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  • 實現蛋白marker與AnnexinV雙染的同時檢測的實驗方法

    要用AnnexinV雙染法測凋亡,又想同時標記蛋白marker,甚至還有胞內指標,可是PI和7-AAD都不能洗,怎么辦? eBioscience的可固定細胞活力染料Fixable Viability Dye幫您完美解決固定、破膜以及洗滌步驟不影響Fixable Viability Dye的染色,而PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗體孵育完成后進行,不能洗滌即要上機檢測;對于胞內抗體的染色,由于經過了固定步驟,經過PI或7-AAD染色后所有的細胞都是陽性,所以他們只適合于胞膜染色的死活細胞鑒定 實驗試劑◎ Annexin V Apoptosis Detection kit (Cat. No. 88-8007, 88-8006, 88-8005, 88-8102, or 88-8008) ◎ 10X Binding buffer ◎ Annexin conjugated to APC, eFluor 450, FITC, P......閱讀全文

    實現蛋白marker與Annexin-V雙染的同時檢測的實驗方法

    要用AnnexinV雙染法測凋亡,又想同時標記蛋白marker,甚至還有胞內指標,可是PI和7-AAD都不能洗,怎么辦? eBioscience的可固定細胞活力染料Fixable Viability Dye幫您完美解決固定、破膜以及洗滌步驟不影響Fixable Viability Dye的染色,

    Annexin-VPI雙染法

    Annexin V-PI 雙染法在細胞凋亡的早期就有細胞膜表面破損發生。破損時凋亡細胞表面的磷脂腺絲氨酸(PS)可以從細胞內膜翻轉至細胞的外膜。該過程發生在DNA片段化之前,因而檢測PS的表達,能反映早期凋亡。AnnexinV是相對分子質量為35 000大小的Ca2+依賴的磷脂結合蛋白,對PS有很高

    淺談預染蛋白Marker與未預染蛋白Marker

    在Western實驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是western?blot實驗成功的必備條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋

    細胞凋亡檢測實驗——AnnexinVFITC-單染法

    實驗方法原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是細胞的生命現象之一,它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關,自身免疫性疾病和腫瘤與

    細胞凋亡檢測實驗——Annexin-V/PI雙染色法

    實驗方法原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。A

    細胞凋亡檢測(AnnexinVFITC-單染法)1

    一、實驗原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是細胞的生命現象之一,它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關,自身免疫性疾病和腫

    細胞凋亡檢測(AnnexinVFITC-單染法)2

    2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。常用的DNA 特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三種染料與 DNA 的結合是非嵌入式的,主要結合在DNA 的A

    實驗過程中Annexin-V染不上色或陽性率偏低問題

    ?? 確定實驗中的誘導劑是否能產生凋亡。可通過設定確切凋亡誘導效果的陽性藥物對照來排除這一情況。?? 貼壁細胞消化不當。Annexin V 跟PS 的結合需要Ca2+離子,結合液中含有Ca2+,EDTA 的消化會影響染色,建議使用無EDTA 的胰酶,或者消化后用PBS洗滌干凈。?? 細胞離心用冷PB

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗Annexin-V/PI雙染色法

    實驗方法原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。A

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗——Annexin-V/PI雙染色法

    流式細胞儀檢測細胞凋亡可應用于:(1)鑒定細胞凋亡形態;(2)準確的進行凋亡細胞的計數;(3)進行特異的定性分析和定量分析。實驗方法原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種

    Annexin-V-與細胞凋亡的不解之緣

    細胞凋亡(Apoptosis)或程序性細胞死亡(Programmed?Cell?Death)是指細胞為了清除自身不需要的和失去功能細胞的一種高級調控過程。凋亡可以發生在細胞生長、衰老、免疫反應或者當細胞受到疾病和毒害因素的破壞,例如放射性藥物和化學化療等的過程中。凋亡細胞會產生諸多重要改變,包括細胞

    關于Annexin-V/-PI-法檢測細胞凋亡的介紹

      1992 年Fadok 報道在APO 早期位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserin ,PS) 遷移至細胞外側,這一現象出現在核染色質變性與核體積縮小之前。AnnexinV 是一種具有很強的抗凝血特性的血管蛋白,和磷脂有高親合力,尤其與帶負電荷的磷脂如PS 具極強的結合力,

    檢測細胞膜成分變化的Annexin-V聯合PI法

      1、原理:在細胞凋亡早期位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(PS)遷移至細胞膜外測。磷脂結合蛋白V(Annexin V)是鈣依賴性的磷脂結合蛋白,它于PS具有高度的結合力。因此,Annexin V可以作為探針檢測暴露在細胞外測的磷脂酰絲氨酸。故利用對PS有高度親和力的Annexin V,將Annexi

    細胞凋亡檢測

    實驗概要細胞凋亡是細胞生物學研究的重要領域。檢測藥物或某種處理對于細胞細胞的影響時,細胞凋亡檢測是一個重要檢測指標。以Annexin V聯合PI法為例簡述細胞凋亡檢測。實驗原理在細胞凋亡早期,位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)遷移至細胞膜外側。磷脂結合蛋白V(

    流式細胞儀檢測細胞凋亡――Annexin-V/PI雙染色法

    基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Ann

    流式細胞儀檢測細胞凋亡——Annexin-V/PI雙染色法

    基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Ann

    流式細胞儀檢測細胞凋亡:Annexin-V/PI雙染色法

    一、基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。A

    流式細胞儀檢測細胞凋亡——Annexin-V/PI雙染色法

    基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Ann

    流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin-V-法)

    實驗概要Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑,本實驗介紹了一個用流式細胞儀檢測細胞凋亡的方法(Annexin V 法)。實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白,可以與早期凋亡細胞的胞膜結合,而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時最早的改變之一。在細胞發生凋亡

    流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin-V-法)

    實驗原理?Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白,可以與早期凋亡細胞的胞膜結合,而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時最早的改變之一。在細胞發生凋亡時,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由質膜內側翻向外側。Annexin V與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,因而與細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸結合

    流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin-V-法)

    實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白,可以與早期凋亡細胞的胞膜結合,而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時早的改變之一。在細胞發生凋亡時,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由質膜內側翻向外側。Annexin V與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,因而與細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸結合。由

    細胞凋亡檢測實驗——磷脂酰絲氨酸外翻分析(Annexin-V法)

    實驗方法原理磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細胞膜的內側,但在細胞凋亡的早期,PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36 KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力特異性結合。將Annex

    Annexin-V-檢測凋亡細胞膜的改變操作流程

    一、Annexin V 檢測凋亡細胞膜的改變試劑及溶液:A 對于單獨購買的試劑:?? a) 10X Binding Buffer (貨號:556454)?? b) Propidium Iodide(PI,貨號:556463):建議與以下試劑同時使用 Annexin V-FITC(貨號: 556420

    細胞凋亡的檢測方法綜述5

    4、檢測細胞膜成分變化的Annexin V 聯合PI法原理:磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細胞膜的內側,但在細胞凋亡的早期,PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂

    三種流式方法檢測細胞凋亡

    一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相關

    細胞凋亡的三種流式檢測方法

    一、檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。流式細胞儀檢測有下列特點:1、檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比較準確2、可用許多相

    流式細胞儀定量分析細胞凋亡

    流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)

    流式細胞儀定量分析細胞凋亡

    流式細胞儀定量分析,細胞凋亡檢測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常細胞與壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中細胞熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞核凋亡細胞。流式細胞儀定量分析細胞凋亡,應用價值流式細胞儀檢測具有以下特點:1)

    細胞凋亡的檢測方法

    (一)???測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二)???用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡

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