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  • 細胞培養大攻略8

    79、細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎? 不見得!因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37℃其作用能力最強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養瓶,以便于將含血清的培養基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液濃度為: (1)0.05%胰蛋白酶+0.02% EDTA; (2)0.25%胰蛋白酶+0.03% EDTA;(3)0.25% 胰蛋白酶 溶液pH8.0-9.0;使用D-Hank液配制。 多數細胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02% EDTA這種消化液。80、培養基在使用過程中應注意的問題 (1)培養基在使用前需37℃預熱或在室溫平衡......閱讀全文

    細胞培養大攻略8

    79、細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎??不見得!因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37℃其作用能力最強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,一定

    細胞培養大攻略

    一、細胞培養基礎和步驟細胞培養基大全細胞原代培養步驟細胞傳代培養步驟二、細胞培養常見問答1、加到培養基中的血清?必須滅活嗎?答:不是必須的,看做什么實驗了。2、四季青胎牛血清滅活是56 ℃30分鐘嗎?答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子?。但是如

    細胞培養大攻略4

    10、為什么培養基中可以省去加酚紅?? ?酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不

    細胞培養大攻略6

    44、細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO??除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15 ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。?

    細胞培養大攻略7

    62、貯存在冰箱中的瓶口已開的培養基,在放置幾天后顏色變紫??這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時,碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養箱孵育培養基10-15分鐘,來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。?63、 細胞培養基偶然被凍,可否繼續使用??如果細胞培

    細胞培養大攻略3

    70、?血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。?若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清

    細胞培養大攻略2

    26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白質的單克隆抗體生產培養基。如果作為雜交瘤生產培養基使用,PFHM-II可能需要補充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是雜交瘤生產培養

    細胞培養大攻略9

    85、培養液出現沉淀,但pH值不變?可能原因?(1)洗滌劑清洗后殘留有磷酸鹽,將培養基成分沉淀下來。?(2)冰凍保存培養液。?建議解決方法?(1)用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后滅菌。?(2)將培養液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養液。?86、培養液出現沉淀, 同時pH 發生變化?

    細胞培養大攻略5

    24、昆蟲細胞培養的最適PH值和滲透壓是多少?? ?生長培養基的PH值對細胞的增值和病毒或重組蛋白的生產均會產生影響。對于大部分鱗翅類昆蟲細胞系,在PH值 6.0-6.4范圍的大部分應用效果良好。培養鱗翅類昆蟲細胞系時,培養基的最適滲透壓是 345-380 mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細胞培

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    色譜柱注意事項③ 一般說來色譜柱不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。

    色譜柱維護保養8大知識(五)

    ⑤ 避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。

    色譜柱維護保養8大知識(七)

    ⑦ 保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。

    色譜柱維護保養8大知識(八)

    ⑧ 色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進入柱內,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。在后兩種情況發生時,小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱

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