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基于轉化醫學的研究理念，銳賽知道，每一項臨床疾病的致病源頭或表象最初都是由個體體內某個基因的突變導致了。所以每一項臨床疾病的研究，整體課題項目開展的最初源頭也必須從一個基因開始。 銳賽在多年的轉化醫學研究中，在于各個臨床醫師的整體項目合作中，探討得出的不僅是轉化醫學臨床研究課題的整體思路，一般實驗方向，更有各個環節單項具體實驗的操作紀要。 現將整體實驗的一般實驗方案，各單項技術的實驗方法在此分享給大家，不僅是為了大家實驗室的需要更是為了進一步提高轉化醫學的效率，為病患之需而行。 對于整體項目的一般實驗思路： 基因-基因化學合成/調取-載體構建-病毒包裝-穩轉株構建-細胞功能實驗-動物實驗/臨床樣本分析-數據分析統計，研究 病毒包裝技術1——病毒與非病毒載體 病毒載體的優勢 特點 病毒載體來源于對病毒基因組進行操作和改造，消除致病性基因，保留其感染活性，使之成為具有生物活性的......閱讀全文
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
基因療法以其“一次給藥，終身受益”的優勢越來越受到醫療市場的青睞。截至目前，歐洲藥品管理局（EMA）、美國食品藥品管理局（FDA）及中國國家食品藥品監督管理總局（NMPA）等機構至少已批準13種基因治療產品上市，同時還有2500多項細胞和基因治療正在進行臨床試驗。2019年8月，國際頂級期刊《新
基因療法以其“一次給藥，終身受益”的優勢越來越受到醫療市場的青睞。截至目前，歐洲藥品管理局（EMA）、美國食品藥品管理局（FDA）及中國國家食品藥品監督管理總局（NMPA）等機構至少已批準13種基因治療產品上市，同時還有2500多項細胞和基因治療正在進行臨床試驗。2019年8月，國際頂級期刊《新
不論是細胞治療還是基因治療都離不開病毒載體。目前使用最多的病毒載體類型包括：腺相關病毒（AAV）、慢病毒（Lv）、逆轉錄病毒（Rv）和腺病毒（Adv）等，這些常用病毒載體特性如下圖所示：特征慢病毒Lentivirus逆轉錄病毒Retrovirus腺相關病毒AAV腺病毒ADV基因表達穩轉/瞬轉穩轉瞬轉
IS PCR的技術特點 （1）既具有PCR的特異性與高靈敏性，又具有原位雜交的定位準確性；（2）測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列，甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA；（3）有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析；（4）可用于正常或惡性細胞，感染或非感染細胞的鑒定
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
劉光清 劉在新 謝慶閣(中國農業科學院蘭州獸醫研究所農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,蘭州730046)摘 要: 反向遺傳技術是一種新興的分子生物學技術, 已廣泛應用于生命科學研究的各個領域。綜述反向遺傳技術研究進展,并討論該技術在口蹄疫病毒研究中的應用。關鍵詞: 反向遺傳學 反向遺傳技術 全長c
在作為載體時，這些噬菌體有一個很大的優點，即克隆到M13mp載體的外源DNA片段（雙鏈），在子代噬菌體便成為了單鏈形式。故應用M13mp進行克隆，可方便地分離到大量含有外源DNA某一單鏈的DNA分子。這種單鏈DNA可在下列工作中作模板：①主要用作雙脫氧鏈終止法進行DNA序列測定的模板；②制備僅有一條
1. RNAi 介紹 RNA 干擾（RNAi:RNA interference）是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello（1）在線蟲實驗中發現的，2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導
1. RNAi 介紹RNA 干擾（RNAi:RNA interference）是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello（1）在線蟲實驗中發現的，2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導。這個方法與常規方
關鍵問題：這是天上掉餡餅還是嚴肅命題？ 據Stephen Ward博士說，英國已經定下產值高達100億英鎊（150億美元）的細胞和基因治療產業目標。 Ward博士， Cell Therapy Catapult的首席執行官，在他在近期召開的bioProcessUK會上發表了講話。Cell Th
Science：中國科學技術大學在量子力學再取新突破 實現對量子系統的調控是人類認識并利用微觀世界規律的必然訴求，也是諸多前沿科學領域的核心要素。自旋作為一種重要的量子調控研究體系，在世界各國的量子計劃中均被列為重點研究對象。開展單自旋量子調控研究有助于人們在更深層次上認識量子物理的基礎科學問題，
胰腺癌的預后非常差，其致死率基本等同于發病率。在美國，胰腺癌的5年生存率依然只有6%。關鍵的問題是胰腺癌患者在早期基本無癥狀，被診斷發現時大多數都處在晚期；全球每年胰腺癌致死的病人超過20萬人。 胰腺癌有多種類型，基本上劃分成外分泌腫瘤和內分泌腫瘤兩種。99%的胰腺癌都屬于外分泌型腫瘤，其
CRISPR技術的確在科學界掀起了基因組編輯的狂潮。在Pubmed中快速檢索“CRISPR”，目前已有1400多項結果。也相繼有專家為該技術撰寫了綜述論文，例如：Science綜述：CRISPR-Cas9系統的歷史和未來；北大魏文勝最新發表CRISPR綜述。 最近，來自美國加州大學伯克利分校和
膀胱癌是泌尿生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，在我國其發病率及病死率均列泌尿生殖系統腫瘤的首位。 2015年全國新確診為膀胱癌的患者人數超過8萬，導致的死亡人數超過3萬，約70%以上首診時是淺表性癌。膀胱癌的高復發率和治療后期的并發癥是臨床治療的兩大難題。深入研究膀胱癌的發病機制、發展過程及轉移規律
乳腺癌是指發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。其中女性患者占99%，男性僅占1%，在女性腫瘤死亡率中，位于第二位。大多數乳腺癌為激素依賴性腫瘤，ER陽性乳腺癌約占全部乳腺癌的60~75%，其中約65%為PR陽性。其中有約10.0%～20.8%的患者其ER，PR和Her-2均為陰性，即為三陰性乳腺癌。
十年磨一劍。龐國芳院士與助手一起討論技術問題 龐國芳院士帶領一個團隊，孜孜不倦地潛心研究，突破了農殘檢測在信息化時代的三大挑戰，使我國在這一領域的檢測技術達到世界領先水平；兢兢業業地做了4萬批次的農殘篩查，摸清了我國“菜籃子”中的農藥殘留家底，為相關部門的決策和監管提供了有效的科學依據。這種踏
引言：上海吉凱基因化學技術有限公司成立于2002年，擁有國內最大的慢病毒文庫，同時也是國內最大的疾病關鍵基因科研服務供應商，在疾病研究領域的實驗積累已逾14年！在這里，我們為大家特別整理了10多個研究領域的經驗所得，將最實用的精華分享給大家！上一期幫大家總結了胃癌研究中體內外模型的選擇，以及病毒
膀胱癌是泌尿生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，在我國其發病率及病死率均列泌尿生殖系統腫瘤的首位。 2015年全國新確診為膀胱癌的患者人數超過8萬，導致的死亡人數超過3萬，約70%以上首診時是淺表性癌。膀胱癌的高復發率和治療后期的并發癥是臨床治療的兩大難題。深入研究膀胱癌的發病機制、發展過程及轉移規律
膠質瘤是最常見的原發性中樞神經系統腫瘤，約占中樞神經系統腫瘤的40-60%。 惡性膠質瘤是中樞神經系統的頑疾之一，有著預后差、復發率高等特點，現有的治療方法如手術、放療和化療效果均不滿意。近年來隨著分子生物學技術的發展，腫瘤的基因治療已成為當前神經外科領域的熱點課題。子曰：“工欲善其事，必先利其
膠質瘤是最常見的原發性中樞神經系統腫瘤，約占中樞神經系統腫瘤的40-60%。 惡性膠質瘤是中樞神經系統的頑疾之一，有著預后差、復發率高等特點，現有的治療方法如手術、放療和化療效果均不滿意。近年來隨著分子生物學技術的發展，腫瘤的基因治療已成為當前神經外科領域的熱點課題。子曰：“工欲善其事，必先利其
乳腺癌是指發生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。其中女性患者占99%，男性僅占1%，在女性腫瘤死亡率中，位于第二位。大多數乳腺癌為激素依賴性腫瘤，ER陽性乳腺癌約占全部乳腺癌的60~75%，其中約65%為PR陽性。其中有約10.0%～20.8%的患者其ER，PR和Her-2均為陰性，即為三陰性乳腺癌。三陰
DNA重組技術（或基因工程）是20世紀生物學的偉大成就，并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域，為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用，著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分
來自哈佛-麻省理工Broad研究所、麻省理工學院和國立衛生研究院國家生物技術信息中心的研究人員，在一項合作研究中發現了一種高效的Cas9核酸酶，攻克了體內基因組編輯面臨的一個主要挑戰。發表在《自然》（Nature）雜志上的研究結果，預計將有助于CRISPR工具箱更容易地應用于體內實驗和治療用途。
背景介紹十年前一次性生物反應器首次引入商業生產后，生物制備工藝業已將其歸納為cGMP標準。現有的攪拌式反應器只能支持懸浮細胞培養，而VaccixCell的TideMotion?潮汐式生物反應器CelCradleTM（500ml）和TideCell?(2升-500升)，是目前市面上僅有的少數可用于大規
研究人員開發了一種新化學遺傳學（chemogenetic）技術，可以通過啟動和關閉神經元，揭示控制小鼠行為的大腦回路。這是美國NIH BRAIN計劃產出的首個技術成果，可以幫助人們調節神經元進而治療疾病。 北卡羅來納大學和NIH的研究團隊在四月三十日的Neuron雜志上發表文章介紹了這一成果。
研究人員開發了一種新化學遺傳學（chemogenetic）技術，可以通過啟動和關閉神經元，揭示控制小鼠行為的大腦回路。這是美國NIH BRAIN計劃產出的首個技術成果，可以幫助人們調節神經元進而治療疾病。 北卡羅來納大學和NIH的研究團隊在四月三十日的Neuron雜志上發表文章介紹了這一成果。