斑點金免疫滲濾測定（DIGFA）實驗
實驗方法原理 斑點金免疫滲濾測定法是在斑點免疫滲濾測定法基礎上，改用膠體金標記物代替酶，省去底物顯色的步驟。試驗方法是以硝酸纖維素膜（NC膜）為載體，將試劑及標本滴加在膜上，通過滲濾而逐步反應。全過程可于數分鐘內完成，陽性結果在膜上呈紅色斑點。實驗材料 細胞樣品試劑、試劑盒 PBS吐溫-20BSA特異性抗體 抗原金標抗體儀器、耗材 滲濾裝置NC膜實驗步驟 一、試劑及材料 1. 滲濾裝置：為一塑料小盒（4x3x0.6 cm），分為底、蓋兩層，蓋的中央有一個直徑0.5 cm的小孔。盒底充填吸水性較強的墊料，蓋孔下，緊貼墊料放置一片NC膜。緊閉盒蓋，即為滲濾裝置。在孔中的NC膜上點加1-2 ml特異性抗體(一抗)或抗原，室溫自然干燥，保存于放干燥劑的密封塑料袋中備用。 2. 封閉液：含0.2%BSA和0.05%吐溫-20的洗滌液。 3. 洗滌液：50 mo......閱讀全文
斑點酶聯免疫吸附測定
實驗概要斑點酶聯免疫吸附測定法(DotELISA，DELISA)是以纖維素膜代替免疫酶固相載體法中常用的聚苯乙烯微量反應板而建立的一種免疫檢驗方法。DELISA不僅保留了常規ELISA的優點，而且還彌補了抗原或抗體對載體包被不牢等不足，所以具有敏感性高，特異性強，被檢樣品用量少，節省材料，不需特殊儀
免疫金標記檢測方法標準操作程序
【目的】 保證免疫金標技術檢驗準確性 【本SOP適用范圍】 免疫金標技術 【原理】 氯化金分子在還原劑作用下聚合形成金顆粒，顆粒與顆粒之間因靜電作用而相互排斥，使其保持一個比較穩定的膠體狀態，故稱作膠體金。利用膠體金顆粒的高電子密度及其表面能結合生物大分子(如抗體、SPA、植物血凝素和
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)
實驗材料 血液樣品細胞樣品試劑、試劑盒 70％乙醇PBS脫脂奶粉鏈霉親和素檢測抗體包被抗體儀器、耗材 PVDF膜96孔培養板硝基纖維素底板免疫斑點板酶標板實驗步驟 一、包被96孔板?用70％乙醇浸潤96孔板中的PVDF膜30 s?加入捕獲抗體（PBS稀釋），4℃過夜?倒空板中包被液，輕輕在紙上拍干，
臨床化學檢查方法介紹弓形蟲點免疫金滲濾法介紹
弓形蟲點免疫金滲濾法介紹： 染色試驗(MBD)是診斷弓形蟲病的可靠和敏感的方法，其在早期感染即出現陽性，并能維持1年之久，但該試驗需用活的弓形蟲，一般的醫學檢驗室不易進行。補體結合試驗陽性反應出現在病程后期并轉陰較快，與染色試驗結合使用有參考價值。弓形蟲點免疫金滲濾法正常值：??? 陰性：無色斑點
什么是膠體金法？膠體金法定義及分類
膠體金是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor將膠體金引入免疫
膠體金檢測描述
膠體金是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能利用到。 1971年Faulk 和Taytor將膠體金引
免疫膠體金(Immune－colloidal－gold)基本原理和常用的免疫膠...
免疫膠體金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫膠體金膠體金是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學
膠體金標記的抗體是什么意思
膠體金是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor將膠體金引
HCG金標免疫試驗方法及注意事項
1．金標免疫試驗的原理將氯金酸(HAuCl4)用還原法制成一定直徑的金溶膠顆粒(膠體金)標記抗體，(或金黃色葡萄球菌A蛋白SPA)。金標為一種催化劑，經還原劑(如對苯二酸)處理，將顯影劑中的銀離子還原成不溶性金屬銀，沉淀在每個金顆粒的周圍，銀沉淀在光鏡下可清楚地顯示。滴金免疫實驗原理同一般免疫斑點實
酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法
酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法是一種在單細胞懸液中檢測分泌某種特定蛋白質的細胞和定量分析產生該特定蛋白質的細胞頻率的有力工具。1983年，Crekinsky等運用ELISPOT技術成功檢出分泌特異性抗體的細胞頻率，經過不斷發展，目前該技術已廣泛用于檢測產生、分泌多種其他效應分子
酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法
酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法是一種在單細胞懸液中檢測分泌某種特定蛋白質的細胞和定量分析產生該特定蛋白質的細胞頻率的有力工具。1983年，Crekinsky等運用ELISPOT技術成功檢出分泌特異性抗體的細胞頻率，經過不斷發展，目前該技術已廣泛用于檢測產生、分泌多種其他效應分子的細胞(如細胞因
酶聯免疫斑點試驗的實驗目的
中文名稱酶聯免疫斑點試驗英文名稱enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 義一種酶聯免疫技術。用于測定分泌特異性抗體或細胞因子的單個細胞對特異性抗原的應答能力，及產生應答的細胞數量。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷
抗結核菌抗體3種測定方法臨床應用評價
用進口免疫色譜層析抗結核菌抗體測試卡(ICT-TB卡)對128例肺結核病人血清和103份對照血清進行測試，并與國產免疫金滲濾法(DIGFA)和38 kD抗原酶聯免疫試劑(ELISA)進行比較。1 材料與方法 1.1 標本 128份活動性肺結核病人血清取自本院及閔行、奉賢結防院住院病人(肺結核的診斷
膠體金及金標檢測技術研究進展
繼三大標記技術（熒光素、放射性同位素和酶）之后，一種固相標記免疫測定技術--免疫膠體金技術（Immune colloidal gold technique, ICG）逐漸發展起來。它是以膠體金作為標記物，利用抗原抗體特異性反應，對抗原或抗體物質進行定性乃至定量研究的標記技術。近年來，該技術因其操作簡
金標免疫斑點法檢測肺炎支原體感染及應用
張化濤? （勝利石油管理局臨盤醫院?? 山東? 臨邑? 251507）? 肺炎支原體（Mp）是引起呼吸道感染的致病微生物,它除了引起非典型肺炎外，還可以引起上呼吸道感染。由于MP對一般治療肺炎、上呼吸道感染的藥物有耐藥性，因此及時進行支原體抗體檢測有助于明確診斷和治療。我們采用金標免疫斑點法檢測患
抗結核菌抗體3種測定方法臨床應用評價
用進口免疫色譜層析抗結核菌抗體測試卡(ICT-TB卡)對128例肺結核病人血清和103份對照血清進行測試，并與國產免疫金滲濾法(DIGFA)和38 kD抗原酶聯免疫試劑(ELISA)進行比較。 1 材料與方法 1.1 標本 128份活動性肺結核病人血清取自本院及閔行、奉賢
抗結核菌抗體3種測定方法臨床應用評價
用進口免疫色譜層析抗結核菌抗體測試卡(ICT-TB卡)對128例肺結核病人血清和103份對照血清進行測試，并與國產免疫金滲濾法(DIGFA)和38 kD抗原酶聯免疫試劑(ELISA)進行比較。1 材料與方法 1.1 標本 128份活動性肺結核病人血清取自本院及閔行、奉賢結防院住院病人(
抗原和抗體濃度的優化免疫斑點實驗
對于一個給定的抗原，最佳的抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力，以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。最優抗原和抗體濃度可通過免疫印跡實驗中使用不同濃度的抗原和抗體作用確定。另外，更快和更簡單的方法是進行斑點印跡實驗。以下是使用超敏感信號底物進行的斑點印跡的操作方法：1、 用TBS和P
免疫學實驗血吸蟲斑點酶聯免疫吸附試驗介紹
血吸蟲斑點酶聯免疫吸附試驗介紹： 在血吸蟲病的免疫學診斷中，除試用過幾乎所有的各種免疫學檢驗方法。此外，還有以血吸蟲尾蚴和蟲卵作為抗原的尾蚴膜試驗和環卵沉淀試驗。現介紹敏感性、特異性較高且使用廣泛的酶聯免疫吸附試驗。血吸蟲斑點酶聯免疫吸附試驗正常值：??? 陰性：無色。血吸蟲斑點酶聯免疫吸附試驗臨
免疫膠體金的制備及其在醫學檢驗中的應用
摘要免疫膠體金技術是四大免疫標記技術之一，問世二十多年來發展十分迅速，在生物醫學各研究領域特別是在醫學檢驗中得到了日益廣泛的應用。本文從膠體金技術的基本原理、制備方法、標記技術和實際應用等幾個方面對膠體金技術作了較系統介紹。 1971年Faulk 和Taytor將膠體金引人免疫化學，此
免疫膠體金技術(Immune－colloidal－gold－technique)
（一）??原理?免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電
免疫膠體金技術(Immune－colloidal－gold－technique)大總結
(一) 原理免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原?抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電荷
人類免疫缺陷病毒實驗室檢測技術研究進展
?人類免疫缺陷病毒（HIV）檢測的主要目的是用于獲得性免疫缺陷綜合癥（AIDS）即艾滋病的病原體診斷。本文就近年來HIV檢測的研究進展綜述如下。?????????1 抗原檢測?????????常用的HIV抗原檢測是Ｐ24抗原技術。機體感染HIV后，P24抗原是最早能從血清中檢出的病原學標志，通常感染
斑點免疫層析試驗原理
原理 斑點免疫層析試驗（dotimmunochromatographicassay，DICA）簡稱免疫層析試驗（ICA），也以硝酸纖維素膜為載體，但利用了微孔膜的毛細血管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般
免疫膠體金技術的基本知識
一、免疫膠體金技術的基本知識1、膠體金的概念氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。2、免疫金標記技術膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質
免疫斑點試驗的原理
硝酸纖維素膜和醋酸纖維素膜具有很強的靜電吸附力，在中性條件下即可有效地吸附蛋白質等生物大分子。因而，將抗原吸附于纖維素膜后，就可利用纖維素膜作為固相進行抗原抗體反應。當加入抗體后(即可與膜上的抗原結合，犎；后再加入帶有標記物的抗體，使標記通過抗抗體和相應抗體的結合間接地交聯于纖維素膜上。加入標記
斑點免疫層析試驗的原理
原理：免疫層析試驗的原理與免疫滲濾相同，不同點在于液體的移動不是通過直向的穿流，而是基于層析作用的橫流。在一塑料片條上依次粘貼如下組分：①吸水紙；②玻璃纖維膜，膜上固定著干燥的金標抗體；③硝酸纖維素膜，膜上包被著線條狀的抗體；④吸水紙。
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)_PVDF－Elispot法
實驗方法原理細胞受到刺激后局部產生細胞因子，此細胞因子被特異單克隆抗體捕獲。細胞分解后， 被捕獲的細胞因子與生物素標記的二抗結合，其后再與堿性磷酸酶標記的親和素結合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF孔板出現"紫色"的斑點表明細胞產生了細胞因子，通過ELISPOT酶聯斑點分析系統對斑點的分析后得出
免疫金組織化學染色實驗
實驗方法原理 免疫金染色（immunogold staining，IGS）法是由 Geoghegan 等（1978）首次應用金標探針檢測 B 淋巴細胞表面抗原，將膠體金顆粒（大于 20 nm）標記在第二抗體或 SPA 分子上，制備成金標二抗。其原理是當特異性抗體與抗原結合后，用金標二抗或金標
免疫印跡技術和免疫斑點技術
免疫印跡技術又稱Western印跡法，它將凝膠電泳與固相免疫結合，首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上，再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質并確定其分子質量，常用于檢測多種病毒抗體或抗原。免疫印跡技術又稱Western印跡法，它將凝膠電泳