SWATH技術常見問題與解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是蘇黎世聯邦理工學院及AB SCIEX（全球領先的生命科學分析技術公司）的科學家聯合推出的一項基于質譜應用的新技術。利用此項技術，科學家有史以來首次可以獲得單獨蛋白質組學樣品分析中每個肽段的數據。Q: SWATH技術的原理是什么？A: SWATH是MS/MSALL技術的擴展，其采集模式是一種新型的MS/MS掃描技術，將掃描范圍劃分為以25Dalton為間隔的一系列區間，通過超高速掃描來獲得掃描范圍內全部離子的所有碎片信息。Q: SWATH技術有哪些特點？A：靈敏度高——SWATH技術繼承了MRM的數據采集模式，結合高分辨率的Triple-TOF 5600 plus質譜系統，具有與MRM相當的靈敏度；可重現性高——重復樣品間的定量相關性可達到0.99以上；定量準確度高——定量準確度......閱讀全文
SWATH技術常見問題與解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是蘇黎世聯邦理工學院及AB SCIEX（全球領先的生命科學分析技術公司）的科學家聯合推出的一項基于質譜應用的新技術。利用此項技術，科學家有史以來首次
SWATH技術常見問題與解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是蘇黎世聯邦理工學院及AB SCIEX（全球領先的生命科學分析技術公司）的科學家聯合推出的一項基于質譜應用的新技術。利用此項技術，科學家有史以來首次可
噬菌體展示技術常見問題與解答
1、在噬菌體展示技術的應用中，M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點？ M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體，它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟，只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開
免疫熒光技術常見問題與解答
1、問：近期要做免疫熒光雙標，不知哪位有免疫熒光雙標技術的詳細步驟及其注意事項？?參考見解：我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經驗是：?（1）選取一抗時要來源于兩種不同的動物，我用的是來源于rabbit和rat的抗體，二抗則是不同熒光信號標記的，我用的是donkey anti-rabbit-F
SWATH采集技術介紹
SWATH（Sequential Window Acquisition of all TheoreticalMass Spectra）是瑞士蘇黎世聯邦理工學院的Ruedi博士及其團隊與SCIEX在2012年聯合推出的一項全新的高分辨質譜采集技術。人們常說：SWATH技術是一種真正全景式的、高通量的、
移液器常見問題與解答大全
移液器是實驗室里面最長使用的實驗儀器之一，基本上每一個實驗室人員都曾經或現在使用過移液器，因而也會遇到移液器使用時的一些問題。筆者總結歸納了移液器使用時常見的問題與解答大全，希望對于大家有所幫助：移液器使用時常見的問題與解答大全：問題可能原因提議移液器滲漏多道移液器吸嘴里不均衡的液體水平·吸嘴與移液
濃縮儀常見問題與解答
1、樣品濃縮儀與氮吹儀的區別？答：樣品濃縮和氮吹儀都是用氮氣來進行吹掃，只是各廠家的命名不一樣。2、如何能讓實驗速度更快、效率更高？答：樣品濃縮儀的原理是通過提高樣品的溫度，使樣品的溶劑在無氧狀態下進行揮發，從而快捷高效的達到濃縮的目的。影響實驗速度的原因有兩個：1）加熱的溫度。2）氣體的流量及氣體
eBioscience流式抗體常見問題與解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗體？ ?A：物種——人、小鼠、大鼠、非人靈長類、犬類等。檢測指標——包括細胞表面標記（CD分子，膜骨架，趨化因子受體）和胞內指標（細胞因子，核內轉錄因子）。抗體標記——生物素標記抗體，親和純化抗體以及直標熒光素抗體。eB抗體的直標熒光素有（括號內是發射光波長
測序過程常見問題分析與解答
DNA測序樣品用什么溶液溶解比較好?? ? 答：溶解DNA測序樣品時,用滅菌蒸餾水溶解最好。DNA的測序反應也是Taq酶的聚合反應,需要一個最佳的 酶反應條件.如果DNA用緩沖液溶解后,在進行了測序反應時,DNA溶液中的緩沖液組份會影響測序反應的體 系條件,造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客戶在
WiMAX技術常見問題解答
什么是 WiMAX技術？ WiMAX 是一種基于標準的技術，可以替代現有的有線和DSL 連接方式，來提供最后一英里的無線寬帶接入。WiMAX 將提供固定、移動、便攜形式的無線寬帶連接，并最終能夠在不需要直接視距基站的情況下提供移動無線寬帶連接。在典型的3 到10英里半徑單元部署中，獲得
細胞培養常見問題與解答4
22.在High Five無血清培養基中去污劑的濃度是多少？ High Five無血清培養基中去污劑的濃度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five細胞用多大的密度凍存？ 3.0x10E6 ce
細胞培養常見問題與解答1
1.為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在進行免疫學研究、培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。2.如何用臺盼蘭計數活細胞？用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200－2000個/毫升，在0
細胞培養常見問題與解答2
8.培養基中丙酮酸鈉的作用是什么？丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。9.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀？GIBICO的胎牛血清 沒有預老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白
細胞培養常見問題與解答3
15.如何檢測內毒素(熱源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）試驗是可用的最敏感和特異的檢測細菌內毒素的方法。Levin和Bang 發現細菌可引起鱟（Limulus polyphemus）血管內的凝集作用。內毒素啟動一個細胞內酶原系統（絲氨酸蛋白酶級
CST抗體－Western－Blot常見問題與解答
1.Problem：高背景（曝光1-30秒后，背景高或無特異性蛋白帶） 2.Problem：信號弱（1-30秒的曝光后檢測不到信號） 3.Problem：無著色 4.Problem：著色太淺 5.Problem：著色太深 6.
細胞凍存常見問題與解答FAQ1
細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。2、可否使用
細胞凍存常見問題與解答FAQ2
14、DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO 等級， 必須為Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)， 其本身即為無菌狀況， 第一次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中， 保存于4°C， 避免反復冷凍解凍造成DMSO 之裂解而釋出有害物質，
伺服電機與步進電機常見問題解答
?電子式試驗機與微機控制電子式試驗機、電子式拉力試驗機上都需要用到電機，一般低端的選用步進電機，的選用伺服電機。下面就伺服電機和步進電機常見幾個問題做下解釋。1、如何正確選擇伺服電機和步進電機？ 主要視具體應用情況而定，簡單地說要確定：負載的性質（如水平還是垂直負載等），轉矩、慣量、轉速、精度、加
Western－Blot實驗技術詳解和常見問題解答
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被
氣質常見問題解答
包括常見的氣質問題和MSD質譜通訊中斷問題 氣質常見問題解答
能力驗證常見問題及解答
一、 CNAS-RL02《能力驗證規則》中基本要求的相關問題 ： 申請認可時，是否必須參加能力驗證？參加能力驗證的最低要求是什么？ CNAS-RL02《能力驗證規則》4.2.3款規定“只要存在可獲得的能力驗證，合格評定機構初次申請認可的每個子領域應至少參加過1次能力驗證且獲得滿意結果（申請認
細胞常見問題解答
1.原代細胞與細胞系有什么區別？ 細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
qPCR－常見問題解答
通常來講，real-time qPCR 的反應程序不需要像常規的 PCR 那樣，要變性、退火、延伸 3 步。由于其產物長度在 80～150 bp 之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷 PC
抗體常見問題解答
Q&A 常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗
抗體常見問題解答
常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗方法？
PCR儀常見問題及解答
? 聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行
western－blot常見問題及解答
常見問題及解答： 1 、兩快玻璃板之間灌膠 , 膠為什么總是不平 ? 1)你的玻璃洗干凈沒有？應該要洗得非常干凈！ 2)過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對較多，凝膠凝固過快也會膠不平，最多按照分子克隆加倍 3)加完試劑以后沒有很好的搖勻，導致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快
細胞培養的八個常見問題與解答(FAQ)
1 冷凍管應如何解凍？ 取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。 2 細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DM
LiveTissue－活腫瘤組織凍存技術常見問題解答
1. 可以凍存什么樣大小的腫瘤組織？可以凍存腫瘤患者的手術組織和穿刺組織，也可以保存PDX鼠的傳代腫瘤組織。?2. 新鮮的腫瘤組織怎樣保存和運輸？應浸于我們的組織運輸液或完全培養基內，0~4℃低溫保存，于2小時內低溫運輸到實驗室立即凍存處理。鑒于手術組織容易酸化腐爛，普通的組織運輸液和完全培養基不能
關于HPLC的常見問題及解答
一、問：用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？答：關于漂移問題： 1． 溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定。 2． 流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。 3． 柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡。關于快速變化問題