關于膜片鉗技術的應用介紹
(1)與藥物作用有關的心肌離子通道 心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩態的維持而保持正常的功能。近年來，國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展，使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。 (2)對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究 通過對各種生理或病理情況下細胞膜某種離子通道特性的研究，了解該離子的生理意義及其在疾病過程中的作用機制。如對鈣離子在腦缺血神經細胞損害中作用機制的研究表明，缺血性腦損害過程中，Ca2+ 介導現象起非常重要的作用，缺血缺氧使Ca2+通道開放，過多的Ca2+進入細胞內就出現Ca2+超載，導致神經元及細胞膜損害，膜轉運功能障礙，嚴重的可使神經元壞死 (3)對單細胞形態與功能關系的研究 將膜片鉗技術與單細胞逆轉錄多聚酶鏈是反應技術結合，在全細胞膜片鉗記錄下，將單細胞內容物或整個細胞（包括細胞膜）吸入電極中，將細胞內存在的各種mRNA全部快速逆轉錄成cD......閱讀全文
關于膜片鉗技術的應用介紹
(1)與藥物作用有關的心肌離子通道 心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩態的維持而保持正常的功能。近年來，國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展，使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。 (2)對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究 通過對各種生理
膜片鉗技術的應用學科相關介紹
膜片鉗技術發展至今，已經成為現代細胞電生理的常規方法，它不僅可以作為基礎生物醫學研究的工具，而且直接或間接為臨床醫學研究服務， 目前膜片鉗技術廣泛應用于神經（腦）科學、心血管科學、藥理學、細胞生物學、病理生理學、中醫藥學、植物細胞生理學、運動生理等多學科領域研究。 隨著全自動膜片鉗技術（Au
膜片鉗技術的應用進展（二）
2.3??實驗的一般操作步驟???? ①拉制微電極和充灌微電極；②將預先處理的實驗標本置于顯微鏡載物臺上的灌流槽內；③于顯微鏡低倍鏡下，用微操縱器將電極移動到浴液上方，換用高倍鏡按一 定標準選擇合適的細胞，然后接近靶細胞或組織，完成電極與標本的封接；④給予鉗位電壓或電流等指令條件并分別記
膜片鉗技術的應用進展（三）
4??膜片鉗技術的主要用途???? 膜片鉗技術廣泛用于研究細胞離子通道，已經成為研究細胞水平生理功能的常用技術。歸納其主要用途包括［4］ ：1）可分辨單通道電流，直接觀察通道開啟和關 閉的全過程。通過測得的單通道特征參數可鑒別通道類型，同時可驗證和研究通道的開關動力學模型。2）單通道記錄可以解釋
膜片鉗技術的應用進展（一）
【摘要】? 膜片鉗技術是研究離子通道的“金標準”，應用該技術可以證實細胞膜上離子通道的存在，并能對其電生理特性、分子結構、藥物作用機制等進行深入的研究。?【關鍵詞】? 膜片鉗技術 離子通道 進展??? 1976年由德國馬普生物物理化學研究所的Neher和Sakamann首次報道了應用膜片鉗技術在蛙胸
膜片鉗技術的基本介紹
1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創建了膜片鉗技術（patch clamp recording technique）。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。它和基因克隆技術（gene cloning）并架齊驅，給生命科學研究
關于膜片鉗技術的發展歷史
該技術是由電壓鉗（voltageclamp）發展而來的，電壓鉗技術由Cole和Marment設計，后經Hodgkin和Huxley改進并成功地應用于神經纖維動作電位的研究 [2] 。其設計原理是根據離子作跨膜移動時形成了跨膜離子電流（I），而通透性即離子通過膜的難易程度，其膜電阻（R）的倒數，也
電生理專題——膜片鉗技術的應用
膜片鉗技術發展至今，已經成為現代細胞電生理的常規方法，它不僅可以作為基礎生物醫學研究的工具，而且直接或間接為臨床醫學研究服務。 目前膜片鉗技術廣泛應用于神經（腦）科學、心血管科學、藥理學、細胞生物學、病理生理學、中醫藥學、植物細胞生理學、運動生理等多學科領域研究。 隨著全自動膜片鉗技術（Au
膜片鉗記錄技術的方法介紹
中文名稱膜片鉗記錄技術英文名稱patch-clamp recording定 義研究離子通過膜離子通道運動的一種技術。即用一微電極封住（鉗住）細胞膜片表面，然后測量通過這一部分膜上的電流。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
膜片鉗的應用舉例
(1).膜片鉗技術在通道研究中的重要作用 應用膜片鉗技術可以直接觀察和分辨單離子通道電流及其開閉時程、區分離子通道的離子選擇性、同時可發現新的離子通道及亞型，并能在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎上進一步計算出細胞膜上的通道數和開放概率，還可以用以研究某些胞內或胞外物質對離子通道開閉及通道電流
膜片鉗的在離子通道技術中的應用
應用膜片鉗技術可以直接觀察和分辨單離子通道電流及其開閉時程、區分離子通道的離子選擇性、同時可發現新的離子通道及亞型，并能在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎上進一步計算出細胞膜上的通道數和開放概率，還可以用以研究某些胞內或胞外物質對離子通道開閉及通道電流的影響等。同時用于研究細胞信號的跨膜轉導和細胞分
關于膜片鉗的基本內容介紹
膜片鉗又稱單通道電流記錄技術，用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又稱巨阻封接，被孤立的小膜片面積為μm量級，內中僅有少數離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位，可測量單個離子通道開放產生的pA（10的負12次方安培）量級的電流，這種通道開放是一種隨機
膜片鉗技術簡介
膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的最重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規膜片鉗技術（Conventional patch clamp technique）發展到全自動膜片鉗技術（Automated patch clamp technique）。 傳統膜片鉗技術每次只能記錄
膜片鉗記錄技術
中文名稱膜片鉗記錄技術英文名稱patch-clamp recording定 義研究離子通過膜離子通道運動的一種技術。即用一微電極封住（鉗住）細胞膜片表面，然后測量通過這一部分膜上的電流。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
膜片鉗技術原理
可興奮膜的電學模型????? 細胞膜由脂類雙分子層和和蛋白質構成。脂質層的電導很低，由于雙分子層的結構特點，形成了細胞的膜電容，通道蛋白的開閉狀況主要決定了膜電導的數值。在細胞膜的電學模型中，膜電容和膜電導構成了一個并聯回路。在細胞膜的電興奮過程中，脂質層膜電容的反應是被動的，其電流電壓曲線是線
膜片鉗技術的技術原理簡介
膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來，由于電極尖端與細胞膜的高阻封接，在電極尖端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離，因此，此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管，用一個極為敏感的電流監視器（膜片鉗放大器）測量此電流強度，就代
膜片鉗技術在神經藥理方面的應用（2）
二 操作步驟 １． 膜片鉗微電極制作 (1) 玻璃毛細管的選擇：有二種玻璃類型，一是軟質的蘇打玻璃，另一是硬質的硼硅酸鹽玻璃。軟質玻璃在拉制和拋光成彈頭形尖端時錐度陡直，可降低電極的串聯電阻，對膜片鉗的全細胞記錄模式很有利；硬質玻璃的噪聲低，在單通道記錄時多選用。玻璃毛細管的直徑應符合電極支
膜片鉗技術在神經藥理方面的應用（1）
1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片鉗技術（Patch clamp technique），這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜上單一的或多數的離子通道分子活動的技術。1981 年Hamill, Neher 等人又對膜片鉗實驗方法和電子線路進行了改進，形成了當今廣泛應用
膜片鉗技術在神經藥理方面的應用（3）
２． 溶液的組成 (1) 電極液：根據記錄的電流不同電極液的成分也不同。基本要求是等張的KCI 溶液，Ca2+ 濃度為10~100nmol (pCa 7~8)，pH 值7~7.4。這里介紹一個在全細胞記錄模式時，通過改變保持電位，能分別記錄到Na+、K+、Ca2+ 電流的電極液成分(mmol/
膜片鉗的相關應用舉例
1、與藥物作用有關的心肌離子通道 心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩態的維持而保持正常的功能。國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展，使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。 2、對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究 通過對各種生理或病理情況下
全自動膜片鉗技術及其在藥物篩選中的應用
一：全自動膜片鉗技術介紹：膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的最重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規膜片鉗技術（Conventional patch clamp technique）發展到全自動膜片鉗技術（Automated patch clamp technique）。傳統
膜片鉗技術的操作步驟
（1）膜片微電極的制作 拉制 膜片微電極是將玻璃毛細管用拉管儀拉制而成。 涂硅酮樹酯 將硅酮樹酯涂于微電極的最尖端以外的部分，然后將其通過加熱鎳鉻電阻線圈而烘干變固。 熱刨光 在顯微鏡下，將微電極尖端接近熱源進行熱刨光處理可提高巨阻抗封接的成功率。 充灌微電極液 用于灌充微電極的
膜片鉗技術（patch－clamp)
Instruments For ElectrophysiologyProducts include microelectrode, voltage and current clamp amplifiers, perfusion chambers, perfusion heating systems,
關于凍干技術的應用介紹
產品的冷凍干燥需要在一定裝置中進行，這個裝置叫做真空冷凍干燥機，簡稱凍干機。 凍干機按系統分，由制冷系統、真空系統、加熱系統、和控制系統四個主要部分組成。按結構分，由凍干箱或稱干燥箱、冷凝器或稱水汽凝集器、冷凍機、真空泵和閥門、電氣控制元件等組成。圖十三是凍干機組成示意圖。 凍干箱是一個能夠
關于紅外測溫技術的應用介紹
紅外測溫技術在生產過程中，在產品質量控制和監測，設備在線故障診斷和安全保護以及節約能源等方面發揮了著重要作用。近20年來，非接觸紅外測溫儀在技術上得到迅速發展，性能不斷完善，功能不斷增強，品種不斷增多，適用范圍也不斷擴大，市場占有率逐年增長。國產的品牌主要有INFR(紅外時代），光盛等，進口的有
關于電泳技術的應用介紹
1．聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應，可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開，并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法，可以檢出10-9～10-12g的樣品，且重復性好，沒有電滲作用。
關于熒光抗體技術的應用介紹
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光
膜片鉗及其原理和應用
膜片鉗是一種可以直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。其基本原理是用一個尖端光潔，直徑約為0.5~3um 的玻璃微電極同神經或肌細胞的膜接觸而不刺入，然后在微電極另一端開口處施加適當的負壓，將與電極尖端接觸的那一小片膜輕度吸入電極尖端的纖細開口，這樣在這一小
關于基因敲除技術應用介紹
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
關于熒光抗體技術的應用相關介紹
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光