RPA重組酶是什么？
2006 年，Piepenburg 等首次提出了重組酶聚合酶擴增反應(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重組酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和單鏈結合蛋白(gp32)以及兩條特異性的上下游引物參與的等溫擴增。 首先， T4 uvsX 在輔助因子 uvsY 的作用下與引物結合形成核酸蛋白復合物，然后該復合物尋找與靶標 DNA 的互補區域進行雜交并置換下另一條單鏈，置換下的單鏈馬上被 gp32 結合防止其再與互補鏈雜交，最后 T4 uvsX 在 ATP 的作用下與引物解離，聚合酶 Bsu 與引物結合并沿模板進行延伸(圖 1)。 該反應在 37~42℃下 30 min 內可以獲得 1012 拷貝的擴增產物，其靈敏度可達到單拷貝，其擴增產物長度在 500 bp 以內最佳。對 RPA 產物的 檢測可采用包括瓊脂糖凝膠電泳、熒光探針實時檢測、及側流層析檢測等多種方法。由于......閱讀全文
RPA重組酶是什么？
2006 年，Piepenburg 等首次提出了重組酶聚合酶擴增反應(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重組酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和單鏈結合蛋白(gp32)以及兩條特異性的上下游引物參與的等溫擴增。 首先， T4 uvsX
RPA（重組酶聚合酶擴增）技術原理及RPA與LAMP對比
英國TwistDx公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年，基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增，開發的重組酶聚合酶擴增ZL技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創新。(http://www.twistdx.co.uk)??????????
重組酶聚合酶擴增（RPA）技術簡介
核酸檢測革命：可替代PCR的犀利技術——RPA重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結合蛋白（SSB）和鏈置換DNA
twistDx－的重組酶聚合酶擴增（RPA）技術原理
twistDx 的重組酶聚合酶擴增（RPA）將徹底改變在資源有限的現場環境中擴增和檢測核酸的能力。RPA 技術原理RPA 體系的重點是重組酶，這些酶與寡核苷酸引物形成復合體，并使引物與雙鏈 DNA 中的同源序列配對。單鏈 DNA 結合（SSB）蛋白與被取代的 DNA 鏈結合，并使形成的 D 環保
rpa是什么技術
RPA的意思機器人流程自動化，通過配置RPA(也稱為“機器人自動化”)來模擬軟件系統中的人類交互，從而允許執行業務流程。RPA軟件機器人識別應用程序接口上的數據，并像人一樣操縱應用程序。RPA軟件根據規則與其他系統交互，并根據需要執行各種重復任務。它比人類做得更好。RPA軟件機器人不會睡覺，不會出錯
核酸檢測革命：rpa技術原理
重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。本專題為大家詳細介紹RPA的原理、引物設計、疑難解答以及在致病菌檢測、病毒檢測以及癌癥研究中的靈活應用。 自PCR技術誕生以來已經有三十年了，從經典PCR
RNA酶保護試驗((RNase－Protection－Assay,RPA)簡介
RNA酶保護試驗((RNase Protection Assay,RPA)是通過液相雜交的方式,用反義RNA探針與樣品雜交，以檢測RNA表達的技術。1。原理：雙鏈RNA（雜交的）能夠抵抗RNA酶的降解。2。應用：檢測RNA表達3。與Northern雜交和RT-PCR比較，RPA有以下幾個優點：1．
RNA酶保護試驗((RNase－Protection－Assay,RPA)方法
一、試劑準備1． GACU POOL：取100mM ATP、CTP、GTP各2.78μl、100mM UTP 0.06μl，加DEPC H2O至100μl。2. 雜交緩沖液IPES 0.134g、0.5M EDTA（pH8.0）20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml，加DEPC H2O至
RNA酶保護實驗(RNase－Protection－Assay,RPA)簡介
簡介：RNA酶保護試驗(RNase Protection Assay，RPA)是通過液相雜交的方式,用反義RNA探針與樣品雜交，以檢測RNA表達的技術。1. 原理：雙鏈RNA（雜交的）能夠抵抗RNA酶的降解。2. 應用：檢測RNA表達3. 與Northern雜交和RT-PCR比較，RPA有以下幾個優
RNA酶保護實驗(RNase－Protection－Assay,RPA)簡介
簡介： RNA酶保護試驗(RNase Protection Assay，RPA)是通過液相雜交的方式,用反義RNA探針與樣品雜交，以檢測RNA表達的技術。 1. ?原理：雙鏈RNA（雜交的）能夠抵抗RNA酶的降解。 2. ?應用：檢測RNA表達 3. ?與Northern雜交和RT-PCR比較
RPA技術原理與RPA產品形態簡述
回顧2019年，RPA機器人流程自動化行業迎來了一個快速發展的機遇。RPA創業者得到了國內投資人的認可，一些RPA公司也接連拿到千萬美金級別的融資，這在當下遇冷的資本市場環境下顯得格外耀眼。 眼下，RPA已在金融、財會、電信、能源、制造、物流等行業領域生根發芽。當下的RPA技術可以替代各行業企
什么是重組酶？
中文名稱重組酶英文名稱recombinase定 義參與基因定位重組過程的酶。負責識別、切割特異的重組位點，并連接兩個參與重組的分子。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），酶（二級學科）
Bdf1通過與RPA促進同源重組修復原理揭曉
表觀遺傳調控DNA同源重組機制獲揭示 Bdf1偶聯H4乙酰化修飾和DNA重組修復過程 武漢大學供圖 近日，《尖端科學》在線發表了武漢大學生命科學學院遺傳學系、細胞穩態湖北省重點實驗室教授陳學峰課題組的最新研究成果。該研究揭示了酵母溴結構域家族蛋白Bdf1及其人類同源蛋白TAF1在促進DNA
一文搞定恒溫擴增——RPA/RAA
分子診斷技術今日不同以往，著實借力突飛猛進，恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種，今天就回顧RPA/RAA，讓大家一文通俗搞定~~嗯啊, 如果有疑問，決定開小灶，包會！哈哈~~為了確保大家所認知的基本概念是一致的，請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術，RP
搞定恒溫擴增分子診斷（RPA/RAA）
分子診斷技術今日不同以往，著實借力突飛猛進，恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種，今天就回顧RPA/RAA，讓大家一文通俗搞定！為了確保大家所認知的基本概念是一致的，請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術，RPA, recombinase polymeras
重組酶聚合酶擴增敘述
重組酶聚合酶擴增（RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最佳反應溫度在37℃左右。重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈D
RNA酶保護試驗((RNase－Protection－Assay,RPA)的優缺點
RNA酶保護試驗((RNase Protection Assay,RPA)是通過液相雜交的方式,用反義RNA探針與樣品雜交，以檢測RNA表達的技術。與Northern雜交和RT-PCR比較，RPA有以下幾個優點：1． 檢測靈敏度比Northern雜交高。由于Northern雜交步驟中轉膜和洗膜都將造
核酸檢測革命：可替代PCR的犀利技術——RPA
自PCR技術誕生以來已經有三十年了，從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR，這一技術在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。很多人的實驗根本離不開PCR。筆者曾經也接觸PCR很長一段時間，加樣、設置程序、等待、檢測。這些過程看起來容易，但實驗結果卻總是會出人意料，很多時候根本不知道是哪里出了錯。那
核酸檢測革命：可替代PCR的犀利技術——RPA
導讀重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。本專題為大家詳細介紹RPA的原理、引物設計、疑難解答以及在致病菌檢測、病毒檢測以及癌癥研究中的靈活應用。自PCR技術誕生以來已經有三十年了，從經典PCR、實
DNA重組技術－酶切
實驗概要? ? ? ? 通過酶切獲得可進行體外重組的載體和外源DNA實驗原理? ?DNA重組技術是用內切酶分別將載體和外源DNA切開，經分離純化后，用鏈接酶將其連接，構成新的DNA分子。? ? ?限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DN
什么是Cre重組酶？
Cre重組酶是細菌噬菌體P1的I型拓撲異構酶,催化loxP位點間的DNA進行位點特異性重組。本酶無需能量輔助因子，Cre-介導的重組很快在底物與反應產物之間達到平衡 [1] 。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即環化重組酶）是來源于噬菌體P1的一種
快速核酸檢測黑科技——RPA
面對突如其來的新冠疫情核酸檢測引來發展新高潮尤其在分子診斷領域傳統核酸分子檢測技術不斷蛻變和創新從未淡出我們的視野經歷了經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR三個階段這些都離不開PCR的高溫變性低溫退火和延伸離不開精準控溫的PCR儀今天小編給你介紹一個黑科技可以替代PCR的核酸檢測技術--重
核酸檢測的一場革命，可替代PCR的犀利技術
自PCR技術誕生以來已經有三十年了。從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR，這一技術在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。 英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸
同源重組的原理是什么？
同源重組（Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體（sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化，如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等
The－ribonuclease－protection－assay－(RPA)
The ribonuclease protection assay (RPA) is a highly sensitive and specific method for the detection of mRNA species. The assay was made possible by th
什么酶重組等溫擴增技術？
通過模擬生物體遺傳物質自身擴增復制的原理,將來源于細菌,病毒和噬菌體的特定重組酶、外切酶、聚合酶等多酶體系進行改造突變并篩選其功能,通過不同的核酸擴增反應體系進行優化組合,從而獲得核心的重組等溫擴增體系,建立特殊擴增反應體系,在37-42℃恒溫條件下,可將微量DNA/RNA的特異性區段在數分鐘內擴增
DNA重組技術：酶切、連接
實驗原理: DNA重組技術是用內切酶分別將載體和外源DNA切開，經分離純化后，用鏈接酶將其連接，構成新的DNA分子。限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。如EcoRⅠ切割識別序列后產生兩個互補的粘性末端。 5’…G↓A
重組克隆篩選（酶切鑒定）
【實驗目的】1.掌握質粒提取的基本方法的原理；2.學習和掌握限制性內切酶的使用方法。【實驗原理】重組克隆的篩選和鑒定是基因工程中的重要環節之一。不同的克隆載體和相應的宿主系統，其重組克隆的篩選和鑒定方法不盡相同。從理論上說，重組克隆的篩選是排除自身環化的載體、未酶解完全的載體以及非目的DNA片斷插入
重組質粒雙酶切鑒定
既然你的質粒已經提出來了，那么感受態、轉化等因素就不必再考慮了。 你看看雙酶切后載體的位置有幾條帶，如果是兩條，那說明酶切不完全，如果是一條，那說明酶切效率沒問題。 pET28a分子量為5.6k，你的插入片段為500bp，如果你的質粒完全切開，載體和插入片段的摩爾比為1：1，質量比就是5.6
重組蛋白的定義是什么？
重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外重組蛋白的生產主要包括四大系統：原核蛋白表達，哺乳動物細胞蛋白表達，酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統，提高表達成功率。