食物過敏原的檢測和定量方法即時（realtime）PCR法
即時PCR方法與其他DNA定量方法相比，即時PCR方法需要昂貴的實驗室設備，但準確度高，勞動強度低。即時PCR方法不用凝膠制品而使用特定目標的低聚核苷酸探子，因而實現即時分析。......閱讀全文
食品中常見過敏原及檢測技術研究進展
食物過敏是指過敏原蛋白引起的異常或過強的免疫反應，從免疫學機制而言，可以將食物過敏反應分為4 種類型，即：免疫球蛋白（Ig）E介導的I型超敏反應、II型細胞毒性超敏反應、III型免疫復合型超敏反應以及T細胞介導的遲發性超敏反應。目前可以從廣義的角度將食物過敏分為IgE介導和非IgE介導兩大類，其
熒光定量PCR技術的熒光定量PCR的方法
接下來我們就來了解一下熒光定量的主要方法，我們如何選擇合適的方法？熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種：熒光探針和熒光染料。而熒光定量 PCR 的方法相應的可分為特異類和非特異類兩類，特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物；而非特異性檢測方法是在在PCR反
RealTime－or－Kinetic－PCR
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied Biosystems Model 7700 sequence detection system (the TaqMan instrument)
過敏原檢測檢測方法
點刺檢查過敏源 點刺試驗可視為一種特殊的皮內試驗，在國際上廣泛使用，特別是歐美國家推崇的過敏原體內檢測方法。因其是皮膚的點刺液僅為皮內試驗的萬分之一，安全性及靈敏度高、準確度高，由于皮損小，患者無痛楚，就如被蚊叮一樣等特點，已逐漸取代了傳統的皮內試驗。 原理： 當有某種變應原進入皮膚時，對
使用定量PCR方法檢測轉基因產品
轉基因產品的檢測可以從核酸和蛋白質水平上進行檢測。定量檢測主要是基于核酸水平的檢測,由于目前轉基因技術中使用的基因構件主要來源于花椰菜花葉病毒(CaMV)的 35S 啟動子和膿桿菌的 Nos 終止子,絕大部分轉基因產品含有這兩個基因片段,所以檢測 35S 啟動子和 Nos 終止子基本可達到檢測轉基因
實時熒光定量PCR檢測方法SYBR－Green－I－法與TaqMan－探針法
來自美國Azure Biosystems公司的Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統，融合了高品質Pilter溫度模塊和基于光纖傳輸的光學檢測系統，為您的科學研究提供高精準、高靈敏的可靠結果。北京深藍云生物科技有限公司已經為您準備好了儀器，期待您的試用哦~既然儀器已經備好了，那么該怎樣選
Realtime－PCR實驗心得和RNA提取心得
并不是所有的實驗都可以做real－time的，技術路線要選好當你的基因表達量少或有些不表達具體就是做普通pcr跑膠條帶比較弱，不是很亮的情況下個人覺得最好不要選擇real，不容易做好，特別是融解曲線用sbgr green染料做的話，引物設計時擴增片斷最好小于250bp，太長了不好擴預實驗先rt－pc
概述過敏原檢測的檢測方法
總IgE檢測 總IgE檢測是判定機體過敏體質的一種檢測手段，是過敏的一個重要標志。當它增高，又沒有寄生蟲感染，表明患者正處于過敏狀態。 食物不耐受 臨床證明許多慢性疾病都與食物有關，在去除有問題的食物之后，癥狀就會消失，這就是食物不耐受。食物不耐受檢查也是唯一針對食物過敏的遲發反應（IgG
熒光定量PCR染料法介紹
? ? ?熒光定量PCR儀負責監控反應體系中熒光強度的變化，記錄檢測熒光達到閾值時的循環數。從理論上說，每一個qPCR循環會使目標序列翻倍，因此人們可以在Ct值的基礎上對樣本進行定量。???????? 熒光定量PCR主要分為染料法和探針法兩種。染料法一般采用DNA染料，這種方法不僅使用簡單，成本也z
realtime－PCR體系的優化
實時定量PCR以其精確、快速、方便，越來越多的應用在科研、臨床及檢驗檢疫的各個領域。但是定量PCR是對精確性要求很高的實驗，實驗的條件對實驗結果的影響非常大。在此談談體系優化的問題，希望對做相關試驗研究的朋友有所幫助。1、基本參數的優化：1）MgCl2的濃度：在PCR反應中，MgCl2的濃度對酶的活
RTPCR、QPCR、Realtime－PCR、realtime－RTPCR你真的區分的開嗎？
多少同學能將 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR區分開？有多少同學還在犯暈？今兒這貼，師兄就帶你區分區分，撥開那扇 PCR 迷霧。什么是?RT-PCR？RT-PCR就是逆轉錄 PCR（reverse transcription PCR）或者稱反轉錄PCR(reverse transcr
RealTime－PCR實驗流程
實驗試劑Total RNA Kit ：Omega：(Cat.No．R6834)First Strand cDNA Synthesis Kit：GeneCopoeia(Cat.No．C0210A)2xAllinOneTMQ-PCRMix：GeneCopoeia（cat.No．D0101A)Primer
Realtime－PCR與RTPCR的區別
實時熒光定量PCR原理所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。1．內標在傳統定量中的作用由于傳統定量方法都是終點檢測，即PCR到達平臺期后進行檢測，而PCR經過對數期擴增到達平臺期時，檢測重
基于EVAGREEN?方法的CRYSTAL數字PCR絕對定量檢測
基于EVAGREEN?方法的CRYSTAL數字PCR絕對定量檢測EvaGreen?是一種無致突變性、無細胞毒性的DNA結合染料，NaicaTM?Crystal全自動微滴芯片數字PCR儀系統可兼容EvaGreen?染料進行的數字PCR實驗分析。反應體系中游離的的EvaGreen?染料不發出熒光信號，但
使用熒光定量PCR方法進行核酸檢測的步驟
進行核酸檢驗，需要經過取樣、留樣、留存、核酸提取、上機檢測五個步驟。? ? 核酸檢測的第一步就是采集人體分泌物，用鼻試子或咽試子擦拭鼻腔或咽后壁及雙側咽扁桃體處。? ? 第二步醫務人員進行留樣，將試子頭浸入細胞保存液中，折斷尾部后立即旋緊管蓋。? ? 第三部要將樣本放入密閉袋中，保存好并及時送檢。?
Realtime同電泳檢測產物的PCR有何優勢？
?Real-time qPCR通過熒光信號在每個反應循環終點檢測，反應指數增長期，可以真實監測模板起始量，線性范圍可達5——7個數量級；而終點法重復性不佳、線性范圍較窄，且產物電泳檢測受限于片段大小和凝膠分辨率、膠染料靈敏度等因素，線性范圍在100-fold左右。
新冠病毒核酸檢測PCR技術知識點梳理（二）
定量PCR，也就是qPCR,由于其英文全稱是real-time quantitative polymerase chain reaction，有些也稱為RT-qPCR，國外通常簡稱為qPCR,是由美國Applied Bisystems公司于1996年研制出的一種新型核酸定量技術，并隨著熒光P
熒光定量pcr儀定量方法之絕對定量
在做qPCR實驗時，我們經常會問：“你是做絕對定量還是相對定量呢？”，而定量方法的選擇是取決于實驗的目標。絕對定量可測定目標核酸分子的實際拷貝數，但也是最費力、最復雜的定量形式。此方法要求周密的實驗方案和高度準確的標準曲線，常用于確定病毒滴度。 使用標準曲線進行絕對定量 絕對定量是通
PCR反應絕對定量和相對定量的差別？
絕對定量目的是測定目的基因在樣本中的分子數目，即通常所說的拷貝數，應用于taqman探針法檢測。相對定量的目的是測定目的基因在兩個或多個樣本中的含量的相對比例，而不需要知道它們在每個樣本中的拷貝數，應用于sybr green染料法檢測。
多重pcr和多重熒光定量pcr的區別
正常啊，定量PCR很靈敏的，體系稍微變化就會誤差很大，更何況你這樣反應體系都不一樣。所以一般定量結果只是作為佐證，最好別太相信。你想做好，就盡量保證每個體系是一致的，最后結果趨勢是一致的就行了。
實時熒光定量PCR在人感染豬流感診斷中的作用
實時熒光定量PCR在人感染豬流感診斷中的作用彭年才12? 張鎮西1? 蘭鄒然3 ?黃兵3? 李紅東2? 李明2? ?苗保剛2 1西安交通大學生物醫學分析技術與儀器研究所 2西安天隆科技有限公司 3山東省動物疾病預防與控制中心2009年4月30日摘要：病原檢測方法及儀器是人感染豬流感防控的關鍵環節，針
從RNA的提取到PCR——Realtime－PCR經驗
一 引物的設計引物的設計對于這個實驗至關重要，因為real time pcr的檢測靈敏度比較高，所以相應的對引物設計的要求就很高。普通的要求規則大家都知道，還有幾點必須注意：1，引物的錯配率（引物錯配形成引物二聚體，但是SYBR照樣能嵌入進去，結果導致實驗結果的誤差很大，重復性也不好）。2，引物的特
實時熒光定量PCR的研究進展及其應用（二）
1.3 定量方法 在real-time Q-PCR中，模板定量有兩種策略；相對定量和絕對定量。相對定量指的是在一定樣本中靶序列相對于另一參照樣本的量的變化。絕對定量指的是用已知的標準曲線來推算未知的樣本的量。 1.3.1 標準曲線的法的相對定量 由于在此方法中量的表達是相對于某個參照物的量而言的
傳統定量PCR方法簡介
1）內參照法：在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。 2）競
傳統定量PCR方法簡介
1）內參照法：在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。2）競爭法：選
生活中需要便攜式食物過敏原檢測儀
生活中，大家可能會遇到這樣的情況，有人吃了魚或者蝦會出現過敏反應，如腹瀉、嘔吐或皮膚發癢等；當然，此前也有新聞報道，有游客踏青游玩時出現花粉過敏，嚴重者甚至會休克等。那么，問題來了，生活中我們是否需要一款檢測食物過敏原的設備？ Nima是一個便攜式食物過敏原檢測儀，三角形的外觀，＂個頭＂與女
Realtime－PCR－基礎知識
理論基礎?聚合酶鏈式反應作為一種革命性的方法在生物學研究的歷史中占據了重要的地位。以此為基礎發展出包括real-time PCR在內的多項應用技術。自誕生后real-time PCR技術持續發展，從簡單的增擴到整個PCR過程，real-time PCR表現出比PCR更敏感、更明確的定量分析特
realtime－PCR－數據分析
無論所使用的real-time PCR是何種型號，正確的數據分析對于獲得有效的實驗結果都是至關重要的。這里介紹有關real-time PCR數據分析的知識。?在討論基本分析過程之前，先介紹如何設計一個好的實驗。如果你是自己設計的引物和探針，那有助于下一步的工作。但是在有些情況下，人們使用出版文獻上的
ELISA法是定性還是定量檢測方法
對你想要的已知蛋白進行定量測定。簡單的說，就是把蛋白量轉換成你能看到的顏色信號，顏色的深淺就代表蛋白的多少，通過酶標儀進行顏色深淺的量化，最后得到數值，根據標準曲線來測定蛋白濃度。
蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA（Bicinchoninc acid procedure，4,4’-二羧-2,2’-二喹啉）法與Lowry法相似，主要差別在堿性溶液中，蛋白質使Cu2+轉變Cu+后，進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色，在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中B