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    Immunoblotting(WesternBlotting)

    實驗概要We provide a protocol for SDS-PAGE, Protein Blotting, Immuno-Detection.主要試劑1. 0.3 M TRIZMA? base (Product No. T1503), 20% methanol.2. 0.025 M TRIZMA? base (Product No. M1770), 20% methanol.3. 0.02 M TRIZMA? base, 20% methanol, 5.25 mg/ml epsilon-amino caproic acid (Product No. A2504).4. Tris buffered saline (TBS) (Product No. T6664).5. Tris buffered saline with 0.05% Tween 20 (TBS/Tween) ......閱讀全文

    Immunoprecipitation Protocol

    實驗概要Immunoprecipitation  is a procedure by which proteins or peptides that react specifically  with an antibody are removed from solution an

    Typical Western Tra...

    實驗概要Peprotech provides a typical western transfer and development protocol.實驗原理Western Transfer, also known as Western Blotting, is a rapid immunobl

    A typical Western-t...

    實驗概要Peprotech provides a typical Western-transfer protocol (e.g. for the detection of protein X).實驗原理Western Transfer, also known as Western Blottin

    病毒感染細胞實驗

    病毒感染細胞實驗             實驗方法原理 病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質(RNA),但不能

    病毒感染細胞實驗

    病毒感染細胞實驗可以用于:(1)將目的基因整合到大多數真核細胞。(2)將目的基因包裝成病毒來感染細胞,從而得到表達滿足實驗需求。實驗方法原理病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質(RNA),但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒,其同時連有目的基因和報告基因,psPAX2為能表達慢病

    病毒感染細胞實驗(二)

    三、質粒DNA在大腸桿菌里轉化連接上目的基因的質粒轉化大腸桿菌是為了讓目的基因在大腸桿菌里擴增,然后提取質粒,以下是質粒DNA在大腸桿菌里轉化的三步驟。3.1大腸桿菌感受態細胞的制備1)從大腸桿菌平板上挑取一個單菌落于3mlLB培養基的試管中,37℃振蕩培養過夜。2)取0.4ml菌液轉接到40mlL

    CO2恒溫搖床解決人胚腎 293 (HEK293) 細胞結團問題(二)

    Lysate preparation and western blottingProtein lysates were created by harvesting the cells from con?uent T-?asks or from suspension cultures at h

    使用CO2恒溫搖床解決人胚腎 293 (HEK293) 細胞結團問題

    人胚腎 293 (HEK293)  細胞在重組蛋白表達中是最常見的宿主細胞。 這類細胞能夠表達大量的膜蛋白,如 G 蛋白偶聯受體  (GPCR) ,是無法在最常見的生物制藥生產宿主,如:中國倉鼠卵巢 (CHO) 細胞中作表達。 HEK293 雖然是蛋白表達的極好宿主,然而 H

    淋巴細胞信號轉導研究中常用方法

      信號轉導是目前分子免疫學中研究的熱點。免疫學中所涉及的信號轉導主要包括淋巴細胞的信號轉導以及細胞因子/細胞因子受體的信號轉導,其研究手段多種多樣,包括細胞生物學、分子生物學以及蛋白質化學等技術。本節將扼要介紹目前信號轉導研究中常用的方法和技術。  一、磷酸化的信號轉導分子的鑒定  在淋

    GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡-1

    [實驗原理]免疫印跡(Western blotting 或 Immunoblotting)一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學檢測三個部分組成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳,使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上,用得最多的材料

    蛋白質分析技術(Analytical Techniques for Protein)-3

    六、SDS-PAGE1.SDS及SDS-PAGE(1)SDS:十二烷基硫酸鈉(sodium decyl sulfate,SDS),一種陰離子去污劑,它能以一定的比例和蛋白質結合,形成一種SDS—protein的復合物。(2)SDS- PAGE:具有SDS的PAGE,分離SDS—protein復合物,

    Peptide competition...

    實驗概要The peptide competition assay/blocking procedure can be used in western blotting, IHC and ELISA. The peptide competition assay (PCA) is a reco

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