PCR實驗中Ct值出現過晚（Ct>38）的原因
(1)擴增效率低: 優化反應條件；設計更好的引物或探針；改用三步法進行反應等。(2)模版降解或模版濃度太高。(3)試劑靈敏度不好：更換更高靈敏度、抗干擾的試劑。(4)檢測基因結構復雜：高GC、復雜二級結構和長片段模版，都會影響PCR擴增。(5)擴增產物太長: 一般采用80-150bp的產物長度。......閱讀全文
PCR實驗中Ct值出現過晚（Ct>38）的原因
(1)擴增效率低: 優化反應條件；設計更好的引物或探針；改用三步法進行反應等。(2)模版降解或模版濃度太高。(3)試劑靈敏度不好：更換更高靈敏度、抗干擾的試劑。(4)檢測基因結構復雜：高GC、復雜二級結構和長片段模版，都會影響PCR擴增。(5)擴增產物太長: 一般采用80-150bp的產物長度。
Ct－值出現過晚（Ct>38）－問題分析
擴增效率低：反應條件不夠優化。設計更好的引物或探針；改用三步法進行反應；適當降低退火溫度；增加鎂離子濃度等。 PCR 各種反應成分的降解或加樣量的不足。 PCR 產物太長： 一般采用 80～150 bp 的產物長度。
熒光定量PCR實驗中無Ct值出現的原因
(1)反應的循環數不夠：一般要在35個循環以上，但是過多的循環次數可增加背景值。(2)檢測熒光信號的步驟有誤：SYB-Rgreen法（SG法）采用的是72延伸時采集熒光信號，Taman法則是在退火結束或延伸結束時進行信號采集。(3)引物或探針降解: 可通過PAGE電泳檢測其完整性，若是電泳條帶呈彌散
PCR的Ct值
Ct值：C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍
PCR的Ct值
Ct值：C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍
PCR的Ct值
Ct值：C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍
PCR擴增中CT值的意義
在PCR擴增反應的最初數個循環里，熒光信號變化不大，接近一條直線，這樣的直線即是基線，這條線是可以自動生成也可以手動設置的。之后反應會進入指數增長期，這個期間擴增曲線具有高度重復性，在該期間，可設定一條熒光閾值線，它可以設定在熒光信號指數擴增階段任意位置上，但一般會將熒光閾值的缺省設置是 3-15
定量pcr中CT值的定義
Ct值：C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號,熒光域值的缺省設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍
熒光定量PCR的CT值
如果有標準曲線，按照標準曲線計算。一般都是相對量。則用delta delta CT方法來計算。舉例如下：對照組基因A的CT值為20， 內參（比如βactin)CT值15。實驗組基因A CT值18，內參CT值14。首先算加樣量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實驗組的加樣量是
無－Ct－值出現問題
檢測熒光信號的步驟有誤：一般 SG 法采用 72℃ 延伸時采集，Taqman 法則一般在退火結束時或延伸結束采集信號。 引物或探針降解：可通過 PAGE?電泳檢測其完整性。 模板量不足：對未知濃度的樣品應從系列稀釋樣本的最高濃度做起。 模板降解：避免樣品制備中雜質的引入及反復凍融的情況。??
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
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realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
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這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
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這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
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這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
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這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
realtime－PCR中內參基因的CT值
這個要看你在做PCR前的加樣量是否一致。如果加樣量是一致的，而內參做出來差別大（比如3-4個CT值）那說明你的實驗體系有嚴重的問題。理論上加入的DNA量一樣多，內參的CT值應該都一樣。如果你能肯定加樣量是一致的，那說明你的樣本要么降解了，要么就是你的實驗處理對內參的量產生了影響，必須換一個基因做內參
熒光PCR時ct值大于30
看了你空間里的溶解曲線，你可以看到溶解峰的溫度都很低，全在80以下，你擴出來的東西多半只是引物，你跑定量的時候有做NTC的孔嗎，如果有做，可以對照NTC組和加了模板的組，溶解峰還是一樣的話，那你擴出來的產物100%是引物了。再有，你的擴增曲線問題，CT太了，一般做定量認為CT=25時，是一個模板擴出
PCR中的內參Ct值相差很大是為什么
不同基因之間表達量差異很大,可達上千甚至上萬倍之差,所以CT值差10以內屬正常現象,但通常選用內參基因屬于表達量較高的持家基因,如果目標基因和內存基因表達量（CT值差）過大,用內參基因來衡量目標基因的表達量（絕對值）就不完全可靠,但至少可以說明目標基因表達非常低.
關于熒光定量PCR的CT值問題
如果有標準曲線，按照標準曲線計算。一般都是相對量。則用delta delta CT方法來計算。舉例如下：對照組基因A的CT值為20， 內參（比如βactin)CT值15。實驗組基因A CT值18，內參CT值14。首先算加樣量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實驗組的加樣量是
為什么pcr中ct值遠小于其實dna的數目
沒有關系,可以繼續按正常步驟計算.內參的CT值通常要控制在25-30,目的基因CT值高,只說明目的基因表達量比較低..
定量PCR－ct值在多少范圍適合
通常情況下,我們認定為15到35CT比較合理,超過35個CT那么就算它沒有擴增了,如果15之前起峰,那么就是模板濃度太高所引起的,如果發文章,那么建議你控制在15到35之間吧