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  • RNA探針合成方法和合成效率檢測方法介紹

    相關專題制備RNA探針在RNA的雜交檢測實驗中,應用標記的RNA 探針將獲得高靈敏度的雜交檢測結果,與DNA 探針相比,檢測靈敏度提高10-100倍。因為對于不同的雜交體類型來說,RNA-RNA雜交體的結合強度高于RNA-DNA和DNA-DNA雜交體。對于通過Northern blots檢測低濃度mRNA,以及原位雜交的核酸定位檢測等應用,RNA探針是一種理想選擇。RNA探針同樣也適用于Southern blots,文庫篩選,斑點雜交等應用。但是,在RNA探針制備過程和整個雜交實驗過程中,必須注意RNAse的防污染操作。制備RNA探針的常用方法是構建含探針標記模板的重組質粒,將克隆子的轉錄區下游進行限制性酶切線性化后,進行體外轉錄的探針合成反應。當然,采用的質粒上必須含有SP6,T3或T7 RNA聚合酶的啟動子序列。體外轉錄法合成的探針量很大,通常情況下,1μg的DNA模板進行反應,將得到20μg的標記RNA探針。另一......閱讀全文

    RNA探針合成方法和合成效率檢測方法介紹

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    RNA探針的合成方法和合成效率檢測

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    黃嘌呤的貯存和合成方法

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    巰基乙胺的用途和合成方法

    巰基乙胺的用途和合成方法生物活性一種輻射防護劑,可在空氣中氧化形成胱胺。用途一是較強的多巴胺-β-羥化酶抑制劑,導致多巴胺蓄積,多巴胺在下丘腦強烈促進GH的合成和分泌。所含的活性成分能Chemicalbook起到改善機體的營養吸收和轉化,提高畜禽生長速度,降低體脂沉積,抑制蛋白質降解,促進蛋白質合成

    有機酸的來源和合成方法

    有機酸包括天然有機酸和合成有機酸。天然有機酸主要是從自然界中的植物或農副產品中提取分離得到具有一定生理活性的有機酸,而合成有機酸則是通過化學合成法、酶催化法和微生物發酵法獲得的有機酸。天然有機酸在中草藥和水果的葉、根、特別是果實中廣泛分布,如烏梅、五味子,覆盆子等,在青梅中分別以檸檬酸、蘋果酸、酒石

    關于豆固醇的物化性質和合成方法介紹

      一、物化性質  密度:0.97 g/cm3 [2]  熔點:165-167oC(lit.)  沸點:501.9oC at 760 mmHg  閃點:220.4oC  二、合成方法  1.大豆中含量豐富,其他的如毒扁豆、可可脂、菜籽油等亦有。它通常不能被動物吸收利用。以豆油中不皂化物進行乙酰化、溴

    關于度洛西汀的性質和合成方法介紹

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    六氟磷酸鋰的用途和合成方法

    六氟磷酸鋰是一種無機物,是電解液成分最重要的組成部分,約占到電解液總成本的43%。六氟磷酸鋰的化學式為LiPF6,白色結晶或粉末,相對密度1.50。潮解性強;易溶于水、還溶于低濃度甲醇、乙醇、丙酮、碳酸酯類等有機溶劑。暴露空氣中或加熱時六氟磷酸鋰在空氣中由于水蒸氣的作用而迅速分解,放出 PF5而產生

    轉染效率檢測方法

    除了直接在熒光顯微鏡下觀察計數,現在很多細胞計數儀也有相應功能,推薦瑞沃德的熒光細胞計數儀,上樣之后就能直接查看相應結果。

    簡述高錸酸鉀的用途和合成方法

      1、用途  (1)用于純錸的制備;  (2)用作分析試劑(光譜分析);  (3)用作氧化劑。  2、合成方法  用高錸酸溶解氫氧化鉀或碳酸鉀生成。  取500g高錸酸或七氧化二錸,溶于500mL水中,過濾,煮沸濾液,在不斷攪拌下用5%氫氧化鉀中和(中性紅為指示劑)即有大量白色結晶析出。冷卻,吸濾

    轉運RNA的合成方法

    生物合成:在生物體內,DNA分子上的tRNA基因經過轉錄生成tRNA前體,然后被加工成成熟的tRNA:tRNA前體的加工包括:切除前體分子中兩端或內部的多余核苷酸;形成tRNA成熟分子所具有的修飾核苷酸;如果前體分子3′端缺乏CCA順序,則需補加上CCA末端。加工過程都是在酶催化下進行的。人工合成:

    體外轉錄合成單鏈RNA探針

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備特異性的單鏈 RNA 探針不僅比 DNA 探針更容易,在雜交反應中一般也比具相同比活性的 DNA 探針產生更強的信號,這可能是由于含有 RNA 的雜合鏈固有的更高穩定性的緣故(Casey and Davidson 197

    體外轉錄合成單鏈RNA探針

    實驗方法原理?制備特異性的單鏈 RNA 探針不僅比 DNA 探針更容易,在雜交反應中一般也比具相同比活性的 DNA 探針產生更強的信號,這可能是由于含有 RNA 的雜合鏈固有的更高穩定性的緣故(Casey and Davidson 1977)。雖然 DNA 探針仍普遍地應用于 Norther

    介紹多肽合成儀的檢測方法

      a)UV Monitor  在多肽合成儀中,在線檢測耦合效果的裝置,如UV Monitor往往是選配裝置,客戶可根據實驗的需要選購。其功能是讓操作者直觀的看到多肽合成的每一部氨基酸偶聯效果,從而針對特定的序列做合成設置的調整,最終達到最佳合成效果。  對于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來說,UV M

    簡述RNA干擾效率的檢測

      一般應該從mRNA水平、蛋白質水平、細胞表型水平三個層次來檢測干擾效率。  mRNA水平:RT-PCR、Real-time PCR;蛋白質水平:Western-blot、ELISA、免疫組化;細胞表型水平:MTT、克隆形成實驗、流式細胞檢測、細胞小室實驗等。RNA干擾效率在動物模型上的進一步驗證

    RNA探針的應用介紹

    這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclear run on transcrip-tion

    反義RNA的人工合成方法

    既然反義RNA在原核生物中對基因表達起著重要的調控作用,那么人工設計在天然狀態下不存在的反義RNA來調節靶基因的表達,想必也是可能的。這已在不少實驗中得到證實。1.由于對靶mRNA的SD序列的上游區的結構了解甚少,因此,在要設計Ⅱ類反義RNA用于和靶mRNASD序列上游區結合,以期達到調節該mRNA

    RNA探針技術的應用介紹

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    樟腦(合成)的檢測方法

    檢查旋光度取本品,精密稱定,加乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1g的溶液,依法測定(通則0621)旋光度為-1.5°至+1.5°。酸度取本品1.0g,加乙醇10.0ml溶解,加酚酞指示液0.1ml,溶液應無色;用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定,消耗氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)不

    人工鼻顆粒過濾效率檢測方法

    一次性麻醉呼吸過濾器(人工鼻)與呼吸ji麻醉機及人工呼吸ji配套使用的消耗品。主要用于手術病人麻醉、呼吸過程氧氣及麻醉氣體中微粒和病毒的過濾和呼入氣體的溫濕度的調整。避免麻醉呼xi機的交叉感染,患者的肺部感染,調整并維持呼入氣體的溫濕度的適宜性。因此人工鼻的過濾效率和氣流阻力是該產品的重要檢測指標。

    糖原的物化性質和合成

    糖原(glycogen)(C??H??O??)是一種動物淀粉,又稱肝糖或糖元,由葡萄糖結合而成的支鏈多糖,其糖苷鏈為α型。是動物的貯備多糖。哺乳動物體內,糖原主要存在于骨骼肌(約占整個身體的糖原的2/3)和肝臟(約占1/3)中,其他大部分組織中,如心肌、腎臟、腦等,也含有少量糖原。低等動物和某些微生

    基因探針的標記方法介紹

    為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,有必要對探針加以標記,以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素、地高辛配體等作為標記物的方法。但都不及同位素敏感。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。

    關于探針標記方法的介紹

      ①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´;端核苷酸,同時在3´;端修復加入被標記核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻,多用于大分

    基因探針的標記方法介紹

      ①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5′端核苷酸,同時在3′端修復加入被標記核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻,多用于大分子DNA標記,(>100

    成探針克服

    成探針克服,比如 Alexa Fluor 系列或 Cy 系列染料。這些專門設計的有機分子表現出很窄的發射光譜(與傳統探針相比)、與弧光燈和激光線相匹配的較大的吸收系數、較高的量子產率、降低的光漂白,且熒光發射對環境變量的依賴性較低。此外,這些先進探針的激發光譜線橫跨大約 400nm,從紫外到近紅外有

    組織RNA提取方法介紹

    1. 最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0~4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后加入一定量的TRIZOL試劑,

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