1975年,Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合,形成的雜交細胞既可產生抗體,又可無限增殖,從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元,也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單克隆抗體包括動物免疫、細胞融合、選擇雜交瘤、檢測抗體、雜交瘤細胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產,要經過幾個月的一系列實驗步驟,下面按照制備單克隆抗體的流程順序,逐一介紹其實驗方法。 一、細胞融合前準備 (一) 免疫方案 選擇合適的免疫方案對于細胞融合雜交的成功,獲得高質量的McAb至關重要。一般要在融合前兩個月左右確立免疫方案開始初次免疫,免疫方案應根據抗原的特性不同而定。 1. 顆粒性抗原免疫性較強,不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。下面以細胞性抗原為例的免疫方案: 初次免疫 1×107/0.5ml ip (......閱讀全文
早在一百多年前,Paul Ehrlich就創造出“magische Kugel(魔球)”,“magic bullet”這樣的短語,科學家們多年以來也一直努力不懈的進行研究,希望能研發出對抗從癌癥到克羅恩病的疾病靶向治療方法。終于在四十年前,一項技術的誕生,令這一期望不再遙不可及,這就是雜交瘤
摘要本研究的重點是在進行親和色譜前使用Vivaflow? 200切向流膜包對多達3 L的鼠雜交瘤澄清上清液進行10倍濃縮。研究發現,同時使用兩塊Vivaflow? 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 時,抗體回收率始終超過98%,濃縮速度約為20 – 25 mL/分。簡介采用雜交瘤技
摘要本研究的重點是在進行親和色譜前使用Vivaflow? 200切向流膜包對多達3 L的鼠雜交瘤澄清上清液進行10倍濃縮。研究發現,同時使用兩塊Vivaflow? 200 (截留分子量 (MWCO) 30 kDa) 時,抗體回收率始終超過98%,濃縮速度約為2