關于RNA干擾的作用機制介紹
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈，繼之由反義siRNA再與體內一些酶（包括內切酶、外切酶、解旋酶等）結合形成RNA誘導的沉默復合物（RNA-induced silencing complex，RISC）。RISC與外源性基因表達的mRNA的同源區進行特異性結合，RISC具有核酸酶的功能，在結合部位切割mRNA，切割位點即是與siRNA中反義鏈互補結合的兩端。被切割后的斷裂mRNA隨即降解，從而誘發宿主細胞針對這些mRNA的降解反應。siRNA不僅能引導RISC切割同源單鏈mRNA，而且可作為引物與靶RNA結合并在RNA聚合酶......閱讀全文
關于RNA干擾的作用機制介紹
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞
RNA干擾的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
RNA干擾的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
RNA干擾的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
RNA干擾技術的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
關于小干擾RNA的RNA激活介紹
已經發現dsRNA還可以激活基因表達，這種機制被稱為“小RNA誘導的基因激活”或RNAa。已經顯示靶向基因啟動子的dsRNA誘導相關基因的有效轉錄激活。使用合成的dsRNA在人細胞中證明RNAa，稱為“小活化RNA”（saRNA）。尚不清楚RNAa是否在其他生物體中是保守的。
關于RNA干擾的發現介紹
RNAi是在研究秀麗新小桿線蟲（C. elegans）反義RNA（antisense RNA）的過程中發現的，由dsRNA介導的同源RNA降解過程。1995年，Guo等發現注射正義RNA（sense RNA）和反義RNA均能有效并特異性地抑制秀麗新小桿線蟲par-1基因的表達，該結果不能使用反義
RNAi（RNA干擾）的分子機制
通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱為Dic
關于小干擾RNA的基本介紹
小干擾RNA（Small interfering RNA；siRNA）有時稱為短干擾RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一個長20到25個核苷酸的雙股RNA，在生物學上有許多不同的用途。已知siRNA主要參與RNA干擾（RNAi）現象
關于小干擾RNA的結構介紹
siRNA具有明確定義的結構：具有磷酸化5'末端的短（通常20至24bp）雙鏈RNA（dsRNA）和具有兩個突出核苷酸的羥基化3'末端。該切酶酶催化生產的siRNA由長的dsRNA和小發夾RNA。siRNA也可以通過轉染引入細胞。由于原則上任何基因都可以被具有互補序列的合成siR
關于小干擾RNA的發現介紹
siRNA最早是由英國的大衛·包孔博（David Baulcombe）團隊發現，是植物中的轉錄后基因沉默（post-transcriptional gene silencing；PTGS）現象的一部分，其研究結果發表于《科學》。2001年，湯瑪士·涂許爾（Thomas Tuschl）團隊發現合成
基因干擾技術的作用機制介紹
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
關于RNA干擾的化學合成介紹
許多國外公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成siRNA。主要的缺點包括價格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高，為一個基因合成3—4對siRNAs 的成本就更高了，比較常見的做法是用其他方法篩選出最有效的序列再進行化學合成。 最適用于：已經找到最有效的siRNA的情況
關于小干擾RNA的siRNA設計介紹
最初，siRNA序列的選擇是基于實驗經驗而獲得的（Elbashir et al. 2001，2002）。最近，生物信息學工具被用來設計siRNA（表18-1），目前多個數據庫收錄了經過實驗確證的siRNA和shRNA。值得推薦的是，在設計新的siRNA之前可以通過搜索已有的siRNA數據庫和科研
關于RNA干擾的基本信息介紹
RNA干擾（RNA interference，RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默，主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類：TGS是指由于DN
RNA干擾的分子機制首次被發現
日本東京大學官網近日宣布，東京大學和京都大學研究人員發現了核糖核酸干擾（RNAi）的分子機制。所謂核糖核酸干擾，就是單分子RNA分裂時出現的某種蛋白質合成受到抑制的現象。 由于借助RNAi可以關閉特定基因的表達，科學家一直期待RNAi現象在醫療領域得到應用。在先前研究中，科學家已經發現RNAi
小干擾RNA的概念和作用
在后生生物中，由Dicer產生的小干擾RNA（siRNA）被整合到稱為RNA誘導沉默復合物（RISC）。該復合物含有內切核酸酶，切割與siRNA結合的完全互補的mRNA，產生的片段然后被核酸外切酶降解。 siRNA通常用于實驗室細胞培養中阻斷基因的功能。SiRNA被認為是病毒先天免疫系統的一部分，可
關于小干擾RNA的簡介
小干擾RNA（siRNA），有時稱為短干擾RNA或沉默RNA，是一類雙鏈RNA分子，長度為20-25個堿基對，類似于miRNA，并且在RNA干擾（RNAi）途徑內操作。它干擾了表達與互補的核苷酸序列的特定基因的轉錄后降解的mRNA，從而防止翻譯。 siRNA由雙鏈RNA (double str
反義RNA的作用機制
反義RNA的分類和作用機制：下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源轉錄后水平?micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-溶源?噬菌體sa
RNA沉默的作用機制
植物可利用 PTGS 和 TGS 來抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后會產生大量病毒來源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介導對病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的轉錄;?而在與植物長期共進化過程中, 病毒編碼一個或多個RNA沉
關于核糖核酸的干擾機制介紹
1998年，美國兩位科學家安德魯·法爾和克雷格·梅洛在《自然》雜志上共同發表了有關發現RNA（核糖核酸）干擾機制的論文，被同行稱為“近一段時間以來分子生物學最激動人心的發現之一”。 安德魯·法爾1959年出生在美國加利福尼亞州圣克拉拉縣，本科在加利福尼亞大學伯克利分校主修數學，僅用3年時間就拿
RNA干擾機制的主要特點及優勢
1.高效性：Elbashir等在研究中發現分別為25 nmol/L與100 nmol/L的起始雙鏈RNA產生的結果是一樣的，只是高濃度起始的更有效些。將雙鏈RNA濃度降低到1.5 nmol/L時產生的基因沉默效果變化不大，只有當濃度降低到0.05 nmol/L時，沉默的效果才消失。Holen等也證實
RNA干擾實驗技術介紹
通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱為Dicer
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后，即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于：成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低（低于70%），則應采用腺病毒或慢病毒載體，利用病毒載體的高感染率、高表達特性，更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后，即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于：成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低（低于70%），則應采用腺病毒或慢病毒載體，利用病毒載體的高感染率、高表達特性，更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
RNA干擾回復實驗介紹
RNA干擾回復實驗，主要是為了說明Off-target效應。Off-target效應Off-target effects（脫靶效應）最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出（Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
RNA干擾主體實驗介紹
siRNA表達載體構建好后，即可進行RNA干擾主體實驗。RNA干擾主體實驗的重點在于：成功將siRNA表達載體導入目的細胞如果目的細胞的質粒轉染效率較低（低于70%），則應采用腺病毒或慢病毒載體，利用病毒載體的高感染率、高表達特性，更好地開展RNA干擾主體實驗。設置好分組和對照按照nature的標準
概述反義RNA的作用機制
反義RNA的分類和作用機制：下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。 調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源 轉錄后水平 micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體 oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-
RNA干擾回復實驗的基本介紹
RNA干擾回復實驗，主要是為了說明Off-target效應。 Off-target效應 Off-target effects（脫靶效應）最早由Dharmacon科學家Jackson和他的同事們提出（Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can I
RNA干擾主體實驗的相關介紹
siRNA表達載體構建好后，即可進行RNA干擾主體實驗。 RNA干擾主體實驗的重點在于： 成功將siRNA表達載體導入目的細胞 如果目的細胞的質粒轉染效率較低（低于70%），則應采用腺病毒或慢病毒載體，利用病毒載體的高感染率、高表達特性，更好地開展RNA干擾主體實驗。 設置好分組和對照