(中國科學院大連化學物理研究
酶液的濃縮方法和步驟
提取的酶液為減少純化操作容積,通常先進行濃縮。工業上可用真空減壓濃縮、薄膜濃縮、冷凍濃縮和逆向滲透作用進行濃縮。對于少量酶液下述方法濃縮更合適:用葡聚糖凝膠(分子篩)濃縮:取相當于酶液量1/5的干葡聚糖凝膠G15或G25,分次加入酶液中,攪拌30 min,使凝膠吸水膨脹,進行吸濾。經重復數次操作即可
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換層析裝置實驗步驟 1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂,不斷攪拌以促進平衡;2. 傾瀉掉大部分溶液,保留的溶液置要使樹脂能輕松的
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換樹脂層析柱實驗步驟 1. 準備離子交換樹脂,裝
批量層析法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換層析裝置實驗步驟1. 在燒杯或錐形瓶中平衡樹脂,不斷攪拌以促進平衡;2. 傾瀉掉大部分溶液,保留的溶液置要使樹脂能輕松的攪拌;3
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
實驗方法原理超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶液很容易通過濾膜。我們以 Amicon 系作為超濾的實例進行描述。這個方法不易引起蛋白質變性。微型濃縮器初始容量有 2 ml 以及更小的,2 mg/ml
透析法濃縮蛋白質溶液
實驗方法原理透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶液盛在一個半透膜袋內,此膜能防止蛋白質丟失而無論在常壓或減壓下可與周圍的緩沖溶液進行溶質交換。除小體積樣品之外,根據擴散原理進行的透析法非常耗時,因此蛋
超濾法濃縮蛋白質溶液實驗
超濾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 超濾濃縮蛋白質是通過外力使蛋白質溶液通過濾膜而仍保留目的蛋白質的方法。實驗室超濾主要是針對小體積蛋白質溶液(幾毫升),用離心力的方法使溶
透析法濃縮蛋白質溶液
透析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。
批量層析法濃縮蛋白質實驗
批量層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 批量層析的特點在于層析用樹脂不放在柱中,而是放在燒杯或瓶子的容器中;通過攪拌或搖動而混內層析;以過濾或離心的辦法分出層析液。
透析法濃縮蛋白質溶液
實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液,如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質溶液的一種方法(例如 PEG、Sephadex)。將蛋白質溶液盛在一個半透膜袋內,此膜能防止蛋白質丟失而無論在常壓或減壓下可與周圍的緩沖溶液進行溶質交換。除小體積樣品之外,根據擴散原理進行的透析法非常耗時,因此
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換樹脂層析柱實驗步驟1. 準備離子交換樹脂,裝配層析柱
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗(二)
5 生 產 規 模 的 層 析類似于分析用的小規模提取,制備規模和生產規模的蛋白質回收往往包括濃縮和脫鹽 。柱層析仍然是蛋白質純化的核心技術,這歸因于其可實現的高選擇性,同時具有方便耐用的填充樹脂床,原料在樹脂中通過流動而進行傳送。商業化生產酶和生物藥品通常需要加工數千升的初始原料。為了盡量
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗(三)
三、透析透析是基于分子質量大小的液相分離技術,它由透過半透膜的選擇性擴散來實現。這種技術被認為是從大分子蛋白質中去除小分子溶質的最流行方法。特別是,這種非變性的脫鹽技術允許在良性或生理條件下更換緩沖液,其影響目標蛋白質性質的風險可降到最低限度。過去的十年里,透析的原理并沒有改變,但用于透析的技術和工
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗(四)
1.超濾膜一 般 情 況 下 ,大 多 數 超 濾 膜 包 含 一 個 堅 固 的 支 撐 結 構 (如 T y v e k ? ) ,并 在 這 一 基 礎 上附加了一個非常薄的聚合物層。實際上正是這一薄層提供了選擇性通透膜所需的性質,并決定了流阻。用于超濾的膜的生產技術在過去幾十年里都沒
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗(五)
五、冷 凍 干 燥溶液中溶質的濃縮可以從熱力學上通過驅使溶劑變成氣態進人頂部空間 (蒸發) 或煮沸而實現。不幸的是,不穩定的溶質(如蛋白質分子)可以被用于除去溶劑所需的熱量快速降解。由于溶液的沸點是溶液的蒸氣壓等于大氣壓 (頂部空氣壓力) 時的溫度,因此,通過增加溶液的溫度或通過降低大氣壓力
關于乳清蛋白濃縮物的基本介紹
隨著乳制品消費量的增長和一些新型加工技術的發展,已利用牛奶生產出不同級別和類型的乳蛋白制品,如酪蛋白和酪蛋白酸鹽,乳清蛋白濃縮物和乳清蛋白分離物,乳蛋白濃縮物以及特定用途的特殊蛋白混合物。 乳清蛋白濃縮物(Whey protein concentrate,WPC)主要是利用超濾技術和噴霧干燥技
蛋白質濃縮和溶質的去除實驗(一)
一、層析在過去的 2 0 年中,蛋白質組學技術的日益廣泛應用,使蛋白質濃縮和脫鹽的層析技術得到不斷革新。蛋白質組學通常需要從少量復雜的混合物中富集蛋白質,包括選擇性地濃縮特定種類的蛋白質。由于質譜 (M S ) 和基于抗體檢測技術的高靈敏度及可提供詳細生化特征的性質,它們在臨床診斷、
樣品前處理方法樣品濃縮
引言色譜分析樣品制備是一個非常重要和復雜的過程,因為色譜分析技術涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復雜多變。樣品物理形態范圍廣泛,對采用分析方法進行直接分析測定構成的干擾因素特別多,所以需要選擇并實施科學有效的處理方法及其技術,達到分析測定或評價和調查的目的。現代色譜儀器對一個樣品的分析測定所需要
樣品前處理方法樣品濃縮
色譜分析樣品制備是一個非常重要和復雜的過程,因為色譜分析技術涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復雜多變。樣品物理形態范圍廣泛,對采用分析方法進行直接分析測定構成的干擾因素特別多,所以需要選擇并實施科學有效的處理方法及其技術,達到分析測定或評價和調查的目的。現代色譜儀器對一個樣品的分析測定所需要的時
樣品前處理方法——樣品濃縮
引言色譜分析樣品制備是一個非常重要和復雜的過程,因為色譜分析技術涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復雜多變。樣品物理形態范圍廣泛,對采用分析方法進行直接分析測定構成的干擾因素特別多,所以需要選擇并實施科學有效的處理方法及其技術,達到分析測定或評價和調查的目的。現代色譜儀器對一個樣品的分析測定所需要
樣品濃縮儀的使用方法介紹
?? 樣品濃縮儀自帶空氣氣源,體積小巧,攜帶方便, 配備數顯表頭,帶溫度設置功能和輔助加熱功能,適合于任意環境下的的樣品迅速濃縮。可用于批量樣品的濃縮制備,代替常用的旋轉蒸發儀對大批量的樣品進行濃縮,使樣品制備時間大為縮短。通常采用惰性氣體對加熱樣品進行吹掃,使待處理樣品迅速濃縮,快速分離、純化從而
氮吹儀濃縮樣品的方法
常壓濃縮——適用于揮發性和沸點相對較低的組分,通過升高溫度,將溶劑由液態轉化成氣態被抽走或被通過冷凝器再次收集,從而達到濃縮目的。減壓濃縮——通過抽真空,使容器內產生負壓,在不改變物質化學性質的前提下降低物質的沸點,使一些高溫下化學性質不穩定或沸點高的溶劑在低溫下由液態轉化成氣態被抽走或被通過冷凝器
氮吹儀濃縮樣品的方法
常壓濃縮——適用于揮發性和沸點相對較低的組分,通過升高溫度,將溶劑由液態轉化成氣態被抽走或被通過冷凝器再次收集,從而達到濃縮目的。減壓濃縮——通過抽真空,使容器內產生負壓,在不改變物質化學性質的前提下降低物質的沸點,使一些高溫下化學性質不穩定或沸點高的溶劑在低溫下由液態轉化成氣態被抽走或被通過冷凝器