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細胞經誘導或抑制后，需對自噬過程進行觀察和檢測，常用的策略和技術有： 1、觀察自噬體的形成 由于自噬體屬于亞細胞結構，普通光鏡下看不到，因此，直接觀察自噬體需在透射電鏡下。Phagophore的特征為：新月狀或杯狀，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體（AV1）的特征為：雙層或多層膜的液泡狀結構，內含胞漿成分，如線粒體、內質網、核糖體等。自噬溶酶體（AV2）的特征為：單層膜，胞漿成分已降解。（autophagic vacuole，AV） 2、在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成 由于電鏡耗時長，不利于監測（Monitoring）自噬形成，人們利用LC3在自噬形成過程中發生聚集的現象開發出了此技術。無自噬時，GFP-LC3融合蛋白彌散在胞漿中；自噬形成時，GFP-LC3融合蛋白轉位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點，一個斑點相當于一個自噬體，可以通過計數來評價自噬活性的高低。 ......閱讀全文
細胞經誘導或抑制后，需對自噬過程進行觀察和檢測，常用的策略和技術有： 1、觀察自噬體的形成 由于自噬體屬于亞細胞結構，普通光鏡下看不到，因此，直接觀察自噬體需在透射電鏡下。Phagophore的特征為：新月狀或杯狀，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體（AV1）的特征為：雙層或多層膜的
細胞自噬主要有三種形式：微自噬（microautophagy)、巨自噬（macroautophagy）和 分子伴侶介導的自噬 (Chaperone-mediated autophagy，CMA）。 微自噬 定義 ：指 溶酶體或者液泡內膜直接內陷底物包裹并降解的過程。 作用時間：多在種子成熟
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，
細胞自噬過程的觀察和檢測可應用于：（1）研究細胞防御和應激調控機制；（2）自噬體膜的來源問題研究。（3）細胞器自噬研究。實驗方法原理正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，以及反義RNA干擾技術（Knockdown）、突變株篩選
細胞自噬（autophagy）一詞來自希臘單詞auto-，意思是“自己的”，以及phagein，意思是“吃”。所以，細胞自噬的意思就是“吃掉自己”。 細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后，
遭到擾亂的自噬過程與帕金森氏病、2型糖尿病和老年人體內其他疾病都有所關聯。自噬基因的突變可以導致遺傳病，自噬機制受到的擾亂還與癌癥有關。目前人們正在進行緊張的研究以開發藥物，能夠在各種疾病中影響自噬機制。 人們知道自噬機制的存在已經50年，但是它在生理學和醫學中的核心重要性只有在大隅良典20世
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：一、自噬誘導劑(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
在研究自噬相關蛋白時，需對其進行定位。由于自噬體與溶酶體、線粒體、內質網、高爾基體關系密切，為了區別，常用到一些示蹤蛋白在熒光顯微鏡下來共定位： Lamp-2：溶酶體膜蛋白，可用于監測自噬體與溶酶體融合。 LysoTrackerTM 探針：有紅或藍色可選，顯示所有酸性液泡。 pDsRed2
自噬是近年來很熱門的領域，做一下系統的介紹或討論，內容：1） 什么是自噬？包括自噬的定義、形態學特征、分子基礎、調控等2）自噬的意義自噬與細胞存活、細胞死亡、疾病、衰老等的關系3）怎么研究自噬？主要談談怎么證明細胞發生了自噬，即自噬的判斷標準和各種研究自噬的方法及局限性。一、自噬的過程——從一張圖片