(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。 玻璃器皿在使用前應高壓處理,因為玻璃器皿常含有不易失活的RNA酶。最好是熱滅菌,250℃烘烤4小時以上可使RNA酶永久性失活。 全血和骨髓標本必須進行抗凝處理。EDTA和枸櫞酸鹽是首選的抗凝劑。不能使用肝素抗凝,因為肝素是Taq酶的強抑制劑,而且在其后的核酸提取步驟中很難去除。 臨床用于RNA(如HCV RNA)擴增檢測的血標本建議進行抗凝處理,并盡快(3小時以內)分離血漿,以避免RNA的降解。如未作抗凝處理,則抽血后,必須在1小時內分離血清。 (二)標本的穩定化處理 用于DNA擴增檢測的標本,采集后一般不需要特殊的穩定化處......閱讀全文
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
第一章 總 則 第一條 為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理,保證臨床基因擴增檢驗質量,使臨床診斷和治療更為科學、合理,特制定本辦法。 第二條 臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的,以擴增檢測DNA或RNA為方法的檢測技術,如聚合酶鏈反應(PCR)、連接酶鏈反應(LCR)、轉錄依賴的放大系統(T
第一章 總 則第一條 為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理,保證臨床基因擴增檢驗質量,使臨床診斷和治療更為科學、合理,特制定本辦法。第二條 臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的,以擴增檢測 DNA 或 RNA 為方法的檢測技術,如聚合酶鏈反應( PCR )、連接酶鏈反應( LCR )、轉錄
下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。不能
為使基因擴增檢驗技術有效地應用于臨床,更好地為疾病的預防、診斷和治療服務,保證檢驗質量,特制定本規范。一、臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為
(四)擴增產物分析區 下述操作在本區內進行:擴增片段的測定。 核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法,
根據《臨床檢驗擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》,制定本標準 一、 臨床基因擴增檢驗實驗室區域設置原則 (一) 臨床基因擴增檢驗實驗室區域設置原則 1、 試劑儲存和準備區 2、 標本制備區 3、 擴增反應混合物配制和擴增區 4、 擴增產物分
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
(七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
(七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅