電泳技術的過程介紹
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷的涂料離子移動到陰極,并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物,沉積于工件表面。它包括四個過程:電解(分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質,涂膜沉積,方程式為:H2O→OH-+H+。電泳動泳動、遷移陽離子樹脂及H+ 在電場作用下,向陰極移動,而陰離子向陽極移動過程。電沉積(析出)在被涂工件表面,陽離子樹脂與陰極表面堿性作用,中和而析出不溶解物,沉積于被涂工件上。電滲(脫水)涂料固體與工件表面上的涂膜為半透明性的,具有多數毛細孔,水被從陰極涂膜中排滲出來,在電場作用下,引起涂膜脫水,而涂膜則吸附于工件表面,而完成整個電泳過程。......閱讀全文
電泳技術的過程介紹
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷的涂料離子移動到陰極,并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物,沉積于工件表面。它包括四個過程:電解(分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質,涂膜沉積
電泳技術的過程
電泳是電泳涂料在陰陽兩極,施加于電壓作用下,帶電荷的涂料離子移動到陰極,并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物,沉積于工件表面。它包括四個過程:電解(分解)在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子OH-,此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質,涂膜沉積
電泳技術的應用介紹
1.聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應,可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開,并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法,可以檢出10-9~10-12g的樣品,且重復性好,沒有電滲作用。
電泳技術的應用介紹
過程如何運作有機分子通常帶有正電荷或負電荷,這會使它們對電流作出響應。帶正電荷的分子向電場的負極遷移,帶負電荷的分子向正極遷移。電荷較大的分子在施加電荷時趨向于更快地移動并傳播更遠。但是,它們也會因摩擦而減慢,而摩擦又受分子的大小和形狀以及測試所用介質的影響。通過控制電流和測試介質提供的摩擦力,研究
轉移電泳技術介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交,但瓊脂糖不適合于進行雜交操作,1975年,Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜(NC膜)上,再進行雜交的方法,被稱為Southern印跡法。隨后,Alwine等將類似方法用于RNA印跡,被戲稱為Northe
電泳技術簡單介紹
電泳技術原理(以瓊脂糖凝膠電泳為例) 1、首先介紹使用的載體--瓊脂糖。 瓊脂糖是線性的多聚物,基本結構是1,3連結的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形
關于電泳技術的應用介紹
1.聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應,可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開,并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法,可以檢出10-9~10-12g的樣品,且重復性好,沒有電滲作用。
影響電泳技術的因素介紹
1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
凝膠電泳技術介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中,DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時,在電場作用下,迫使DNA變形擠過篩孔,而沿著泳動方向伸直,因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向,則DNA分子必須改變其構象,沿新的泳動方面伸直,而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
瓊脂糖電泳技術的特點介紹
天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。電泳現
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷,在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極
電泳技術
電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具 有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時,該蛋白質帶負電荷, 在電場中向正極移動,相反則帶正電荷,在電場中向負極移動,只有蛋白質溶液pH在 蛋白質的等電點時靜電荷是零,在電場中不向任何一極移動。 電泳現象早在1
電泳技術
電泳技術簡介?電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。?????電泳技術的基本原理和分類
電泳技術
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。??? 電泳技術的基本原理和分類 在電場中,推
關于瓊脂糖的電泳技術的特點介紹
天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而
瓊脂糖凝膠電泳技術介紹
一、凝膠制備1.微波爐溶解瓊脂糖時,膠液沸騰沖溢出三角錐瓶微波爐加熱時膠液可能發生劇烈沸騰,1)總液體量不宜超過三角錐瓶的?50%?容量,2)2%?以上膠液設置中火加熱3)膠液劇烈沸騰時,停止加熱,移開三角錐瓶,請戴上防熱手套,小心搖動三角錐瓶,然后再次加熱,膠液沸騰直至膠液清澈,保證瓊脂糖完全溶解
毛細管凝膠電泳技術介紹
中文名稱毛細管凝膠電泳英文名稱capillary gel electrophoresis;CGE定 義將凝膠移到毛細管中作支持物進行的一種電泳。由于溶質分子體積不同,在起分子篩作用的聚合物內進行電泳時被分離。適用于生物大分子的分析及PCR產物分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技
火箭電泳技術
(一)原理抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳,在電場作用下,抗原向一個方向移動,在移動的過程中,逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大,說明抗原量越多,二者呈正相關,因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。(二)材料與試劑1.0.05mol/L pH8.6巴比妥緩沖液配成2
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團,它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電,在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以
火箭電泳技術
(一)原理??? 抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳,在電場作用下,抗原向一個方向移動,在移動的過程中,逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大,說明抗原量越多,二者呈正相關,因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。?(二)材料與試劑1.0.05mol/L pH8.6巴比妥緩
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團,它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電,在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下,由于待分離樣品中各種分子帶電性質以
紙電泳技術的應用
紙電泳的設備簡單,應用廣泛,是最早使用的一種電泳技術。最初用于蛋白質,后來也用于氨基酸、核苷酸一些低分子物質,其優點在于或采用濾紙與色素結合的直接電泳圖,或剪下濾紙的任何部分來抽提其中的物質。在早期的生物化學研究中,曾發揮重要作用。由于紙電泳時間長,分辨率較差,近年來逐漸為其他快速、簡便、分辨率高的
電泳技術的研究歷史
電泳(Electrophoresis)是指帶電荷的粒子或分子在電場中移動的現象稱為電泳。大分子的蛋白質,多肽,病毒粒子,甚至細胞或小分子的氨基酸,核苷等在電場中都可作定向泳動。1937年Tiselius成功地研制了界面電泳儀進行血清蛋白電泳,它是在一U型管的自由溶液中進行的,電泳后用光學系統使各種蛋
電泳技術的影響因素
1.電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度,也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質,氨基酸等類似兩性電解質,pH值離等電點越遠,粒子所帶電荷越多,泳動速度越快,反之越慢。因此,當分離某一種混合物時,應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值,以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
蛋白質組的雙向凝膠電泳技術介紹
雙向凝膠電泳技術與質譜技術是目前應用最為廣泛的研究蛋白質組學的方法。雙向凝膠電泳技術利用蛋白質的等電點和分子量差別將各種蛋白質區分開來。雖然二維凝膠電泳難以辨別低豐度蛋白,對操作要求也較高,但其通量高、分辨率和重復性好以及可與質譜聯用的特點,使其成為目前最流行、可靠的蛋白質組研究手段。雙向凝膠電
雙向凝膠電泳技術的樣品要求和制備的介紹
樣品要求 1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT; 2、樣品濃度大于2 μg/ μl; 樣品制備 雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。
蛋白電泳技術手冊
在蛋白電泳過程中,配膠麻煩、電泳耗時長、需要反復調試凝膠濃度是我們面臨的三個棘手問題。EZ Protein系列蛋白電泳產品的克服了上述問題。2-5分鐘配膠,濃縮膠、分離膠一次成型;25分鐘恒壓完成電泳;10-250KD蛋白質一塊膠即可分離,免去了反復調整膠濃度的麻煩。獨有配方,本產品不添加T
免疫火箭電泳技術
一、原理?定量的抗原加入到含有一定量的相應抗體的瓊脂糖凝膠中,在電場作用下,引起抗原抗體的遷移和相互反應,當比例合適時形成肉眼可見的沉淀峰,由于電泳繼續進行,樣品孔不斷有抗原移向抗原抗體復合物的沉淀峰,因抗原過剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗體復合物的沉淀峰。如此反復向前,直到再無游離抗原而反應