MVA病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材 150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的維持培養基消化 7 瓶 150 cm2 組織培養瓶培養的基本成片的 CEF 細胞或兩瓶 BHK-21 細胞（見「細胞培養實驗」基本方案 1 步驟 4～7），分裝于 20 個 150 cm2 組織培養瓶中。在加濕的 5% CO2 培養箱 37℃ 培養至接近單層成片的程度 (通常為 2 天/L 分別對 CEF 和 BHK-21 細胞進行 1:3 和 1:10 稀釋。用 BHK-21 細胞時，單層細胞密度應為 90%。2. 移棄培養基并向每瓶中加入 30 ml MEM-2.5 完全培養基。3. 溶解 MVA 病毒并在冰上超聲 ......閱讀全文
MVA－病毒儲液制備實驗
實驗材料成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的維持培養基消化 7 瓶
MVA－病毒儲液制備實驗
基本方案 免疫染色法滴度測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-
MVA－病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材 150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml
MVA－病毒儲液制備實驗——免疫染色法滴度測定
實驗方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法進行測定，因為 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 細胞中形成噬斑。實驗材料CEF 或 BHK-21 細胞MVA病毒儲液試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基1:1 丙酮／甲醇PBS（含和不含3% FBS兩種）PBS／H2O2兔抗
桿狀病毒儲液制備實驗
基本方案 從懸浮培養中制備 基本方案 從單層培養中制備 噬斑試驗測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
桿狀病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒 含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材 150 mm 培養瓶 27℃ 培養箱 倒置顯微鏡 帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機 帶螺口蓋的凍存管 液氮罐 500 ml 旋轉細
痘苗病毒儲液制備
基本方案 噬斑分析測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 HeLa S3
痘苗病毒儲液制備
實驗材料懸浮培養的 HeLa S3 細胞痘苗病毒試劑、試劑盒完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶儀器、耗材Sorvall H-6000A 轉子150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 用血細胞計數器對懸浮培養的 HeLa S3 細胞進行細胞計數。2. 將 5×
痘苗病毒儲液制備
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 HeLa S3 細胞痘苗病毒試劑、試劑盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶儀器、耗材 Sorvall H-6000A 轉子150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 用血細胞計數器對懸浮培養的 HeLa S3 細胞進行細
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——噬斑試驗測定滴度
實驗材料對數生長期單層培養的 Sf 9 細胞試劑、試劑盒桿狀病毒儲液昆蟲細胞培養液儀器、耗材瓊脂糖頂層覆蓋物臺盼藍頂層覆蓋物（選用）60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱1.5 ml 帶螺口蓋的凍存管實驗步驟1. 用含 10％ 胎牛血清的 TNM-FH 培養液稀釋處于對數生長期的 Sf 9 細胞至約
痘苗病毒儲液制備——噬斑分析測定滴度
實驗方法原理經胰酶作用的系列稀釋病毒儲液常被用于感染適當的細胞系。經過幾天的培養后，吸出培養基，將細胞用結晶紫染色。由于感染細胞變縮、變圓和脫落，形成直徑 1～2 mm 顏色較淡的噬斑。實驗材料生長良好的貼壁培養的單層 BSC-1 細胞病毒儲液試劑、試劑盒0.1% 結晶紫（溶于 20% 乙醇）儀器、
桿狀病毒毒種貯液的制備實驗
桿狀病毒是一類具有囊膜包裹的雙鏈環狀DNA病毒，其基因組大小為80~180 kb，在自然界中以節肢動物作為專一性宿主進行感染和傳播。實驗材料桿狀病毒試劑、試劑盒胎牛血清重組病毒儀器、耗材培養箱培養瓶轉子實驗步驟從單層培養中制備：?1a. ?以毎瓶1.8×107?Sf9細胞的密度，將細胞接種于兩個15
重組MVA活體免疫染色實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活體免疫染色可用于檢測改造的痘苗病毒Ankara （MVA），因為MVA不能形成分開的、易辨認的噬斑，并且這種技術不需要利用篩選的標記
重組MVA活體免疫染色實驗
實驗方法原理 活體免疫染色可用于檢測改造的痘苗病毒Ankara （MVA），因為MVA不能形成分開的、易辨認的噬斑，并且這種技術不需要利用篩選的標記基因。實驗材料 匯片生長的CEF細胞試劑、試劑盒 完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培養基轉染細胞裂解液干冰／乙醇抗外源基因表達蛋白一
重組MVA活體免疫染色實驗
實驗方法原理活體免疫染色可用于檢測改造的痘苗病毒Ankara （MVA），因為MVA不能形成分開的、易辨認的噬斑，并且這種技術不需要利用篩選的標記基因。實驗材料匯片生長的CEF細胞試劑、試劑盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培養基轉染細胞裂解液干冰／乙醇抗外源基因表達蛋白一抗辣根
痘苗載體轉染細胞實驗——CaCl2－法
實驗方法原理將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質粒轉染病毒感染的細胞，痘苗病毒基因組與質粒上同源的部分發生同源重組。應用適當的篩選方案，經幾輪噬斑純化，從細胞裂解物中獲得重組病毒。實驗材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
痘苗載體轉染細胞實驗
CaCl2 法 DOTAP 法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質
痘苗載體轉染細胞實驗
實驗方法原理 將感興趣的外源基因亞克隆到質粒轉移載體上，外源基因的兩端為痘苗病毒基因組非必需基因片段。隨后，將重組質粒轉染病毒感染的細胞，痘苗病毒基因組與質粒上同源的部分發生同源重組。應用適當的篩選方案，經幾輪噬斑純化，從細胞裂解物中獲得重組病毒。實驗材料 pSCll／pRB21／pSC65／pLW
反轉錄病毒載體的制備實驗
實驗材料二個反轉錄病毒包裝細胞株反轉錄病毒載體包含選擇性標記試劑、試劑盒PBS細胞染色液組織培養皿儀器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培養基低蛋白質結合的纖維素乙酸鹽注射器式濾器克隆形成環實驗步驟展開
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗4
直接取材鏡檢法實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟為了進行天花、水痘、皰疹等病毒的臨床快速診斷，可用毛細吸管直接刺入病人皮膚皰疹內吸取少量泡液，立即滴于有膜的銅網上，稍干后即用 1%-2% 的磷鎢酸溶液進行負染，待干后立即用電鏡觀察。于電鏡下常可于短時間內發現典型的病毒顆粒。注意
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗1
懸滴標本法實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣，細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等，這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗3
免疫吸附法實驗方法原理有時由于病毒量少，用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子，則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒，用本法檢測病毒，快速、靈敏、特異性強，是可靠的電鏡病毒診斷技術之一，也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗2
實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象，即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色，即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮，從而清楚地顯示出被襯物的
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類，選擇敏感細胞進行培養，如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞）培養，森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞）培養，登革熱病毒用白紋伊蚊
桿狀病毒毒種貯液的制備
實驗材料?桿狀病毒試劑、試劑盒?胎牛血清重組病毒儀器、耗材?培養箱培養瓶轉子實驗步驟 從單層培養中制備：?1a.? 以毎瓶1.8×107 Sf9細胞的密度，將細胞接種于兩個150 cm2 培養瓶，在含10%胎牛血清的完全培養液中培養。于27℃讓細胞貼壁3 h，然后移去完全培養液。以感染復數為
轉運反應成分的制備實驗——胞質液的制備
實驗材料血試劑、試劑盒酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、網狀細胞和紅細胞胞質液的制備1. 自動物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 檸檬酸三鈉，38 mmol/L 檸檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——負染色技術
實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象，即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色，即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮，從而清楚地顯示出被襯物的
怎么固定儲液器？
儲液器各部件間一般采用釬焊的連接方式固定。因為釬焊是采用液相溫度（熔點）比母材固相溫度低的金屬材料作為釬料，將零件和釬料加熱到釬料熔化，利用液態釬料潤濕母材，填充接頭間隙并與母材相互溶解和擴散而實現連接零件的方法。 釬焊的優點 a)、釬焊接頭平整光滑，外形美觀。 b)、釬焊加熱溫度較低，對