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  • 細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞培養實驗

    實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC,通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HBSS 臺盼蘭 儀器、耗材手術器械 尼龍網 相差顯微鏡 熒光顯微鏡 實驗步驟一、實驗步驟 1. 大鼠腹腔麻醉后在超凈臺上剖腹,進行門靜脈插管。 2. 以D-Hanks’液灌注,同時剪開下腔靜脈,沖掉血液后,改灌以100 ml 酶消化液I(0.05% IV 型膠原酶)。 3. 待肝臟變軟后,離體肝臟并剪碎,繼續以酶消化液II(含20U/ml DNase I 的0.05% IV 型膠原酶)消化15 min,尼龍網過濾后以450 g 離心5 min(4℃,下同)。 4. 以HBSS 重懸沉淀至10 m......閱讀全文

    細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞培養實驗

    實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC,通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB

    大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術

    大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM

    大鼠肝星狀細胞培養實驗

    細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    大鼠肝星狀細胞培養實驗

    細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法 實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。 實驗材料SD大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉

    大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    細胞技術專題:大鼠星型膠質細胞培養實驗

    大鼠星型膠質細胞培養可以:(1)用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究;(2)腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究;(3)腦損傷和腦疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。 ?實驗方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 實驗材料大鼠胚胎 試劑、試劑盒L-15培養基 膠原酶 Dnase D-MEM-B

    細胞技術專題:大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗

    大鼠大腦皮層神經元細胞培養可以:(1)獲得大鼠大腦皮層神經元細胞;(2)用于神經元細胞定向分化研究;(3)用于神經元細胞凋亡研究。實驗方法機械性劃割培養 酶消化法 實驗方法原理SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d,微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元,依劃割程度不同分為輕、中、重

    細胞技術專題:大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗(一)

    標簽: 大鼠 視神經 少突 膠質 大鼠視神經少突膠質細胞培養可以:(1)獲得大鼠視神經少突膠質細胞;(2)用于視神經損傷修復研究;(3)用于少突膠質細胞相關課題研究。實驗方法牛血清培養法 實驗方法原理采用視神經,DMEM/F12條件培養基培養,觀察細胞形態及生長,并進行免疫組織化學鑒定。 實驗材料W

    細胞技術專題:大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗(二)

    2. 免疫組織化學染色結果培養的視神經少突膠質細胞的免疫組織化學染色 GC 蛋白陽性,未加一抗的呈陰性。染色結果顯示成熟的少突膠質細胞突起豐富,互相形成蜘蛛網狀(圖 3)。蘇木素復染,異質細胞較少,90%以上為陽性細胞(圖 4)。? Figure 1 Cells migrated from opti

    大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法

    大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液

    常用原代動物細胞培養:肝星狀細胞培養材料和方法

    材料 相差顯微鏡,熒光顯微鏡,手術器械,雄性SD大鼠,體重250-450 g,戊巴比妥鈉,200目尼龍網,小牛血清(或胎牛血清,則更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D- Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g

    細胞技術專題:小鼠腹腔巨噬細胞培養實驗

    小鼠腹腔巨噬細胞培可以:(1)吞噬與清除異物;(2)分泌生物活性物質;(3)對仿生全降解材料,降解后的無機產物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養條件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2?培養箱中孵育后,熒光顯微鏡下計數吞噬

    肝星狀細胞的簡介

      肝星狀細胞是ECM的主要來源, HSC激活并轉化為肌成纖維細胞樣細胞(MFC),各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細胞。肝星狀細胞激活并轉化為肌成纖維細胞樣細胞(MFC),各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細胞,正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態。當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時,肝星狀細胞被

    大鼠胰島細胞培養實驗

    實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。實驗材料 一周齡Wistar 大鼠? 試劑、試劑盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型膠原酶 葡萄糖 碘乙酸? 儀器、耗材 手術剪 手術鉗 眼科剪刀 眼科鑷子

    大鼠胰島細胞培養實驗

    大鼠胰島細胞可用于:(1)實驗室胰島細胞功能深入研究的實驗材料;(2)糖尿病新藥的細胞篩選模型。實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。?實驗材料一周齡Wistar 大鼠試劑、試劑盒D-Hanks’液

    大鼠胰島細胞培養實驗

    大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單

    大鼠胰島細胞培養實驗

    大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單

    細胞技術專題:人臍動脈平滑肌細胞培養實驗

    人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實

    細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(二)

    二、結果 兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長,正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利,傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代,經第8

    細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(三)

    ?收起? 注意事項1. 應嚴格無菌操作。2. 仔細徹底剝除膀胱黏膜、黏膜下及漿膜層,是確保獲的大量高質單個膀胱平滑肌細胞的基礎。3. 膀胱平滑肌組織應盡量減碎以確保充分消化。4. 嚴格控制膠原酶和胰蛋白酶的濃度和消化時間,見消化液混濁、組織塊呈絮狀,或在倒置顯微鏡下見消化液中有較多單個細胞或細胞小

    細胞技術專題:兔膀胱平滑肌細胞培養實驗(一)

    兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下

    肝星狀細胞的性質及功能

      HSC位于Disse間隙內,緊貼著肝竇內皮細胞(sinusoidal endothelial cells,SEC)和肝細胞。其形態不規則,胞體呈圓形或不規則形,常伸出數個星狀胞突包繞著肝血竇。此外,HSC還伸出胞突與肝細胞、鄰近的星狀細胞相接觸。HSC胞質內有1~14個直徑約1.0~2.0μm的

    細胞技術專題:細胞傳代實驗

    根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代

    大鼠星型膠質細胞培養實驗

    酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺

    大鼠星型膠質細胞培養實驗

    酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺

    肝星狀細胞的生物學特征

      正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態。當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時,肝星狀細胞被激活,其表型由靜止型轉變 為激活型。肝星狀細胞位于肝竇周Disse 腔內,約占肝臟所有細胞的13%。在規HE染色的肝組織切片中,不能顯示星狀細胞,但可用免疫組織化學將其定位,并可將其分離進行體外細胞培養。正常情況下肝

    細胞技術專題:原代胚胎成纖維細胞培養

    實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平 皿三套、200目尼龍濾網、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞(MEF)生長培養基:高糖DMEM

    細胞技術專題:細胞生長曲線實驗

    細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期,斜率較大的指數生長期,呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部

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