定點突變技術――從單點突變到多點突變
體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組 研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究有助于我們了解蛋白質結構和功能的關系，探討蛋白質的結構/結構域。而利用定點突變技術改造基因，相信大家也非常熟悉：比如野生型的綠色熒光蛋白（wtGFP）是在紫外光激發下能夠發出微弱的綠色熒光，經過對其發光結構域的特定氨基酸定點改造，現在的GFP能在可見光的波長范圍被激發（吸收區紅移），而且發光強度比原來強上百倍，甚至還出現了黃色熒光蛋白，藍色熒光蛋白等等。（1）應用領域定點突變技術的潛在應用領域很廣，比如研究蛋白質相互作用位點的結構、改造酶的不同活性或者動力學特性，改造啟動子或者DNA作用元件，提高蛋白的抗原性或者是穩定性、活性、研究蛋白的晶體......閱讀全文
定點突變技術――從單點突變到多點突變
體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組 研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究有助于我
定點突變技術——從單點突變到多點突變
?體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究有助于我
定點突變技術：從單點突變到多點突變
體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組 研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究
點突變的突變類型介紹
轉換：嘌呤和嘌呤之間的替換，或嘧啶和嘧啶之間的替換。顛換：嘌呤和嘧啶之間的替換，即嘌呤到嘧啶或嘧啶到嘌呤的變化。
點突變的突變原因介紹
自發突變。在自然界中發生的，由于自然界中誘變劑的作用結果或偶然的DNA復制錯誤并被保留下來。此類引起突變的頻率很低。誘導突變。由于物理、化學原因，導致DNA發生了改變。例如射線（紫外線，倫琴射線等）。
點突變的突變原因介紹
自發突變。在自然界中發生的，由于自然界中誘變劑的作用結果或偶然的DNA復制錯誤并被保留下來。此類引起突變的頻率很低。誘導突變。由于物理、化學原因，導致DNA發生了改變。例如射線（紫外線，倫琴射線等）。
DNA突變的過程和突變結果
突變是指生物體、病毒或染色體外DNA基因組核苷酸序列的改變。包括哪怕是只有一個堿基變化的堿基替換、DNA插入、DNA缺失或DNA重復引起的序列的改變 。一些突變是可遺傳的，生殖細胞發生的突變可以遺傳給后代。發生在非生殖細胞即體細胞的突變，稱為體細胞突變，是非遺傳的突變。DNA復制過程出錯可以導致突變
關于定點突變的單點突變的介紹
對于單點突變，Stratagene公司的QuikChange Site-directed Mutagenesis kit是不錯的選擇，通過巧妙設計，將質粒定點突變技術變得簡單有效。準備突變的質粒必須是從常規E.coli中經純化試劑盒(Miniprep)或者氯化銫純化抽提的質粒。設計一對包含突變位
基因突變的誘變機制移碼突變
誘發移碼突變的誘變劑種類較少,主要是吖啶類染料(圖6)。這些染料分子能夠嵌入DNA分子中,從而使DNA復制發生差錯而造成移碼突變。
基因突變的誘變機制自發突變
所謂自發突變是指未經誘變劑處理而出現的突變。從誘變機制的研究結果來看,自發突變的原因不外乎以下幾種。①背景輻射和環境誘變。短波輻射在宇宙中隨時都有,實驗說明輻射的誘變作用不存在閾效應,即任何微弱劑量的輻射都具有某種程度的誘變作用,因此自發突變中可能有一小部分是短波輻射所誘發的突變,有人估計果蠅的這部
關于突變方法鑒定突變功能殘基的介紹
突變方法鑒定突變功能殘基：定點突變引起的結構變化可以通過在蛋白質中引進另外一種突變來檢測。這種多重突變中單一突變是有加和性的，偏離這個規則說明殘基問的相互作用引起構象的變化。隨機突變、刪除分析以及連接片段掃描突變等實驗方法可用于鑒定功能殘基。隨機突變技術分析蛋白質功能的優勢在于通過簡單的方法就可
關于定點突變的多點突變的原理介紹
有的時候研究可能需要多個位點的定點突變，比如改造酶的活性或者動力學特性，研究蛋白之間的相互作用位點等，單點突變不能滿足實驗的需要，重復進行單點突變也非常浪費時間。因而Stratagene公司又推出了QuikChange Multi Site-Directed Mutagenesis kit。最多
基因突變
基因組DNA分子發生的突然的、可遺傳的變異現象叫做基因突變。基因突變是變異的主要來源，也是生物進化發展的根本原因之一。從分子水平上看，基因突變是指基因在結構上發生堿基對組成或排列順序的改變。基因雖然十分穩定，能在細胞分裂時精確地復制自己，但這種穩定性是相對的。在一定的條件下基因也可以從原來的存在
突變的原因
突變是由于DNA復制（特別是減數分裂）出錯或DNA損傷（如暴露于輻射或致癌物引起）后錯誤的修復造成的。
細菌的突變
? 遺傳型變異中常見的一種為突變（Mutation)，即細菌的基因結構發生偶然的改變。一般突變會導致所編碼蛋白質的改變，從而使細菌出現新的特性或失去原有的某些特性。細菌的自然突變率與其生物的自然突變相同，每106～108次細胞分裂發生一次。由于細菌每20～30分鐘分裂一代，故突變株相對較多。當突變發
突變和選擇
? 1．突變率及其表達方式突變有其分子基礎。因為自然界中普遍存在著突變，每個基因都有一定的突變率（mutation rate)。一般用每代中每一百萬個基因中發生的突變數來表示，即n×10－6／基因／代。突變對遺傳平衡的影響有正負兩個.如一對等位基因A（顯性)和a（隱性)，由顯性基因（A)突變
點突變不易擴增突變系統（簡稱ARMS)分析實驗
實驗材料正常 ARMS 引物突變 ARMS 引物共 同（普通）引物試劑、試劑盒4dNTP10 X PCR 反應緩沖液已知基因型 DNA 模板輕礦物油Taq DNA 聚合酶loading緩沖液DNA 分子大小標記DNA 樣本儀器、耗材Perkin-Elmer Cetus thermal cyler (
關于定點突變的多點突變的應用前景介紹
不同于定點突變的是基于PCR的隨機突變，通過改變PCR條件提高PCR過程中的隨機出錯，這種方法適用于未知的蛋白質，作全局性分析，所以有人稱為飽和突變（saturation mutagenesis）。不過這種方法由于沒有目的性，分析操作相當繁瑣，并且不會出現一個位點2個以上堿基突變，因而應用上有局
基因突變的誘變機制堿基置換突變
可以通過兩個途徑即堿基結構類似物的參入和誘變劑或射線引起的化學變化來進行。① 類似物的參入 5-溴尿嘧啶(BU)是胸腺嘧啶的結構類似物。它只是在第5位碳原子上以溴原子代替了胸腺嘧啶的甲基(─GH3),并且因此更易以烯醇式出現。大腸桿菌在含有BU的培養基中培養后,細菌的?DNA中的一部分胸腺嘧啶被BU
點突變不易擴增突變系統（簡稱ARMS)分析實驗
實驗材料 正常 ARMS 引物 突變 ARMS 引物共 同（普通）引物試劑、試劑盒 4dNTP10 X PCR 反應緩沖液已知基因型 DNA 模板輕礦物油Taq DNA 聚合酶loading緩沖液DNA 分子大小標記DNA 樣本儀器、耗材 Perkin-Elmer Cetus thermal cyl
突變率和突變頻率有什么區別
突變率就是單位數量內發生突變的比率比如100個中有20個突變，突變率為20%突變頻率是單位時間內發生突變的次數比如第一月發生了20次突變，第二月發生了30次，那么突變頻率增加了
突變率和突變頻率有什么區別
突變率就是單位數量內發生突變的比率比如100個中有20個突變，突變率為20%突變頻率是單位時間內發生突變的次數比如第一月發生了20次突變，第二月發生了30次，那么突變頻率增加了
極性突變的定義
極性突變指一個基因上發生的突變可抑制距其操縱子內啟動子較遠一側基因的表達。無意義突變多數都顯示極性效應，但一般在其該突變順反子內的位置，距啟動子愈近，對操縱子后面的極性效應也愈強。
正向突變的概念
正向突變是一個名詞，是由原始的野生型基因變異為突變型基因的過程。
中性突變的定義
中性突變指基因中堿基的突變雖然導致多肽鏈中相應位置的氨基酸發生變化，但該變化并不引起蛋白質功能的改變。
體細胞突變研究
體細胞突變發生在體細胞中的突變，即在體細胞發生了基因突變或染色體畸變。體細胞突變率一般為 0.1～1×10-6/代。其突變性狀一般不能傳給下一代個體，除非突變部分可以由無性繁殖方式傳給后代或者突變部分以后能產生生殖細胞。但突變細胞的突變性狀能通過有絲分裂傳給子細胞。例如許多芽變就是體細胞突變，若發現
DNA突變的特性
不論是真核生物還是原核生物的突變，也不論是什么類型的突變，都具有隨機性、稀有性和可逆性等共同的特性。 ①隨機性。指基因突變的發生在時間上、在發生這一突變的個體上、在發生突變的基因上，都是隨機的。在高等植物中所發現的無數突變都說明基因突變的隨機性。在細菌中則情況遠為復雜。 ②稀有性。突變是極為
極性突變的概念
極性突變指一個基因上發生的突變可抑制距其操縱子內啟動子較遠一側基因的表達。無意義突變多數都顯示極性效應，但一般在其該突變順反子內的位置，距啟動子愈近，對操縱子后面的極性效應也愈強。
核酸突變檢測技術
基因突變是指由于DNA堿基對的置換、增添或缺失而引起的基因結構的變化，亦稱點突變。它的分類方式包括1）根據基因結構的改變方式，基因突變可分為堿基置換突變和移碼突變兩種類型；2）根據遺傳信息的改變方式，基因突變又可以分為同義突變、錯義突變和無義突變三種類型。基因突變的檢測方法：從基因突變的性質來看，檢
自發突變的概念
自發突變是指生物體在沒有人工參與的情況下以一定頻率（約10-9～10-6）自然發生的突變。它是生物進化的根源。自然地出現這種遺傳物質的變異雖然是一種偶然事件，卻是生物界的一種普遍現象。