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    大鼠肝細胞分離實驗

    實驗方法原理 經肝門靜脈或肝門靜脈分支插管,用無鈣緩沖液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗滌細胞,計數有活力的肝細胞。試劑、試劑盒 L-15 Leibovitz 培養液Ham F12 培養液胞培養液HMM SF無鈣 HEPES 緩沖液膠原蛋白酶液5% 戊巴比妥鈉肝素儀器、耗材 聚乙稀管一次性 20 G 頭皮靜脈輸液針縫合線 l 注射器水浴箱蝠動泵實驗步驟 一、材料1. 無菌 (1)L-15 Leibovitz 培養液 (2)Ham F12 培養液或 WilliamE 培養液:80~100 ml,含有 0.2% 牛白蛋白(V 級,Sigma) 和 1 ug/ml 牛胰島素 (3)胞培養液(hepatocyte minimalmediu,HMM ):67.5% EMEM 和 22.5%199 培養液,或用 William E 培養液代替這兩種培養液。添加 5ug/ml ......閱讀全文

    細胞的離心分離基礎和分離實例(四)

    例2. 從人血中分離紅細胞,單核(白)細胞,中性(白)細胞 i. 新鮮人血(3~5)ml 用抗凝劑處理。 ii.  15ml 離心管中先注入5ml 分離液Polymorphprep(Nycomed Pharma A/S 公司產品), 然后鋪上用抗血凝劑處理過的人全血5ml 。 iii. 臺

    強迫游泳、懸尾、曠場實驗相關-抗郁丸對CUMS抑郁癥大鼠行..

    強迫游泳、懸尾、曠場實驗相關-抗郁丸對CUMS抑郁癥大鼠行為學及機理的影響摘要:目的 研究抗郁丸對慢性溫和不可預見性應激(CUMS)抑郁癥大鼠行為學及血清中甲狀腺激素、細胞因子的影響,探討抗郁丸治療抑郁癥的作用機理。方法 采用慢性溫和不可預見性應激結合孤養方法構建CUMS大鼠模型。60只雄性大鼠隨機

    生物醫學主要研究課題中實驗動物的選擇

    一、免疫學研究中實驗動物的選擇   在免疫學研究中,常選用以下的幾種實驗動物:    (一)大鼠:大鼠對綿羊紅細胞和牛r球蛋白的免疫反應有品系差異。大鼠有抗體IgE,蠕蟲感染常能誘發大量的IgE抗體,它們存在于血液循環中,常規的免疫法只能使大鼠產生少

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

    常見體外肝細胞損傷模型

    1.四氯化碳體外損傷肝細胞模型原代培養的正常大鼠肝細胞培養24h(貼壁良好)后,置培養皿于一密閉的塑料盒,內置四氯化碳0.4M容積,37度90min,造成肝細胞損傷的模型,后轉入正常培養,進行下一步實驗。(即熏蒸法)肝細胞培養12h后,吸棄上清,更換培養液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

    大鼠肝細胞生長因子(HGF)定量檢測試劑盒使用說明

    【產品名稱】通用名稱:大鼠肝細胞生長因子(HGF)定量檢測試劑盒(ELISA)英文名稱:Rat  hepatocyte growth factor(HGF)ELISA KIT【預期用途】僅供科研使用,定量檢測血清、血漿、細胞培養上清液中大鼠肝細胞生長因子(HGF)的濃度。【檢驗原理】本試劑

    2012國家自然科學基金哪些干細胞項目資助金額最大

      國家自然科學基金委員會公布了2012年度面上項目、重點項目、重大國際(地區)合作研究項目、青年科學基金項目、地區科學基金項目、海外及港澳學者合作研究基金項目、科學儀器基礎研究專款項目等方面的評審結果。有關評審結果將通知相關依托單位,其科研管理人員可登錄科學基金網絡信息系統(https:

    腫瘤動物模型建立實驗——誘發性腫瘤動物模型

    腫瘤動物模型的建立可應用于:(1)評價抗腫瘤免疫治療的療效;(2)作為抗腫瘤藥物篩選模型;(3)為腫瘤轉移研究提供更好的研究平臺;(4)為研發抗腫瘤轉移性藥物提供良好的實驗工具。實驗方法原理誘發性腫瘤動物模型是指研究者用化學致癌劑、放射線、致癌病毒誘發動物的腫瘤等。實驗材料腫瘤細胞小鼠試劑、試劑盒無

    細胞組分的分析方法——線粒體的分離與觀察

    一.實驗目的用差速離心法分離動、植物細胞線粒體。二.實驗原理  線粒體(mitochondria)是真核細胞特有的,司能量轉換的重要細胞器。細胞中的能源物質——脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化,并通過藕聯磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行

    不同強度運動對糖尿病造模大鼠的血清IL-6.β2-MG及腎臟...

    不同強度運動對糖尿病造模大鼠的血清IL-6.β2-MG及腎臟TGF-β1蛋白表達的影響【摘要】目的探究不同強度運動干預在糖尿病造模過程對血清白細胞介素6( interleukin6,I-6)、β2微球蛋白(B2 microglobulin,2MG)和腎臟轉化生長因子l( transforming

    CRISPR/Cas9技術,熱度背后的冷思考

      俞曉峰博士現任賽業模式生物副總裁、高級科學家,負責基因修飾模式動物的研發與技術服務等工作。   俞博士在遺傳基因模式動物領域有超過20年研發與管理等方面的豐富經驗,在干細胞相關領域及哺乳動物細胞系基因改造研究也取得了巨大成就,其研究成果多次發表在Nature Immunology、Hum Mo

    人類疾病的動物模型

    第一節  概念及意義     一、概念    人類疾病的動物模型(animal model of human disease) 是指各種醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物。   

    生物芯片技術在藥物R&D中的應用(四)

    3 生物芯片在毒理學研究中的應用  對藥物進行毒性評價,是藥物篩選過程中十分重要的一個環節。現在毒理學家多采用鼠為模型通過動物實驗來確定藥物的潛在毒性。這些方法需要使用大劑量的藥物,花上幾年時間,花費巨大。 DNA芯片技術可將藥物毒性與基因表達特征聯系起來,通過基因表達分析便可確定藥物毒性,

    深度完整版:CAR-T的現狀和未來

      CAR-T(T細胞嵌合抗原受體)作為一種免疫細胞治療方案,在全球范圍內吸引了包括學者、醫生、患者、投資人的大量關注。然而CAR-T具體是什么,它的背后有什么樣的故事、目前的研究狀況如何,未來又將走向何方呢?  CAR-T帶來的新曙光  自古以來,人們不斷地與癌癥進行斗爭。科學家們考古發現的木乃伊

    原代細胞的培養與建系-1

                          原代細胞的培養與建系   細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離

    膜片鉗技術的應用進展(一)

    【摘要】  膜片鉗技術是研究離子通道的“金標準”,應用該技術可以證實細胞膜上離子通道的存在,并能對其電生理特性、分子結構、藥物作用機制等進行深入的研究。 【關鍵詞】  膜片鉗技術 離子通道 進展    1976年由德國馬普生物物理化學研究所

    Ⅰ相代謝穩定性研究原理及實驗方法

    Ⅰ相代謝穩定性研究原理及實驗方法1 概述1.1 藥物代謝研究簡介藥物代謝研究是創新藥物研發的重要內容,它不僅決定了創新藥物制劑研發的成敗,而且與創新藥物研發的速度和質量有密切關系。因而,藥物代謝研究在新藥研發工程中具有不可或缺的重要作用,研究藥物代謝對于了解藥物在體內的變化過程至關重要。藥

    細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞培養實驗

    實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC,通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB

    2012國家自然科學基金評審結果名單之復旦大學(生物類)

      來自國家自然科學基金委員會的消息,國家自然科學基金委員會公布了2012年度面上項目、重點項目、重大國際(地區)合作研究項目、青年科學基金項目、地區科學基金項目、海外及港澳學者合作研究基金項目、科學儀器基礎研究專款項目等方面的評審結果。有關評審結果將通知相關依托單位,其科研管理人員可登錄

    年終盤點:2016年國內不容錯過的重磅生物研究

      時間總是過得很快,2016年馬上就要過去了,迎接我們的將是嶄新的2017年,2016年,我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果,發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究,以饕讀者。   --結構生物學 --  1.清華大學 施一

    懸浮細胞的分離方法

    組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,zui簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘,若懸液量大,可適當延長離心時間,但速度不能太高,延時也不能太長,以避免擠壓或機械損傷細胞,離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次,用培養基洗一次后,調整適當細胞濃度后再分瓶培養,若選用懸液中某些細胞,

    人類疾病的動物模型-2

    三、呼吸系統疾病動物模型的復制    急性呼吸窘迫綜合征(RDS)    關于該模型復制方法,除國內外多數采用的油酸法外,尚有靜脈注射致死量大腸桿菌內毒素、出血性休克、高濃度氧吸入等等。但目前認為用油酸法制備RDS 模型比較理想,因為這種模

    亞細胞構造的離心分離典型實驗

    一)簡介:用簡易的差分離心結合各種型式的密度梯度離心可以分離和純化各種亞細胞器。研究者也可以根據自己的設備情況對實驗參數做一定的改動,也可以更多地利用速率-區帶密度梯度離心或等密度離心來簡化實驗過程和提高分離純度。二)實驗:ⅰ)勻漿制備: 鼠肝12克加入0.25M蔗糖與5mM Tris-H

    個別組織細胞的培養

    體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別

    RT-PCR實驗方法大全

    RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單

    消化系統藥理實驗中的選擇與應用

    消化系統藥理實驗中的選擇與應用  (一)消化系統分泌實驗  1.胃液分泌實驗 胃液收集常選用狗和大白鼠。由狗右側嘴角插入胃管收集胃液,大白鼠則需剖腹,從幽門端向胃內插入一直徑約3mm的塑料管,在緊靠幽門處結扎固定,以收集胃液,可進行胃酸的測定和胃蛋白酶的測定。  2.胰液分泌實驗 胰液收集可選用狗、

    細胞培養技術-3

    ◇水解乳蛋白  水解乳蛋白為淡黃色粉末,雖易潮解結塊,但不影響使用。  不同批號和牌號質量有差異。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解后的產物,含有豐富的氨基酸。開始時它是專為猴腎細胞培養設計的,而實際上它對許多細胞系(株),如Hela細胞和原代細胞都是一種優良培養基。使用時用Hanks液配制成0

    腫瘤動物模型建立實驗(二)

    5、鼻咽癌(1)二甲基膽蒽(MC)誘發大鼠鼻咽癌① 取直徑2~3 mm的硬質塑米管,在酒精燈上小火拉成錐形,每段長約3.5 cm,管內填以結晶體MC。② 小管一端用火封閉,以防藥物外溢,尖端用針刺數孔,使MC能從小妃溢出。③ 取體重120 g左右的大白鼠,雌雄均可,乙醚麻醉后,由前鼻孔將上述含MC的

    常規動物實驗模型制作(復制)方法(一)

    一、腫瘤動物模型的建立將對數生長的腫瘤細胞收集 , 用無血清基質 10.0ml, 于 1500 轉/ 分, 離心3min, 連續洗 3 次, 最后用無血清基質混勻, 用血

    誘導性多能干細胞最新研究進展

      誘導性多能干細胞(iPS細胞)最初是日本科學家山中伸彌(Shinya Yamanaka)團隊在2006年利用病毒載體將四個轉錄因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的組合轉入到小鼠胚胎或皮膚纖維母細胞中,使其重編程而得到的類似胚胎干細胞的一種細胞類型。這些ips細胞在形態、基因和

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