PCR的定義和歷史
聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行比對。這也是“微量證據”的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設想，1985年由其發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年，PCR已發展到第三代技術。1976年，中國科學家錢嘉韻，發現了穩定的Taq DNA聚合酶，為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。......閱讀全文
PCR的定義和歷史
聚合酶鏈式反應（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，
電泳的定義和研究歷史
電泳（electrophoresis, EP）是電泳現象的簡稱，指的是帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。1807年，由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早
轉化酶的定義和歷史
糖苷酶之一。催化蔗糖水解成為果糖和葡萄糖的一種酶，廣泛存在于動植物和微生物中，主要從酵母中得到。自1860 年Bertholet 從啤酒酵母Sacchacomyces Cerevisiae?中發現了蔗糖酶以來, 它已被廣泛地進行了研究。蔗糖酶（β -D-呋喃果糖苷果糖水解酶，fructofurano
多重PCR的定義和特點
1.概述：多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合 ，它是在同一 反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的 反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般 相同。2.特點:①高效性，在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或對有多個型別的目的基因進行分型，特別是
PCR的歷史
“聚合酶鏈式反應” 的設想由Kary Mullis于1983年提出，當時，他在加利福利亞Cetus公司人類遺傳研究室任職；他的想法是，利用一種人工的方法、相同程序循環與特定的酶（DNA聚合酶）來擴增特定的DNA片段。此后，他對該設想進行了大量試驗驗證，并成功完成了PCR實驗[1]。 在最初
反向PCR（Inverse－PCR）技術的定義和特點
1.概述：反向PCR(reverse PCR)是用反向的互補引物來擴增兩引物以外的未知序列的片段，而常規PCR擴增的是已知序列的兩引物之間DNA片段.實驗時選擇已知序列內部沒有切點的限制性內切酶對該段DNA進行酶切，然后用連接酶使帶有粘性末端的靶序列環化連接，再用一對反向的引物進行PCR，其擴增產物
抗體酶的定義和發現歷史
抗體酶，又稱催化抗體，是一類具有催化能力的免疫球蛋白，即通過一系列化學與生物技術方法制備出的具有催化活性的抗體，它既具有相應的免疫活性，又能像酶那樣催化某種化學反應。1946年，鮑林(Pauling)用過渡態理論闡明了酶催化的實質，即酶之所以具有催化活力是因為它能特異性結合并穩定化學反應的過渡態（底
巢氏PCR（Nested－PCR）技術的定義和特點
1.定義：也稱套式PCR是指利用兩套PCR引物（巢式引物）進行兩輪PCR擴增反應。在第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。在這種技術中，首先用一對外引物進行第1輪PCR，然后再使用第1對引物擴增的DNA 序列內部的一對引物再次擴增。2.優點：由于巢式PCR反應
巢式PCR(Nested－PCR)定義、原理和步驟
巢式PCR的定義巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR)，使用兩對（而非一對）PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在第一次PCR擴增片段的內部）結合在第一次PCR產物內部，使得第二次PCR擴增片斷短于第一次擴增。巢 式PCR的好處
標記PCR和彩色PCR技術的定義及特點介紹
標記PCR(Labelled Primers，LP-PCR) 是利同位素或熒光素對PCR引物的5‘端進行標記，用來檢測靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR，CCAPCR)，是LP-PCR的一種，它用不同顏色的熒光染料；標記引物的5'端，因
原位PCR技術的定義和方法介紹
1.概述：原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR是Hasse等于1990年建立的，實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.2.其基本方法為? ?
重組PCR技術的定義和原理介紹
1.定義：使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2. 其基本原理：將突變堿基，插入或缺失片段，或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中，先分段對
數字PCR的研究歷史
1983年由美國Mullis首先提出設想，1985年發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，標志著PCR技術的真正誕生。1999 年，美國學者 Kenneth Kinzler 與 Bert Vogelstein 首次提出了數字 PCR (digital PCR，dPCR)的概念，實現了核酸拷貝數絕對
RTPCR技術的定義和檢測方法
? ?1.定義：是以RNA為模板，聯合逆轉錄反應（reverse transcription，RT）與PCR，可用于檢測單個細胞或少數細胞中少于10個拷貝的RNA 模板。 RNA擴增包括兩個步驟：在單引物的介導下和逆轉錄酶的催化下，合成RNA的互補cDNA；加熱后cDNA與RNA鏈解離，然后與另一引
重組PCR的定義和基本原理
1.定義：使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2.其基本原理：將突變堿基，插入或缺失片段，或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中，先分段對模
原位PCR定義
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾
神經節苷脂的定義和發現歷史
神經節苷脂：糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂，常稱為神經節苷脂（ganglioside）。克倫克（E.Klenk，1935）首先發現在患Tay－sachs病（泰薩氏幼年型黑白癡病）的小兒腦中有蓄積（Tag－Sachs gangli-oside），在腦灰白質中含量很多，所以對這類糖脂命名為神經節苷脂。已知糖
PCR擴增的歷史及發展
?讓我們回顧一下過去，看看35年前，當GEN開始報道這種相對新的基因工程和分子生物學技術的情況。在當時，GEN是最早知道這種在實驗室合成和擴增DNA新方法的公司之一。我們在這里，將通過回顧PCR的引人入勝的歷史，來展望未來其在分子診斷領域的成型和發展方向。熱情似火? ? 生物科學在空間上很少進步的，
關于PCR技術的歷史簡介
Khorana (1971)等最早提出核酸體外擴增的設想：“經DNA變性，與合適的引物雜交，用DNA聚合酶延伸引物，并不斷重復該過程便可合成tRNA基因。” 但由于當時基因序列分析方法尚未成熟，熱穩定DNA聚合酶尚未報道以及引物合成的困難，這種想法似乎沒有實際意義。加上70年代初分子克隆技術的
PCR擴增儀－歷史發展
PCR這項技術是由凱利·穆利斯(Kary Mullis)發明，并因此在七年之后，1993年10月，獲得了諾貝爾化學獎該項殊榮。穆利斯的想法是，利用一種人工方法，和反復相同程序的方法，并利用一種特殊的酶——即DNA聚合酶來擴增特定的DNA片段。DNA聚合酶天然存在于生物體內，在細胞分裂前進行DNA的復
PCR擴增儀發展歷史
1971年，Dr. Kjell Kleppe首次在Journal of molecular biology期刊發表的文章中準確、客觀地闡述了PCR方法。 1985年，美國PE-Cetus公司的Kary Mullis等人發明PCR技術。它推動了現代醫學由細胞水平向分子水平、基因水平發展，是DNA
不對稱PCR技術的定義和方法介紹
不對稱PCR(asymmetric PCR)是用不等量的一對引物，PCR擴增后產生大量的單鏈DNA(SSDNA)。這對引物分別稱為非限制引物與限制性引物，其比例一般為50——100:1。在PCR反應的最初10——15個循環中，其 擴增產物主要是雙鏈DNA，但當限制性引物(低濃度引物)消耗完后，非限制
巢式PCR的定義
巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(PCR)，使用兩對（而非一對）PCR引物擴增完整的片段。第一對PCR引物擴增片段和普通 PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在第一次PCR擴增片段的內部）結合在第一次PCR產物內部，使得第二次PCR擴增片段短于第一次擴增。巢式PCR的好處在于，如果第一
聚合酶鏈式反應（PCR）的概念和歷史
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,
時間分辨熒光免疫分析儀的定義和發展歷史
時間分辨熒光免疫分析儀是一種采用非放射性同位素免疫分析技術的體外微量分析儀器。根據熒光標記物的熒光光譜的特點，通過延緩測量時間，排除標本中非特異性熒光的干擾，達到準確定量分析的目的 1979年，芬蘭Wallac公司研發部的Soini和Hemmila首次提出了建立稀土離子標記物的“時間分辨熒光免
數字PCR的由來及研究歷史
?? 20世紀末，Bert Vogelstein等人在美國科學院院刊PNAS上首次提出了數字PCR(Digital PCR, dPCR)的概念，并表明該技術可用于研究罕見的癌癥突變。? ? Bert Vogelstein? ? 2003年，Kinzler和Vogelstein繼續完善dPCR，并創建
梯度PCR儀定義
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。 PCR反應能否成功，退火溫度是關鍵，梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置，根據結果，一步就可以摸索出最適反應條件。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。因為
逆轉錄－PCR的定義和主要影響因素介紹
逆轉錄 PCR（Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR）是一種以 RNA 為樣本，RNA鏈被逆轉錄成為互補 DNA（cDNA），再以此為模板通過 PCR 進行 DNA 擴增。在實際應用中，RT-PCR 分為一步法 RT-PCR 和兩步法 RT-PCR。整個反轉錄實驗過程有三
兼并引物PCR技術的定義
1.概述：兼并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基可能性的不同序列的混合物。兼并度越低，產物特異性越強。2.設計引物原則：盡量選擇兼并性小的氨基酸，并避免引物3’末端兼并，因為3'端最后3個堿基的退火足以在錯誤位點起始PCR；次黃嘌呤可以同所有的堿基配對，降低引物的退火溫度。
逆轉錄PCR的定義
逆轉錄PCR（reverse transcription PCR）或者稱反轉錄PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶鏈式反應（PCR）的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。