PCR-ELISA 一、原理 PCRELISA是用免疫學方法檢測PCR產物,這比常規用電泳方法及Southerlot要簡便、省時,可同時處理大量標本,便于自動化。PCR-ELISA的原理是在做PCR擴增時應用生物素(biotin)標記的引物,這樣PCR的產物就可結合到親和素(avidin)包被的塑料板上,再用地高辛標記的探針與PCR產物雜交,然后就可以用抗地高辛的酶聯反應檢測。 二、材料、方法和結果 1.PCR擴增按基本PCR技術做DNA擴增,只是所用的引物至少有一個是5′端用生物素標記的。通常可在DNA合成儀上直接合成5′端帶生物素標記的引物。 2地高辛標記的探針雜交將地高辛標記的DNA探針01μg稀釋于90μl 50mmol/L TrisHCl,pH值83,80mmol/L KCl中。取10μl PCR產物加到管中,加熱至90℃,緩慢冷卻至67℃。離心1s,置52℃水浴保溫1h。 ......閱讀全文
因此組織不可用甲醛固定,可用甲醛、乙醇等。PPA對組織內抗原(先與IgG結合)的定位,反應時間可以延長,大鼠ELISA試劑盒便于滲透入組織細胞內,且沒發現嚴重的物理吸附現象。在PPA實驗中稀釋液常用含0.5%(v/v)Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液(2.42
實驗概要本實驗介紹了PCR-ELISA的操作流程。PCR-ELISA是用免疫學方法檢測PCR產物,這比常規用電泳方法及Southern blot要簡便、省時,可同時處理大量標本,便于自動化。實驗原理PCR-ELISA的原理是在做PCR擴增時應用生物素(biotin)標記的引物,這樣PCR的產物就可結
摘 要:當代社會人類對食品安全的關注度越來越高,相應的食品檢測技術也得到不斷改善。其中生物技術揮了重要的作用,PCR技術、酶聯免疫吸附技術(ELISA)、PCR-免疫技術(PCR-ELISA)、免疫親合色譜(IAC)、生物芯片(Biochips) 等技術以各自的優點,被廣泛地運用于食品檢測領域。
PCR或RT-PCR試劑盒的組成核酸提取試劑核酸擴增或逆轉錄-核酸擴增試劑產物檢測試劑(有些使用全自動分析儀的PCR方法因其核酸擴增和檢測同時完成,故無專門的產物檢測試劑)影響PCR試劑盒質量的因素內在因素: 原材料、核酸提取方法、方法學設計影響PCR試劑盒質量的因素: 擴增所需的原材料寡核苷酸引物
摘要:當代社會人類對食品安全的關注度越來越高,相應的食品檢測技術也得到改善。其中生物技術也揮了重要的作用,PCR技術、酶聯免疫吸附技術(ELISA)、PCR-免疫技術(PCR-ELISA)、免疫親合色譜(IAC)、生物芯片(Biochips)等技術以各自的優點,被廣泛地運用于食品檢測領域。&nb
摘要:檢測監測技術是減少食源性疾病的有力保證,食品安全技術的運用首先體現在檢測技術上,檢測正是保障食品安全最為有效的手段。 1.食品安全離不開檢測技術 檢測監測技術是減少食源性疾病的有力保證,食品安全技術的運用首先體現在檢測技術上,檢測正是保障食品安全最為有效的手段。
據百度《3·15質量大數據報告》顯示,今年網民最關注的消費問題中,食品安全居首。而這其中,“轉基因食品安全嗎?”“轉基因食品可檢測出來嗎?”等一系列有關轉基因的話題關注度高達60.24%。 而去年4月,湖北省武漢市一家大型超市檢測出含有轉基因成分的“Bt汕優63”大米曾引起軒然大波。雖然這種水
(三)擴增區下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區
自ELISA問世20多年來,洗板由原來的手工操作,發展到簡單的多頭加液器,再形成自動化的洗板機,隨著時間的推移,逐步融合了沖洗壓力、沖洗距離、沖洗時間、震蕩、渦流、底部沖洗、兩點吸液、連續式沖洗等多種方式,增加了多規格微孔形狀的選擇等。一、洗板機機理的研究1、 快速的、與殘留液量相關的直接
【摘 要】隨著科學技術的迅猛發展,轉基因食品大量出現,并且大量涌入市場。轉基因食品到底對人們的健康有沒有影響,至今還沒有一個定論,因此,對轉基因食品的檢測受到了世界各國衛生組織機構的廣泛關注。 隨著現代科技的快速發展,以基因工程為代表的現代生物技術也取得了令人注目的成績,特別是與
一、選購洗板機的注意事項 1、關鍵指標:殘留量:<2uL 能否提供可選擇的洗板環境:洗板次數、條數、浸泡時間等是洗板機的基本參數,一般均可滿足。建議選擇具有底部沖洗、兩點吸液等功能的儀器;底部沖洗有利于減小微孔板底部的干擾性吸附;兩點吸液可大大降低微孔液體殘留量
(四)擴增產物分析區下述操作在本區內進行:擴增片段的測定。核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法,即PC
無論是用什么儀器設備,它都是有使用注意事項的,可能一個你不注意的小細節就能引發大問題,自動洗板設備BIOBASE-9621自動洗板機也不例外。正確使用儀器設備,不僅可以延長儀器使用壽命,還可以讓后續的檢測數據更加準確。今天帶大家熟悉一下BIOBASE9621自動洗板機使用注意事項:1、在使用前先檢查
自ELISA問世20多年來,洗板由原來的手工操作,發展到簡單的多頭加液器,再形成自動化的洗板機,隨著時間的推移,逐步融合了沖洗壓力、沖洗距離、沖洗時間、震蕩、渦流、底部沖洗、兩點吸液、連續式沖洗等多種方式,增加了多規格微孔形狀的選擇等。一、洗板機機理的研究1、 快速的、與殘留液量相關的直接稀釋過程;
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
孔板夾心雜交法: 該法是通過一固定于微孔板的捕獲探針與PCR產物的某一區域特 異雜交使產物的間接地固定于微孔板上,然后,再用一生物素 等非放射性標記物標記的檢測探針與產物的另一特異性較一次 雜交,漂洗后顯色即可判斷結果。該法需要兩個雜交過程來檢測 一個產物,因此,其特異性較一次雜交的檢測法高。該法
· Standard PCR Protocol (Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in
專題二:食品中污染物質和殘留的檢測技術 食品中污染物質和殘留的檢測技術專題報告現場 報告題目:安捷倫食品安全篩查全新解決方案 報告人:安捷倫科技(中國)食品項目經理張偉國博士 安捷倫科技(中國)食品項目經理 張偉國 博士 食品安全檢測時全球關注的話題。安
2012年3月27~28日,由北京食品學會、北京食品協會聯合主辦的 “第五屆中國北京國際食品安全高峰論壇(CBIFS)”在北京國家會議中心隆重召開。本屆大會主要內容由主論壇、專題研討會和產品展示會三部分組成。邀請來自中國食品安全行業的政府官員、企業領導及科學技術領域的60余位知名專
實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR
實時熒光PCR檢測技術眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能
1、非競爭內標定量PCR從細胞類標本中提取靶基因(核酸)時,同時會提取大量與靶基因無關的DNA或RNA;可以把這些靶基因無關DNA或 RNA作為內標與靶基因同步擴增,即在同樣的反應條件下,在一個反應試管內同步擴增來自同一標本的一段靶基因序列和另一段無關的內標序列,不享受同一引物和引物結合位點,內
實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR
眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能直接揭示病原體的存在,
【實驗原理】聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction)即PCR技術是美國Cetus公司人類遺傳研究所的科學家K.B.Mullis于1983年發明的一種體外擴增特定基因或DNA序列的方法。PCR具有很高的特異性、靈敏度,在分子生物學、基因工程研究、某些疾病的診斷以及臨床標
【實驗對象】特定的DNA序列。【試劑與器材】 引物(primer),根據需擴增的DNA設計相應的引物;TagDNA聚合酶; 10×PCR緩沖液(隨酶一起購買);5mmol/L dNTP貯備液(商品化產品);DNA模板(需擴增的 DNA);雙蒸水;礦物油;PCR反應管;微量移液器;離心機及PCR儀
實時熒光定量PCR在人感染豬流感診斷中的作用彭年才12 張鎮西1 蘭鄒然3 黃兵3 李紅東2 李明2 苗保剛2 1西安交通大學生物醫學分析技術與儀器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山東省動物疾病預防與控制中心200
1.免疫學檢查有些寄生蟲病難以根據癥狀或體征及病原檢查作出診斷,此時需采取免疫學方法輔助診斷。在感染早期、輕度感染、單性感染(僅有雄蟲)、隱性感染或由于特殊的寄生部位而使病原檢查十分困難以及在流行病學研究中,免疫診斷具有突出的優點。所用的抗原包括同種抗原、生活史某期特異性抗原或基因工程抗原。根據反應
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性(RFLP)、轉基因技術及基因芯片(DNA-chip)技術等分子生物學技術。目前這些技術已應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。(1)核酸分子雜交技術原理和方法1)South
重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(由英國公司TwistDx Inc開發)。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低