細胞組分的分析方法——線粒體的分離與觀察
一.實驗目的用差速離心法分離動、植物細胞線粒體。二.實驗原理 線粒體（mitochondria）是真核細胞特有的，司能量轉換的重要細胞器。細胞中的能源物質——脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化，并通過藕聯磷酸化生成ATP，供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的。 制備線粒體采用組織勻漿懸液介質中進行差速離心的方法。在一給定的離心場中（對于所使用的離心機，就是選用一定的轉速），球形顆粒的沉降速度取決于它的密度、半徑和懸浮介質的粘度。在一均勻懸浮介質中離心一定時間內，組織勻漿中的各種細胞器及其它內含物由于沉降速度不同將停留在高低不同的位置。依次增加離心力和離心時間，就能夠使這些顆粒按其大小、輕重分批沉降在離心管底部，從而分批收集。細胞器中最先沉淀的是細胞核，其次是線粒體，其它更輕的細胞器和大分子可依次在分離。 懸浮介質通常用緩沖的蔗糖溶液，它比較接近細胞質的分散相，在一定程度上能保持細胞......閱讀全文
細胞組分的分析方法——線粒體的分離與觀察
一.實驗目的用差速離心法分離動、植物細胞線粒體。二.實驗原理 線粒體（mitochondria）是真核細胞特有的，司能量轉換的重要細胞器。細胞中的能源物質——脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化，并通過藕聯磷酸化生成ATP，供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行
線粒體的分離與觀察
一、實驗目的1. 初步掌握用差速離心法分離大鼠肝細胞線粒體的方法。2. 學習并掌握高速離心機和勻漿器的使用方法。二、實驗原理線粒體(mitochondria)是真核細胞中產生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化，并通過偶聯磷酸化生成ATP，供給細胞生理活動之需。
細胞、細胞器及組分的分離與觀察2
細胞器標記酶的測定是評價細胞器內膜組分和分離純度的主要依據,如線粒體內膜上分布有細胞色素氧化酶,該酶使詹納斯綠B染料保持在氧化狀態呈現藍綠色,從而使線粒體顯色,而胞質中的染料被還原成無色。詹納斯綠B是一種活體染料,能對動植物的細胞或組織在活體狀態下進行無毒害的染色。由于染料（堿性染料）的膠粒表面帶有
細胞、細胞器及組分的分離與觀察1
葉綠體的分離與熒光觀察一、實驗目的了解葉綠體分離的一般原理和方法,并熟悉應用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現象。二、實驗原理葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器,能發生特有的能量轉換。利用低速離心機可以分離葉綠體,其分離在等滲溶液（0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液）中進行,目的是為了防
線粒體的提取與觀察
線粒體是細胞中重要的細胞器，存在于絕大多數生活細胞中，它的主要功能是提供細胞內各種物質代謝所需要的能量。正由于這樣，對線粒體膜，呼吸鏈酶及線粒體DNA等成分的結構，功能以及物理化學性質的研究已經成為細胞生物學研究中的重要課題，所以提取線粒體的技術已經成為線粒體研究中必不可少的手段，線粒體大量存在于代
線粒體的提取與觀察
線粒體是細胞中重要的細胞器，存在于絕大多數生活細胞中，它的主要功能是提供細胞內各種物質代謝所需要的能量。正由于這樣，對線粒體膜，呼吸鏈酶及線粒體DNA等成分的結構，功能以及物理化學性質的研究已經成為細胞生物學研究中的重要課題，所以提取線粒體的技術已經成為線粒體研究中必不可少的手段，線粒體大量存在于代
細胞組分的分析方法
實驗概要本文介紹了細胞組分分析方法的原理及操作流程等。實驗原理核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一，是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連．形成
線粒體和細胞核的制備與觀察
實驗概要本實驗介紹了線粒體和細胞核制備的基本原理及操作。對分離得到的細胞核及線粒體進行了活性鑒定，有助于掌握用差速離心技術分離制備動物細胞核及線粒體的方法。實驗原理利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異，可采取分級差速離心的方法，將細胞核與線粒體逐級分離出來（差速離心技術）。線粒體是真核細胞
細胞組分的分析方法2
4.rDNA片段的制備 (1)對所得重組質粒DNA進行SacⅠ酶切，反應體系如下：SacⅠ 4μl(約20單位)，質粒DNA 50μl(20μg)，10×緩沖液(0.5mol/L Tris-HCl，pH7.5，50mmol/L MgCl2)10μl，滅菌重蒸水36μl。 (2)將反應后
細胞組分的分析方法1
一.基本原理核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一，是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連．形成腺嘌呤與胸腺嘧啶(A．T)，鳥嘌呤與胞嘧啶（G．C
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要掌握細胞核與線粒體的分級分離的實驗技術。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理?? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究
細胞核與線粒體的分級分離
實驗概要通過細胞勻漿和離心的方法分級分離細胞的組分，以了解其原理及過程。實驗原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究亞細胞成分的化
細胞核與線粒體的分級分離
一、所需試劑及設備小白鼠、冰塊、玻璃勻漿器、普通離心機、臺式高速離心機、普通天平、光學顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刻度離心管、高速離心管、滴管、10ml量筒、25m1燒杯、玻璃漏斗、解剖剪、鑷子、吸水紙、紗布、蠟盤、平皿、牙簽。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
細胞核與線粒體的分級分離
? 一、原理??? 細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。??? 分離細胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成
用分離的亞細胞組分進行激酶分析
實驗材料細胞器樣品試劑、試劑盒激酶分析緩沖液ATP儀器、耗材SDS-PAGE 凝膠實驗步驟1. 準備反應混合物：反應體積通常是 50~100 ml。5X 激酶分析緩沖液????????????????????????????? 10 μl[γ-32P] ATP（終濃度 5 μCi/5μmol/L)?
線粒體的超活染色與觀察
實驗原理活體染色是指對生活有機體的細胞或組織某些結構能著色但又不影響細胞的生命活動和產生任何物理化學變化以致引起細胞的死亡的一種染色方法。因此活染技術通常可用來研究生活狀態下的細胞形態結構和生理、病理狀態。根據所用染色劑的性質和染色方法的不同，通常把活體染色分為體內活染與體外活染兩類。體內活染是以膠
線粒體的超活染色與觀察
實驗簡介：線粒體是機體能量代謝的重要細胞器。本實驗以肝細胞、人口腔上皮細胞、洋蔥鱗莖內表皮細胞三種材料為實驗對象，通過詹納斯綠B 專一性地對線粒體進行超活染色，可使線粒體內中的細胞色素氧化酶系呈藍綠色反應，而線粒體周圍的細胞質呈無色反應，由此作為線粒體的特異性特征。實驗學時3 個。一、實驗目
觀察植物細胞的質壁分離與復原
一 質壁分離原理 當外界溶液濃度大于細胞液濃度時，根據擴散作用原理，水分會由細胞液中滲出到外界溶液中，通過滲透作用失水，使細胞壁和原生質層都出現一定程度的收縮。由于原生質層比細胞壁的伸縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開來，也就是逐漸發生了質壁分離。 反之，外界溶液
用差速離心法從大鼠肝臟中分離原代細胞重線粒體組分
試劑和器材1.?甘露醇緩沖液：0.2mol/L甘露醇、50mmol/L蔗糖溶液、10mmol/L KCl、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.?玻璃棒；3.?Dounce勻漿器（20—30ml寬松配制，Wheaton B型）；4.?高轉矩橋式電動機（半
細胞[組分]分級分離的定義
中文名稱細胞[組分]分級分離英文名稱cell fractionation定 義應用不同的離心技術，將細胞勻漿中的各種細胞器或不同組成成分分離純化的過程。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
植物細胞的質壁分離與復原觀察實驗
一 質壁分離原理 當外界溶液濃度大于細胞液濃度時，根據擴散作用原理，水分會由細胞液中滲出到外界溶液中，通過滲透作用失水，使細胞壁和原生質層都出現一定程度的收縮。由于原生質層比細胞壁的伸縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開來，也就是逐漸發生了質壁分離。 反之，外界溶液
葉綠體的分離與熒光觀察實驗方法與步驟
葉綠體 ?足植物細胞所特有的能量轉換細胞器，光合作川就是在葉綠體中進行的。由于具有這一重要功能，所以它一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器，利用低速離心即可分離集中進行各種研究。 實驗目的 一、通過植物細胞葉綠體 ?的分離。了解細胞器分離
葉綠體的分離與熒光觀察
實驗方法原理 組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心，是分離細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質黏度等。同一離心場中，同一時間內，密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時間，就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離
葉綠體的分離與熒光觀察
實驗概要本實驗介紹了葉綠體分離的基本原理及操作步驟。有助于了解葉綠體分離的一般原理和方法，并熟悉應用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現象。實驗原理葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器，能發生特有的能量轉換。利用低速離心機可以分離葉綠體，其分離在等滲溶液（0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液）
葉綠體的分離與熒光觀察
葉綠體足植物細胞所特有的能量轉換細胞器，光合作川就是在葉綠體中進行的。由于具有這一重要功能，所以它一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器，利用低速離心即可分離集中進行各種研究。實驗目的一、通過植物細胞葉綠體的分離。了解細胞器分離的一般原理和方法。二．觀
線粒體分離實驗—從組織培養細胞中分離線粒體
實驗材料細胞試劑、試劑盒RSBMS 緩沖液儀器、耗材Dounce 勻漿器實驗步驟1. 用 11 ml 冰上預冷過的 RSB 重新懸浮細胞，轉移到一個 15 ml 的 Dounce 勻漿器中RSB（使組織培養細胞膨脹的低滲緩沖液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
細胞組分的分析方法——定量細胞化學分析技術1
一.流式細胞光度術－單細胞懸液染色標本的多信息分析法1.概述 流式細胞光度計(flow cytometry)可定量地測定某一細胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量，以及細胞群體中上述成分含量不同的細胞的數量，特別是它還可將某一特異染色的細胞從數以萬計的細胞群體中分離出來，以及將DNA含量不同的
細胞組分的分析方法——定量細胞化學分析技術2
5.固定方法(1)福爾馬林法： 在單細胞懸液中加入等體積含8％甲醛的鹽水G，4℃下固定12至18小時。該法常用于Acriflavine-Feulgen染色。(2)乙醇法： 細胞被重新懸浮于5ml冷鹽水G中，慢慢加入-20℃95％的乙醇15ml，其最終濃度為70％，冰浴30分鐘。此法常用于EB及P