CRISPRCas9基因編輯技術簡介
CRISPR-Cas9是繼ZFN、TALENs等基因編輯技術推出后的第三代基因編輯技術,短短幾年內,CRISPR-Cas9技術風靡全球, 成為現有基因編輯和基因修飾里面效率最高、最簡便、成本最低、最容易上手的技術之一,成為當今最主流的基因編輯系統。一、什么是CRISPR-Cas系統CRISPR-Cas系統是原核生物的一種天然免疫系統 。某些細菌在遭到病毒入侵后,能夠把病毒基因的一小段存儲到自身的 DNA 里一個稱為 CRISPR 的存儲空間。當再次遇到病毒入侵時,細菌能夠根據存寫的片段識別病毒,將病毒的DNA切斷而使之失效。C RISPR-Cas系統包含CRISPR基因座和Cas基因(CRISPR關聯基因)兩部分。1、CRISPR(/'kr?sp?r/)是原核生物基因組內的一段重復序列 。CRISPR全稱Clustered Regularly Interspersed Short Palin......閱讀全文
CRISPRCas9-原理
CRISPR/Cas技術是什么?CRISPR/Cas系統是一種原核生物的免疫系統,用來抵抗外源遺傳物質的入侵,比如噬菌體病毒和外源質粒。同時,它為細菌提供了獲得性免疫:這與哺乳動物的二次免疫類似,當細菌遭受病毒或者外源質粒入侵時,會產生相應的“記憶”,從而可以抵抗它們的再次入侵。CRISPR/Cas
CRISPRCas9基因編輯技術簡介
CRISPR-Cas9是繼ZFN、TALENs等基因編輯技術推出后的第三代基因編輯技術,短短幾年內,CRISPR-Cas9技術風靡全球, 成為現有基因編輯和基因修飾里面效率最高、最簡便、成本最低、最容易上手的技術之一,成為當今最主流的基因編輯系統。一、什么是CRISPR-Cas系統CRISPR-Ca
Nature發布CRISPRCas9重大新成果
來自麻省總醫院的一個研究小組找到了一種新方法來擴大強大基因編輯工具——CRISPR-Cas9 RNA引導核酸酶的使用及提高其精確性。他們的研究論文在線發表在6月22日的《自然》(Nature)雜志上。 在這篇Nature文章中,研究人員描述了一種演化版本的DNA切割酶Cas9。相比于迄今為止
基因編輯工具CRISPRCas9遭遇新挫折!
在一項新的研究中,來自德國明斯特大學的研究人員發現,在小鼠進行常規的CRISPR-Cas9基因插入過程中,不必要的DNA重復頻率很高。相關研究結果發表在2020年2月21日的Science Advances期刊上,論文標題為“Pervasive head-to-tail insertions o
Nature技術突破:光控CRISPRCas9系統
發表在6月15日《自然生物技術》(Nature Biotechnology)雜志上的一項研究中,來自日本的研究人員報告稱他們構建出了更好的CRISPR基因編輯系統:一種光激活的新型Cas9核酸酶使得研究人員能夠在空間和時間上更好地控制RNA引導的核酸酶的活性。 加州大學戴維斯分校干細胞生物學家
CRISPRCas9治療視網膜血管生成疾病
血管生成是導致視力喪失、失明和多種退化性眼部疾病(包括增生性糖尿病視網膜病變、濕性老年黃斑變性、早產兒視網膜病變等)的特征之一,隨著病程發展,這些血管還會滲漏、破裂、甚至導致視網膜脫離,使視力受損。根據最新《Nature Communications》報道,研究人員提出用基因編輯技術防止視網膜血
Nature:CRISPRCAS9推動后基因組時代
近日,來自美國的科學家在國際期刊Nature發表了他們的最新研究成果,他們利用結構導向的方法改造了CRISPR-CAS9復合物來系統性研究基因功能,并通過構建sgRNA文庫大規模篩選抵抗BRAF抑制劑的激活基因。該文章利用CRISPR-CAS9技術研究基因功能,對后基因組時代的基因功能研究具有
PNAS:CRISPRCas9系統構建心臟衰竭小鼠模型
突變體小鼠模型為我們研究個別基因對發育、生理以及疾病發生等科學問題提供了極大的便利。然而,傳統的小鼠突變體模型構建是一項十分耗時耗力的工程。最近的CRISPR-Cas9系統對于動物體的遺傳修飾是一項革命性的突破。 CRISPR系統首先被發現于細菌抗病毒侵染的免疫系統,通過一類sgRNA的介導,
Nature發布突破性CRISPRCas9新技術
一種改良版本的新型基因編輯CRISPR-Cas9核酸酶似乎可以強有力地消除當前這一技術一個非常重要的限制:不必要的脫靶DNA斷裂,將它們降低至無法檢測到的水平。在發表于《自然》(Nature)雜志上的研究論文中,麻省總醫院(MGH)的研究人員描述了改造Cas9酶,減少它與靶DNA的非特異性互作
Nat-Meth:-新方法終結CRISPRCAS9爭論
基因編輯是近年來發展起來的可以對基因組完成精確修飾的一種技術,可完成基因定點InDel突變、敲入、多位點同時突變和小片段的刪失等。這項革命性的技術可讓研究人員精確地改變基因組,從而有著廣泛應用,包括基礎研究、生物技術和人類基因療法。 自從基因組編輯技術引爆科學界熱潮以來,就有許多研究小組發現具
Nature子刊:提高CRISPRCas9保真度
上海科技大學,中科院-馬普計算生物學研究所,南京醫科大學三處的研究人員合作發表了題為“APOBEC3 induces mutations during repair of CRISPR-Cas9-generated DNA breaks”的文章,證實了APOBEC在CRISPR/Cas9引發的同
Trends-in-Parasitol:CRISPRCas9技術把蚊子給“閹了”
隨著寨卡病毒、基孔肯雅熱及登革熱爆發的不斷上升,衛生官員迫切需要采取措施阻斷這些病毒的傳播。近來刊登在國際雜志Trends in Parasitology上的一項研究中,來自弗吉尼亞理工大學(Virginia Tech)的研究者就利用了一種特殊方法,即對雄性蚊子進行基因工程修飾,這或許可以有效阻
CRISPRCas9靶向突變-探索眉毛濃密的遺傳機制
眉毛濃密與遺傳密切相關,但是相關研究卻比較少,來自中科院上海生命科學研究院(營養與健康研究院)計算生物學研究所汪的一組研究人員發表了題為Genome-wide Association Studies and CRISPR/Cas9-mediated Gene Editing Identify R
antiCRISPR沉默CRISPRCas9系統的分子機理
王艷麗課題組和加拿大多倫多大學Karen Maxwell課題組的合作論文“Inhibition of CRISPR-Cas9 ribonucleoprotein complex assembly by anti-CRISPR AcrIIC2”在《Nature Communications》雜志在
antiCRISPR沉默CRISPRCas9系統的分子機理
中國科學院生物物理研究所王艷麗課題組和加拿大多倫多大學Karen Maxwell課題組的合作論文Inhibition of CRISPR-Cas9 ribonucleoprotein complex assembly by anti-CRISPR AcrIIC2 在《自然-通訊》(Nature
基因工程前沿:CRISPRCas9或可擊敗瘧疾
瘧疾是經按蚊叮咬或輸入帶瘧原蟲者的血液而感染瘧原蟲所引起的蟲媒傳染病。寄生于人體的瘧原蟲共有四種,即間日瘧原蟲,三日瘧原蟲,惡性瘧原蟲和卵形瘧原蟲。在我國主要是間日瘧原蟲和惡性瘧原蟲;其他二種少見,近年偶見國外輸入的一些病例。 2017年10月27日,世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清
《Nature》子刊巧妙運用CRISPRCas9誘導遺傳傷疤
每一本生物學教材都指出,細胞是生命的基石。但是直到最近幾年,科學家們才開始了解細胞的多樣性。圖片來源于網絡 RNA測序等技術揭示單個細胞的基因表達,通過類似的表達譜,所有細胞得以被系統地排列。“無論什么時候,當我們用這類技術探索器官或有機體時,我們不僅看到了熟悉的細胞類型,而且總能發現未知和罕
CRISPRCas9蛋白提高基因編輯技術精準度
由香港城市大學(香港城大)和瑞典卡羅琳醫學院合組的一支研究團隊,最近成功研發出一種新的蛋白質,有助提高基因組編輯過程中定位的精準度,相信對未來要求高精準度的人類基因治療可發揮重要作用。 CRISPR-Cas9(成簇、規律、間隔、短回文的重複序列及其相關蛋白9)是一種具有廣泛應用前景的基因編輯技
CRISPRCas9技術及其在腫瘤研究中的應用
CRISPR的前世今生1987年,日本科學家在研究大腸桿菌的時候發現其基因組上存在一些看起來“奇怪”的重復結構:有一段29堿基的序列反復出現了5次,且兩兩之間被32個堿基形成的序列隔開了!但這個發現在當時并沒有引起科學界的很大關注,畢竟在自然界的生物體內,各種奇奇怪怪的發現實在太多。然后僅僅幾年后,
Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(三)
Fig. 4Structural rearrangement of the HNH domain. a, b HS-AFM images of the HNH domain in the high-height (a) and low-height (b) states. The mean ce
Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(四)
Fig. 6HS-AFM observations of the non-specific transient binding of Cas9–RNA. a Sequential HS-AFM images of Cas9–RNA molecules transiently bound to
揭示antiCRISPR沉默CRISPRCas9系統的分子機理
中國科學院生物物理研討所王艷麗課題組和加拿大多倫多大學Karen Maxwell課題組的協作論文Inhibition of CRISPR-Cas9 ribonucleoprotein complex assembly by anti-CRISPR AcrIIC2 在《自然-通訊》(Nature
JBC:新突破!成功利用CRISPRCas9靶向脂肪細胞
在一項新的研究中,Romanelli、MacDougald和他們的同事們描述了使用CRISPR-Cas9取得的新突破,這種工具已經改變了分子生物學研究,但它在脂肪組織研究中的應用一直難以捉摸。 脂肪對生命至關重要,但是過多的脂肪會導致一系列的健康問題。研究脂肪組織在體內的功能對于理解肥胖和其他
CRISPRCas9為突破工程化細胞活性掃除障礙
多數癌癥可被免疫系統識別并攻擊,但是因為腫瘤介導的免疫抑制和免疫逃逸機制而進展不一。輸注體外工程化T細胞,即T細胞過繼療法(adoptedT cell therapy),能增加患者的天然抗腫瘤免疫反應。基因療法重定向免疫特異性與基因編輯相結合具有改善療效并增加工程化T細胞安全性的潛力。CRISP
Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(一)
Real-space and real-time dynamics of CRISPR-Cas9 visualized by high-speed atomic force microscopyAbstractThe ?CRISPR-associated endonuclease Cas9 bind
遺傳界大牛Nature子刊發布CRISPRCas9新工具
來自哈佛醫學院的研究人員開發出了一種預測軟件,可以準確找出最有效的方法利用CRISPR-Cas9基因編輯技術來實現基因打靶。這項重要的研究成果發布在《自然方法》(Nature methods)雜志上。 領 導這一研究小組的是哈佛醫學院著名遺傳學教授、Wyss研究所的核心成員著名遺傳學Georg
Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(五)
Correlation analysis of HS-AFM images2D correlation coefficients were calculated between the HS-AFM images of the first frame and each of the fram
Realspace-and-realtime-dynamics-of-CRISPRCas9-visualized-by-...(二)
ResultsRNA-induced structural stabilization in Cas9We first observed apo-Cas9 and pre-assembled Cas9–RNA on a mica surface treated with 3-aminopro
應用慢病毒載體檢測CRISPRCAS9和TALEN脫靶
近日,國際生物學期刊nature biotechnology在線刊登了美國科學家的一項最新研究成果,他們應用整合酶缺陷的慢病毒載體(IDLV)檢測CRISPR-CAS9和TALEN對基因組造成的脫靶效應,最低可檢測1%的脫靶頻率。這項研究或對推廣CRISPR-CAS9和TALEN技術,保證基因操
數字PCR在CRISPRCas9基因編輯結果驗證的應用
?CRISPR-Cas9技術的發明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數字PCR進行確認。