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  • 病毒RNA提取實驗方法

    1,用異硫氰酸胍提取提病毒的詳細步驟,可參考(我提過N次做定量PCR都沒問題):1.取 200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,另取同樣多eppendorf管,加入400ul -20度預冷的異丙醇5.取第3步離心的上清(一定不要吸取到中間白色層,第3步離心結束往外拿的時候,管子盡量不要傾斜)轉移到第4步準備的管中,顛倒混勻6.13000rpm離心15min,輕輕倒去上清;在吸水紙上盡量沾干液體7.加600ul 75%乙醇,顛倒數次以洗滌殘存異丙醇7.13000rpm離心15min,輕輕倒去上清;在吸水紙上盡量沾干液體8.4000rpm離心10sec,將管壁殘存液體甩到底部,用微量槍頭吸干,室溫干燥2-3min(不可過分干燥,防止下一步RNA不溶解)9.加入20ul......閱讀全文

    植物病毒(plant-viruses)RNA提取

    ?? 大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。   一、材料   提純TMV病毒液(10mg/ml)。   二、設備   冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。   三、試劑   TE

    TRIzol-RNA提取方法

    (一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-

    提取植物rna方法

      提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。  眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因

    TRIzol-RNA提取方法

    研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采

    TRIzol-RNA提取方法

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構

    全血RNA提取實驗

    實驗材料 鮮血液試劑、試劑盒 抗凝劑紅細胞裂解液RLB去蛋白液RW1乙醇漂洗液RW儀器、耗材 制冰機離心機離心管移液槍移液管針頭注射器水浴鍋實驗步驟 一、在適合大小的RNase free離心管中加入1體積(

    全血RNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂

    總RNA提取實驗步驟

    一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?(1)發酵3~4天(或對數生長期)的菌體,離心收集菌絲體(動植物材料無需此步處理)。?(2)用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次,并盡量除去殘存的水。?(3)加液氮充分研磨,使其成為粉末,以釋放RNA。?(4)研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。

    全血RNA提取實驗

    全血RNA的提取可用于:(1)研究RNA干擾機制等;(2)用作反轉錄模板;(3)分子生物學其他研究。實驗方法原理紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快

    動物RNA提取實驗原理

    RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分,也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制,已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究,首先要獲得該性狀基因,從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關

    禽流感病毒RNA提取protocol

    1,用異硫氰酸胍提取1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,另取同樣多eppendorf管,加入400ul -20度預冷的異丙

    禽流感病毒RNA的三種提取方法

    實驗概要本實驗介紹了禽流感病毒RNA的三種提取方法:異硫氰酸胍提取,TRIzol LS提取及Trizol法。實驗步驟1. 用異硫氰酸胍提取?? 1) 取200ul樣品數 陰性對照 陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管。?? 2) 加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿

    動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法

    實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液,其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性,隨后加入氯仿,酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中,RNA則分布在上層的水相中,最后用異丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

    動物RNA提取實驗——SV總RNA試劑盒提取法

    動物RNA提取可用于:(1)研究生物體基因調控機制;(2)分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因;(3)可以對特定的基因表達進行定量的檢測,從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養

    組織RNA提取方法介紹

    1. 最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0~4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后加入一定量的TRIZOL試劑,

    細胞RNA的提取方法

    (一)細胞總RNA的提取1、6孔板細胞匯合度為90-100%時,取出無菌室,去其上清,用PBS洗兩次后,每孔加TRIZOL試劑 1 ml,搖勻,無菌罩內消化3-5 min。2、將各孔內消化好的細胞裂解液吸到一DEPC處理過的1.5 ml EP管中,加新開的氯仿0.2 ml,輕搖15 s。3、室溫靜置

    細胞質RNA提取實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒

    細胞質RNA提取實驗

    實驗材料 RNA試劑、試劑盒 PBS細胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿異戊醇無水乙醇儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?對于單層培奍細胞(1)每10 cm 培養皿培養的細胞,用冰冷PBS洗滌3次。(2)每次1 ml 然后用小體積PBS刮下細胞,轉移至冰浴的離心管中。(3)300 g 離心5 min

    植物總RNA的提取實驗

    研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰

    總RNA提取實驗——CsCl法

    實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞,每平皿用5 ml,洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液,并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿,回收粘稠的

    植物總RNA的提取實驗

    實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN

    細胞質RNA提取實驗

    由于RNA的種類來源很多,因而提取制備方法各異,一般有苯酚法,去污劑法和鹽酸胍法,其中苯酚法實驗室最常用。組織勻漿后用苯酚處理離心,RNA即溶于上層被酚飽和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮狀沉淀析出。此法較好除去DNA和蛋白質,且獲得生物活性的RNA。實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS細

    RNA-的提取和純化實驗

    雖然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位點,但并不推薦使用 poly(A)+RNA,因為在反轉錄反應中可能污染寡核苷酸,并因此增加假陽性的概率。所以建議使用總 RNA 做 FDD 分析。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒氯仿焦

    RNA-的提取和純化實驗

    試劑、試劑盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭移液器離心管錐形管平板勻漿器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿焦碳酸二乙酯(DEPC) 處理過的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液(用 DEPC 處理過的 H20 配制)

    RNA-的提取和純化實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 異丙醇 苯酚-胍鹽單相溶液 磷酸鹽緩沖液

    總RNA提取實驗——氯化鋰提取法

    實驗方法原理用高濃度尿素變性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化鋰選擇沉淀RNA ,其特別適合于從大量樣品中提取少量組織RNA ,具有快速簡潔的長處,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片斷丟失的缺陷。實驗材料微生物動物細胞植物組織試劑、試劑盒氯化鋰尿素Tris-HCLEDTASDS儀器、

    RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)

    一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后

    痘苗病毒DNA提取實驗

    如果提取的痘苗病毒DNA用于轉染,則應在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分離。具體方法見本實驗。實驗材料純化的痘苗病毒試劑、試劑盒Tris?Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris ? Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸鈉乙醇儀器、耗材分光光度計Sorval

    痘苗病毒DNA提取實驗

    實驗方法原理 實驗材料 純化的痘苗病毒試劑、試劑盒 Tris?Cl 溶液SDS蔗糖溶液 蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris ? Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸鈉乙醇儀器、耗材 分光光度計Sorvall 離心機實驗步驟 1. 在 260 nm 處確定純化的疸苗病毒的光密

    痘苗病毒DNA提取實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 純化的痘苗病毒

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