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  • 細胞融合技術的實驗操作

    人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合;最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,讓這些標記抗體同融合細胞膜上相應的抗原結合。開始,融合的細胞一半是紅色,一半是綠色。在37℃下40分鐘后,兩種顏色的熒光在融合的雜種細胞表面呈均勻分布,這說明抗原蛋白在膜平面內經擴散運動而重新分布。這種過程不需要ATP。如果將對照實驗的融合細胞置于低溫(1℃)下培育,則抗原蛋白基本停止運動。這一實驗結果令人信服地證明了膜整合蛋白的側向擴散運動。......閱讀全文

    細胞融合技術的實驗操作

    人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合;最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,讓這些標記抗體同融合細

    簡述細胞融合的實驗操作

      人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合;最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,讓這些標記抗體同融

    細胞融合的實驗操作方法

    (以人鼠細胞雜交為例)人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合;最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,

    細胞融合技術的操作過程

    (以人鼠細胞雜交為例)人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素(fluorescin)結合,人的抗體與發紅色熒光的羅丹明(rhodamine)結合;第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合;最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中,

    細胞融合實驗

    實驗方法原理細胞融合的誘導物種類很多.常用的主要有滅活的仙臺病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和電脈沖。目前應用zui廣泛的是聚乙二醇,因為它易得、簡便,且融合效果穩定。PEG的促融機制尚不完全清楚,它可能引起細胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團發生結

    細胞融合實驗

    實驗概要掌握細胞融合原理、應用融合細胞的方法以及細胞融合率的計算。實驗原理細胞融合(Cell ?fusion),即在自然條件下或用人工方法(生物的、物理的、化學的)使兩個或兩個以上的細胞合并形成一個細胞的過程。人工誘導的細胞融合,在六十年代作為一門新興技術而發展起來。由于它不僅能產生同種細胞融合,也

    細胞融合實驗的實驗原理

      根據Burnet的抗體選擇學說,一個B淋巴細胞只能產生一種針對它能夠識別的特異性抗原決定簇的抗體。從一個祖先B細胞分裂繁殖而形成的純細胞系稱為克隆。來自克隆系的細胞基因是完全相同的,產生的抗體也完全相同。這種從一株克隆系產生的性質相同的均一抗體稱為單克隆抗體。但這種具有分泌功能的B淋巴細胞難以在

    細胞融合技術

    細胞融合(cell fusion)或細胞雜交(cell hybridization)是指真核細胞通過介導和培養,兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程。人工的細胞融合開始于20世紀50年代, 60年代到70代作為一門新興的技術, 發展非常快, 應用范圍也極為廣泛, 除了同種類細胞間可以

    細胞融合技術的發展

    19世紀30年代,科學家們相繼在肺結核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。細胞融合19世紀70年代,科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象,但是當時科學發展水平的限制,沒有給予足夠重視。1962年,日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。1965年,英國

    細胞融合技術的意義

    ⒈理論上說任何細胞,都有可能通過體細胞雜交而成為新的生物資源。這對于種質資源的開發和利用具有深遠的意義。⒉融合過程不存在有性雜交過程中的種性隔離機制的限制,為遠緣物種間的遺傳物質交換提供了有效途徑。⒊體細胞雜交產生的雜種細胞含有來自雙親的核外遺傳系統,在雜種的分裂和增殖過程中雙親的葉綠體、線粒體DN

    細胞融合實驗的實驗原理簡介

      根據Burnet的抗體選擇學說,一個B淋巴細胞只能產生一種針對它能夠識別的特異性抗原決定簇的抗體。從一個祖先B細胞分裂繁殖而形成的純細胞系稱為克隆。來自克隆系的細胞基因是完全相同的,產生的抗體也完全相同。這種從一株克隆系產生的性質相同的均一抗體稱為單克隆抗體。但這種具有分泌功能的B淋巴細胞難以在

    細胞融合實驗的實驗步驟介紹

      1. DMEM或1640基礎培養基、PEG溶液置于37℃水浴中預溫;  2. 將Balb/c小鼠摘眼球處死后,浸入75%灑精;  3. 無菌取免疫小鼠的脾臟;  4. 脾臟用PBS洗滌后,放入無菌過濾的網篩,再把網篩放在盛有完全培養基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器針管)輕輕研磨或擠壓,使其通過網

    體細胞融合實驗

    實驗材料 細胞試劑、試劑盒 PEG-1000儀器、耗材 培養基實驗步驟 1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度(80% 匯合率)。2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基,加 2 ml 50% PEG-1000,輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。3. 往培養

    體細胞融合實驗

    單層培養細胞的融合 懸浮培養細胞的融合 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試

    體細胞融合實驗

    單層培養細胞的融合 懸浮培養細胞的融合 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試

    細胞融合技術簡介

      細胞融合技術是用自然的或人為的方法,使種類不同的兩種生物細胞直接融合,產生能夠同時表達二者有益性狀新雜種細胞的技術。自然進行的細胞融合,即卵子和精子受精形成合體,只能發生在同一種生物或親緣關系很近的生物種之間。然而,細胞融合技術的問世不僅為細胞學、遺傳學的研究提供了有力的手段,而且開創了動物、植

    單克隆抗體技術的方法細胞融合操作過程

    首先制備細胞培養基、 氨基喋呤(A)貯存液、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷(HT)貯存液等各種細胞生長所需的營養物質。然后制備髓瘤細胞和脾淋巴細胞,之后進行細胞融合。在細胞融合后選擇性培養過程中,由于大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡,此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活,通常必須加入其他活細胞使之繁殖,

    細胞融合技術的應用價值

    細胞融合不僅可用于基礎研究,而且還有重要的應用價值,在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細胞融合另一個重要應用就是制備單克隆抗體。單克隆抗體可以用作診斷試劑,治療疾病和運載藥物,具有準確,高效,簡易,快速等優點。

    細胞融合技術的應用價值

    細胞融合不僅可用于基礎研究,而且還有重要的應用價值,在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細胞融合另一個重要應用就是制備單克隆抗體。單克隆抗體可以用作診斷試劑,治療疾病和運載藥物,具有準確,高效,簡易,快速等優點。

    細胞融合技術的前期發現

    人們很早就注意到了在自然條件下發生的細胞融合現象,首先在病料組織中發現了由細胞融合產生的多核細胞,緊接著發現在脊椎動物和無脊椎動物的正常細胞中也可發生細胞融合,隨后在體外組織培養中也發現了離體細胞的融合現象。自從發現活病毒可在體內介導癌細胞融合后,人們又實現了利用滅活病毒促進動物異種細胞融合,從而打

    細胞融合技術的發展歷程

    19世紀30年代,科學家們相繼在肺結核,天花,水痘,麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。19世紀70年代,科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象,但是當時科學發展水平的限制,沒有給予足夠重視。1962年,日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。1965年,英國科學家進

    細胞融合技術的相關概述

      人工細胞融合一般都采用化學和物理因素的誘導技術。如目前化學誘導常用促融合劑聚乙二醇(PEG);物理誘導采用電融合。為了改善和提高細胞融合的有效性,植物和微生物細胞的融合必須先除去細胞壁,使其成為原生質體。因此,對于植物和微生物來講,細胞融合常被稱為原生質體融合。細胞融合技術是在20世紀60年代建

    細胞融合技術的成功案例

    生物種類細胞來源甘藍—青菜葉—根大豆—馬唐草愈傷組織—葉矮牽牛—龍面花葉—花瓣大麥—花生種子—種子大麥—大豆葉—懸浮細胞小麥—矮牽牛葉—花瓣油菜—大豆葉—懸浮細胞玉米—大豆葉—懸浮細胞大豆—野豌豆懸浮細胞—懸浮細胞大麥—蠶豆葉—根大豆—香草木犀懸浮細胞—葉酵母菌—雞原生質體—血紅細胞大豆—煙草懸浮細

    細胞融合技術的應用價值

    細胞融合不僅可用于基礎研究,而且還有重要的應用價值,在植物育種方面已經成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。細胞融合另一個重要應用就是制備單克隆抗體。單克隆抗體可以用作診斷試劑,治療疾病和運載藥物,具有準確,高效,簡易,快速等優點。

    動物細胞融合實驗

    一、實驗目的細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下,體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50年,現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫,腫瘤及細胞工程的重要手段。通過實驗,了解細胞融合的原理,掌握細胞融合的基本方法。二、實驗原理在誘導物

    動物細胞融合實驗

    細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下,體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年,現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫,腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物(如仙臺病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的細胞發生凝集,隨后在質膜接

    細胞融合技術誘發融合

    異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合,稱誘發融合。

    細胞融合過程技術分析

    細胞融合過程技術分析融合的方法很多,常用的有轉動法和離心法。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1zui為常用。1.試劑與材料(1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。(2)1640培養液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(

    細胞融合技術自發融合

    同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并,稱自發融合。

    細胞融合主要方法和操作步驟

    兩個或兩個以上的細胞合并成一個雙核或多核細胞的現象稱為細胞融合,也稱細胞雜交,在自然情況下的受精過程即屬這種現象。誘導細胞融合的主要方法有:病毒誘導融合,化學融合劑誘導融合和電融合。1. 病毒誘導融合:有許多種類的病毒能介導細胞融合,最常用的是滅活的仙臺病毒(HVJ),為RNA病毒。病毒誘導細胞

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