流式細胞儀檢測健康兒童T淋巴細胞亞群及絕對計數研究
T淋巴細胞亞群與機體的免疫功能相關,當免疫功能紊亂時,T淋巴細胞亞群在相對百分含量及絕對計數的數值檢測上會出現異常。因此,T淋巴細胞亞群的檢測對監控疾病的發生發展、了解疾病的機制、指導臨床治療都有及其重要的意義。以往文獻以報道成年人淋巴細胞亞群計數研究較多,相關兒童的淋巴細胞亞群計數研究報道較少。本文采用流式細胞術方法,建立健康兒童T淋巴細胞亞群的百分含量及絕對計數分析正常參考值,希冀對臨床診療有所幫助,現報告如下。1、資料與方法1.1 一般資料 本組50例健康兒童外周血標本均來自我院體檢者,男28例,女22例,年齡7個月~18周歲。1.2 試劑 CD4FITC/CD8PE/CD3PeCy5、CD45APC及溶血素購自美國Coulter-Immunotech公司,TruCount 管購自美國BD公司。1.3 儀器 FACS Vantage流式細胞儀(美國BD公司)。1.4 方法 1.4.1 樣品制備 50μ......閱讀全文
流式細胞儀檢測健康兒童T淋巴細胞亞群及絕對計數研究
T淋巴細胞亞群與機體的免疫功能相關,當免疫功能紊亂時,T淋巴細胞亞群在相對百分含量及絕對計數的數值檢測上會出現異常。因此,T淋巴細胞亞群的檢測對監控疾病的發生發展、了解疾病的機制、指導臨床治療都有及其重要的意義。以往文獻以報道成年人淋巴細胞亞群計數研究較多,相關兒童的淋巴細胞亞群計數研究報道較少。本
FCM用于檢測T淋巴細胞亞群
1、CD3代表全部T淋巴細胞。CD3+T細胞增高見于自身免疫性疾病(如SLE)、重癥肌無力、慢性活動性肝炎和移植排斥反應等。CD3+T細胞減少,常見于某些白血病、應用免疫抑制劑、放療過程中、先天性細胞免疫缺陷、艾滋病、多發性骨髓瘤、傳染性單核細胞增多癥等。2、CD4代表輔助性T細胞和遲發型超敏T細胞
T淋巴細胞亞群簡介
T淋巴細胞亞群的測定是檢測機體細胞免疫功能的重要指標,且對某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等)的輔助診斷,分析發病機制,觀察療效及監測預后有重要意義。
如何運用流式細胞儀進行T淋巴細胞亞群分析
簡單的概括:1、先在FSC/SSC散點圖gate出淋巴細胞;2、然后把淋巴細胞顯示到柱狀圖,gate出CD3陽性的(T細胞);3、再把T細胞顯示到散點圖,橫坐標,縱坐標分別為CD4和CD8。
絕對計數的概念
傳統的CD4陽性淋巴細胞的檢測方法是通過計數外周血總白細胞和淋巴細胞百分比來計算T淋巴細胞亞群的絕對數。 這一方法需用手工或血細胞計數儀來計數總白細胞(W BC)和各分類白細胞,再用流式細胞儀或顯微鏡得出淋巴細胞亞群百分比,相乘得出 CD4T淋巴細胞的絕對數。 這種雙平臺方法由于多步驟測定方法,
當前臨床流式細胞分析的發展趨勢
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要
T淋巴細胞亞群概述(一)
?? 應用CD4和CD8單克隆抗體可將外周淋巴器官或外周血中的T細胞分為CD4+CD8-和CD4-CD8+兩個主要的亞群。每個亞群按照某些表面標志和功能又可分為不同的功能亞群。 (一)CD4陽性細胞群 1.Th1和Th2亞群 應用Th細胞克隆培養技術和細胞因子產生的不同,已發現小鼠CD4陽性細胞
T淋巴細胞亞群概述(二)
? (3)CTL的殺傷機制:TCL殺傷靶細胞的機理目前認為主要通過釋放多種的介質和因子介導的。 ①穿孔素(perforin):又稱成孔蛋白(pore-foming protein,PFP)、C9相關蛋白(C9 related protein)或溶細胞素(cytolysin),貯存于電子稠密胞漿
當前臨床流式細胞分析的發展趨勢
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要
流式細胞技術的發展趨勢
當前,臨床流式細胞分析已成為檢驗醫學發展的一個熱點,其發展趨勢主要體現在以下幾個方面。一.從相對細胞計數到絕對細胞計數流式細胞分析最大的優點是對混合細胞群體中亞群細胞的計數,如淋巴細胞可依其表面標志的不同分為T淋巴細胞(CD3+)、B淋巴細胞(CD19+)、NK細胞(CD16+56+/CD3-),T
臨床流式細胞分析的發展趨勢
流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個特點:①標本只要
臨床流式細胞分析的發展方向和趨勢
????? 流式細胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產生的散射光和發射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術,它具有如下幾個
T淋巴細胞亞群檢查過程
在前散射(FSC)和側散射(SSC)的二維Dot-plot圖中,劃出淋巴細胞區,然后對淋巴細胞作FITC和PE的熒光強度檢測,熒光Ⅰ(FL1)為FITC,濾過片為(530±10) nm帶通,熒光Ⅱ(FL2)為PE,濾光片為(575±10) nm帶通。數據分析時,在確定每次檢測陽性細胞百分率之前,
T淋巴細胞亞群注意事項
不合宜人群:無特殊要求。 檢查前禁忌:禁忌暴飲暴食和劇烈運動,宜平靜狀態,空腹抽血檢查。 檢查時要求:注意血清標本不被污染,及時送去檢測。和聽從醫生的要求。
T淋巴細胞亞群正常值
免疫熒光法、橋聯酶免疫檢測法、SPA花環法: CD3+細胞陽性率71.5%±6.2% CD4+細胞陽性率45.7%±5.3% CD8+細胞陽性率27.9%±5.0% CD4/cD8比值為1.66±0.33 流式細胞術: CD3+細胞陽性率61%一85% CD4+細胞陽性率28%-5
T淋巴細胞亞群的檢查過程及相關疾病
檢查過程 在前散射(FSC)和側散射(SSC)的二維Dot-plot圖中,劃出淋巴細胞區,然后對淋巴細胞作FITC和PE的熒光強度檢測,熒光Ⅰ(FL1)為FITC,濾過片為(530±10) nm帶通,熒光Ⅱ(FL2)為PE,濾光片為(575±10) nm帶通。數據分析時,在確定每次檢測陽性細胞
絕對計數的研究背景
多發性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一種B細胞的惡性腫瘤,中老年人常見,以骨髓中積聚大量的惡性漿細胞并分泌單克隆免疫球蛋白為特征。骨髓瘤的臨床表現較復雜,而且影響預后的因素也很多,生存期從數月到數十年不等。傳統的預后指標包括年齡、漿細胞指數、β2-微球蛋白(β2-MG)、分
T4淋巴細胞亞群的概述
T淋巴細胞表面有多種抗原,其中簇分化(CD)抗原分類甚多,這些抗原除了標記細胞的種類和分化階段外,同時也有一定的功能,或作為受體、黏附分子、信號傳遞成分等,可通過這些表面特征性抗原鑒別亞群。目前開展較多的是用抗分化抗原的單克隆抗體,如抗CD4單克隆抗體,對外周血單個核細胞進行檢測,根據出現陽性率
T淋巴細胞亞群有哪些相關疾病
人類T淋巴細胞病毒感染,聯合免疫缺陷病,非典,斑禿,慢性腎功能衰竭,皮炎,腫瘤性心包炎
T淋巴細胞亞群的臨床意義
異常結果:1.CD4淋巴細胞減少:見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑的患者。2.CD8淋巴細胞增多:見于自身免疫病,如SLE、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。3.CD4/CD8比值異常:艾滋病患者比值顯著降低,多在0.5以下。比值降低的還有:SLE腎病、傳染性單核細胞增多癥
流式細胞術分析外周血淋巴細胞亞群在兒科的臨床
背景流式細胞術檢測T、B、NK淋巴細胞亞群已較為廣泛的應用于兒科臨床許多疾病涉及兒童相應免疫功能異常臨床工作中更有效的理解和應用流式細胞術以評估兒童的免疫狀況,指導疾病的診斷、治療還缺乏系統的學習材料尤其是臨床一線的兒科醫務工作者對流式細胞術的臨床應用更有待進一步加強認識和學習。檢測對象原則:免疫功
評論的淋巴細胞亞群共識(一)
最近,朋友圈里面的流式相關行業朋友都在轉一條關于《流式細胞術分析外周血淋巴細胞亞群在兒科的臨床應用共識》,對于流式檢測來說,這確實是個值得高興的事情。淋巴細胞亞群在流式應用中,屬于最早實現標準化的應用,不管是有證試劑還是現在的應用共識,因為簡單、細胞單純、分群清楚,所以從這個應用著手開始將流式推到公
如何選擇流式細胞儀(2)
⑼、檢測細胞內因子(TH1/TH2細胞檢測)未活化的淋巴細胞所分泌的細胞因子極少,用流式細胞儀很難檢測出來。因此,在檢測前需刺激活化。活化所用的刺激素為PMA佛波酯+Ionomycin。淋巴細胞在刺激素的作用下活化,分泌細胞因子到細胞外。因流式細胞儀只能對細胞表面或內部的抗原進行檢測,如細胞因子分泌
淋巴細胞亞群檢測,可以指向哪些疾病?
免疫功能與每個人的健康狀態息息相關,而淋巴細胞亞群分析正是檢測免疫功能的重要指標——它能反映機體當前的免疫功能、狀態和平衡水平,并可以輔助診斷某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等),對分析發病機制,觀察療效及檢測預后都有重要意義。那么淋巴細胞亞群究竟是什么?它的檢測
T淋巴細胞亞群的臨床意義及注意事項
臨床意義 異常結果:1.CD4淋巴細胞減少:見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑的患者。2.CD8淋巴細胞增多:見于自身免疫病,如SLE、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。3.CD4/CD8比值異常:艾滋病患者比值顯著降低,多在0.5以下。比值降低的還有:SLE腎病、傳染性單
T淋巴細胞亞群的注意事項及檢查過程
注意事項 不合宜人群:無特殊要求。 檢查前禁忌:禁忌暴飲暴食和劇烈運動,宜平靜狀態,空腹抽血檢查。 檢查時要求:注意血清標本不被污染,及時送去檢測。和聽從醫生的要求。 檢查過程 在前散射(FSC)和側散射(SSC)的二維Dot-plot圖中,劃出淋巴細胞區,然后對淋巴細胞作FITC和P
T淋巴細胞亞群的正常值及臨床意義
正常值 免疫熒光法、橋聯酶免疫檢測法、SPA花環法: CD3+細胞陽性率71.5%±6.2% CD4+細胞陽性率45.7%±5.3% CD8+細胞陽性率27.9%±5.0% CD4/cD8比值為1.66±0.33 流式細胞術: CD3+細胞陽性率61%一85% CD4+細胞陽性率
如何根據實驗目的選擇流式細胞儀
相關專題?自七十年代出現第一代流式細胞儀以來,隨著計算機技術、電子制造技術、激光技術及熒光?素合成技術的不斷發展,現代流式細胞儀已今非昔比,制造工藝、功能、精確度有了質的飛躍。流式細胞儀?生產廠商推出各種不同型號的流式細胞儀來滿足用戶的不同需要。現生產流式細胞的廠商全球至少有六家,各廠商產品又有不同
免疫學實驗T淋巴細胞亞群介紹
T淋巴細胞亞群介紹: T淋巴細胞亞群的測定是檢測機體細胞免疫功能的重要指標,且對某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等)的輔助診斷,分析發病機制,觀察療效及監測預后有重要意義。T淋巴細胞亞群正常值: 免疫熒光法、橋聯酶免疫檢測法、SPA花環法: CD3+細胞陽性
淋巴細胞絕對計數與多發性骨髓
多發性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一種B細胞的惡性腫瘤,中老年人常見,以骨髓中積聚大量的惡性漿細胞并分泌單克隆免疫球蛋自為特征。骨髓瘤的臨床表現較復雜,而且影響預后的因素也很多,生存期從數月到數十年不等。傳統的預后指標包括年齡、漿細胞指數、β2-微球蛋自(β2-MG)、分子