氯霉素乙酰轉移酶的定點突變介紹
為了研究反應中底物識別，催化和特殊側鏈交互作用對蛋白結構各方面的影響，包括對其穩定性和反應活性的影響，CATⅢ己經有超過60種的定點突變類型。特殊的點突變類型有助于研究每一個酪氨酸殘基在配體結合時熒光發生改變的過程中所起的作用，有助于進一步的闡明CATⅢ和氯霉素交互作用的NMR結果。對cat基因實施隨機和定點突變將會對CATⅠ和CATⅢ的比較研究提供有用的實驗數據，對CAT結構的認識也會進一步的加深。......閱讀全文
氯霉素乙酰轉移酶的定點突變介紹
為了研究反應中底物識別，催化和特殊側鏈交互作用對蛋白結構各方面的影響，包括對其穩定性和反應活性的影響，CATⅢ己經有超過60種的定點突變類型。特殊的點突變類型有助于研究每一個酪氨酸殘基在配體結合時熒光發生改變的過程中所起的作用，有助于進一步的闡明CATⅢ和氯霉素交互作用的NMR結果。對cat基因
關于氯霉素乙酰轉移酶的結構介紹
最早對CAT結構的研究主要使用的是CATⅠ和CATⅢ的雜聚體，CAⅠ和CA’F1nⅡ亞基的分子量分別是25688 和24965道爾頓，而CATⅢ的沉降平衡數據顯示其分子量為70500道爾頓，這證明CATⅢ是一個三聚體（αβ2和α2β）的結構。 在CATⅢ三聚體中，每一亞基六條鏈的β片層結構延
氯霉素乙酰轉移酶的結構
內容信息最早對CAT結構的研究主要使用的是CATⅠ和CATⅢ的雜聚體，CAⅠ和CA’F1nⅡ亞基的分子量分別是25688和24965道爾頓，而CATⅢ的沉降平衡數據顯示其分子量為70500道爾頓，這證明CATⅢ是一個三聚體（αβ2和α2β）的結構。在CATⅢ三聚體中，每一亞基六條鏈的β片層結構延伸通
氯霉素乙酰轉移酶的結構特點
內容信息最早對CAT結構的研究主要使用的是CATⅠ和CATⅢ的雜聚體，CAⅠ和CA’F1nⅡ亞基的分子量分別是25688和24965道爾頓，而CATⅢ的沉降平衡數據顯示其分子量為70500道爾頓，這證明CATⅢ是一個三聚體（αβ2和α2β）的結構。在CATⅢ三聚體中，每一亞基六條鏈的β片層結構延伸通
關于氯霉素乙酰轉移酶的簡介
氯霉素乙酰轉移酶（Chloramphenicol Acetyltransferase ，CAT）是一種原核酶類，可以將氯霉素乙酰化而使其 失活，是細菌產生氯霉素抗性的主要原因。 在大腸桿菌中易表達，而且非常穩定，因此，氯霉素乙酰轉移酶可被改造成檢測氯霉素的理想工具酶。不同種類的抗性細菌可以產
氯霉素乙酰轉移酶的活性位點的介紹
1、氯霉素結合位點 氯霉素結合與定位在亞基交界面的一個深深的袋子結構中。盡管形成袋子結構的大多數氨基酸位于形成交界面的其中的一個亞基中，在催化中起關鍵作用的195位的組氨酸卻位于另外的一個亞基。氯霉素的苯環與29位亮氨酸，31位半胱氨酸，160亮氨酸，172位異亮氨酸的側鏈結合，其二氯基團和1
氯霉素乙酰轉移酶的基本信息
氯霉素乙酰轉移酶（Chloramphenicol Acetyltransferase ，CAT）是一種原核酶類，可以將氯霉素乙酰化而使其失活，是細菌產生氯霉素抗性的主要原因。
氯霉素乙酰轉移酶的基本信息
氯霉素乙酰轉移酶（Chloramphenicol Acetyltransferase ，CAT）是一種原核酶類，可以將氯霉素乙酰化而使其失活，是細菌產生氯霉素抗性的主要原因。
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定
試劑、試劑盒 Tris-緩沖液 Tris 三硝基甲苯（Triton） CAT 稀釋緩沖液CAT 酶標準物閃爍液 聚丙烯閃爍杯儀器、耗材 微量離心管微量離心機實驗步驟 一、材料滅菌物品1. D-PBSA2. 多孔培養板：6 孔，35 mm非消毒物品1. Tris-緩沖液：Tris-HCl，0.1mol
氯霉素乙酰轉移酶的基本功能
細菌的氯霉素抗性和CAT有著直接的關系。當含有CAT的細菌暴露于氯霉素時，可以使氯霉素乙酰化而失活。
氯霉素乙酰轉移酶的主要功能
細菌的氯霉素抗性和CAT有著直接的關系。當含有CAT的細菌暴露于氯霉素時，可以使氯霉素乙酰化而失活。
關于定點突變的單點突變的介紹
對于單點突變，Stratagene公司的QuikChange Site-directed Mutagenesis kit是不錯的選擇，通過巧妙設計，將質粒定點突變技術變得簡單有效。準備突變的質粒必須是從常規E.coli中經純化試劑盒(Miniprep)或者氯化銫純化抽提的質粒。設計一對包含突變位
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法，檢測CAT活性，它的靈敏度接近同位素測定方法，而操作極
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
通過測定轉染細胞的報告基因表達，如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于（1）測定基因表達（2）基因整合評價（3）細胞的調控。來源于《動物細胞培養：基礎技術指南（第五版）》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransfe
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法，檢測CAT活性，它的靈敏度接近同位素測定方法，而操作極
關于定點突變的內容介紹
體外定點突變技術是當前生物、醫學各領域研究中的一種重要實驗手段，是改造、優化基因的便捷方案，是探索啟動子調節位點的有效手段，也是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具。 蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可
關于定點突變的流程介紹
定點突變一般須有含有待突變基因的高純度質粒，不少于10μg，電泳圖清晰，達酶切及測序要求； 1.對待突變基因測序結果進行分析，設計突變方案； 2.根據突變方案設計合成覆蓋突變位點的雙向引物，合成目的DNA兩端引物，進行高保真PCR反應； 3.默認情況下，將PCR產物克隆至T載，或者根據要求
關于定點突變的意義介紹
根據生物學理論知識，基因會發生突變，突變可以自發，也可以誘發。但在加拿大生物化學家M·史密斯（1932－2000年）發明定點突變法之前，突變株的產生必須經由自然界或用化學等方法誘使基因體突變。這類方法屬于隨機突變，突變株必須在生物形狀上有所改變，才能確定有突變發生，但除非用分子生物方法或遺傳方法
關于定點突變的多點突變的原理介紹
有的時候研究可能需要多個位點的定點突變，比如改造酶的活性或者動力學特性，研究蛋白之間的相互作用位點等，單點突變不能滿足實驗的需要，重復進行單點突變也非常浪費時間。因而Stratagene公司又推出了QuikChange Multi Site-Directed Mutagenesis kit。最多
關于定點突變的多點突變的應用前景介紹
不同于定點突變的是基于PCR的隨機突變，通過改變PCR條件提高PCR過程中的隨機出錯，這種方法適用于未知的蛋白質，作全局性分析，所以有人稱為飽和突變（saturation mutagenesis）。不過這種方法由于沒有目的性，分析操作相當繁瑣，并且不會出現一個位點2個以上堿基突變，因而應用上有局
關于乙酰轉移酶的分析介紹
Mayo臨床醫學院生化和分子生物學部的張治國（Zhiguo Zhang，音譯）、韓鈞紅（Junhong Han，音譯）等與加州大學河畔分校以及紐約大學醫學院的研究人員合作，發現Ty1轉座基因（transposition gene）的蛋白產物109（Rtt109）是種特殊的組蛋白乙酰轉移酶。文章刊
關于定點突變的基本信息介紹
定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質粒）中引入所需變化（通常是表征有利方向的變化），包括堿基的添加、刪除、點突變等。定點突變能迅速、高效的提高DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征，是基因研究工作中一種非常有用的手段。
DNA定點突變實驗
實驗方法原理?定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質粒）中引入所需變化（通常是表征有利方向的變化），包括堿基的添加、刪除、點突變等。單點突變的原理是從常規E.coli中經純化試劑盒(Miniprep)或者氯化銫純化抽提得到質粒。設計一對包含突變位點的
基因定點突變知識
實驗原理基因定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法改變目的基因的序列，包括堿基的插入、缺失、點突變等。基因定點突變是基因研究中比較常用的方法，可以短時間內研究目的DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征。定點突變需要設計特定的突變引物。引物長度一般為25-45 bp，建議選擇30-35bp長度
DNA定點突變實驗
DNA定點突變可用于：（1）研究蛋白質相互作用位點的結構、改造酶的不同活性或者動力學特性；（2）改造啟動子或者DNA作用元件；（3）提高蛋白的抗原性或者是穩定性、活性、研究蛋白的晶體結構，以及藥物研發、基因治療等等方面。實驗方法原理定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以
DNA定點突變實驗
DNA定點突變實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質粒）中引入所需變化（通常是表征有利方
乙酰轉移酶的簡介
乙酰轉移酶，細胞分裂S期，組蛋白H3上第56位賴氨酸（H3-K56）發生乙酰化。H3-K56乙酰化作用重大，失敗會導致細胞對引發DNA損傷的條件非常敏感。盡管如此，但科學家一直沒有找到組蛋白乙酰轉移酶（histone acetyltransferase，HAT）催化球形H3-K56乙酰化的科學證
定點突變技術——從單點突變到多點突變
?體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究有助于我
定點突變技術：從單點突變到多點突變
體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組 研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究
定點突變技術――從單點突變到多點突變
體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具，也是我們在實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組 研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產物進行研究有助于我