關于細胞凋亡的mRNA檢測介紹
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas 蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們的表達水平比例決定了細胞是凋亡還是存活。一般多采用Northern雜交和RT-PCR走膠對它們進行檢測。隨著熒光定量PCR技術的發展,用定量PCR技術來檢測基因表達水平無疑比之前者更快更準確。Invitrogen公司的Amplifluor Apoptosis Gene Systems就根據這一新技術原理,通過檢測fas,bax-alpha 和 bcl-X (長的) 基因的 mRNA表達水平來進行細胞凋亡的檢測。......閱讀全文
簡述細胞凋亡的意義
細胞凋亡和細胞增殖都是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動態平衡的基本措施。在胚胎發育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過程。
關于細胞凋亡的簡介
人體內的細胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關細胞死亡過程的研究,已成為生物學、醫學研究的一個熱點。人們已經知道細胞的死亡起碼有兩種方式,即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式,而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。
細胞凋亡的觀察介紹
細胞凋亡的觀察介紹: 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體醫`學教育網搜集整理。
細胞凋亡的研究方法
Important notes:Morphological data so far are most reliable and convincing evidence for apoptosis, especially with electromicroscopyMorphological anal
staurosporine誘導的細胞凋亡
Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)強有力的抑制劑。通過阻斷磷酸二酯鍵從DNA轉移到活化的酪氨酸位點而直接抑制拓普異構酶II的活性。可用于誘導CHO細胞凋亡。實驗方法原理Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)強有力的抑制劑
細胞凋亡晚期檢測技術
??晚期檢測:? ? 細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200 bp 。對于這一現象的檢測通常有以下兩種方法:?? ??1.TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d
細胞凋亡的研究歷史
1. 凋亡概念的形成 1965年澳大利亞科學家發現,結扎鼠門靜脈后,電鏡觀察到肝實質組織中有一些散在的死亡細胞,這些細胞的溶酶體并未被破壞,顯然不同于細胞壞死。這些細胞體積收縮、染色質凝集,從其周圍的組織中脫落并被吞噬,機體無炎癥反應。1972年Kerr等三位科學家首次提出了細胞凋亡的概念,宣告了對
細胞凋亡的研究方法
Important notes: Morphological data so far are most reliable and convincing evidence for apoptosis, especially with electromicroscopy Morphologica
細胞凋亡的生理意義
細胞凋亡和細胞增殖都是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動態平衡的基本措施。在胚胎發育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過程。
細胞凋亡的的意義
細胞凋亡和細胞增殖都是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動態平衡的基本措施。在胚胎發育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過程。
細胞凋亡的mRNA檢測
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas?蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們
細胞凋亡的活化機制
Caspase的活化是有順序的多步水解的過程,Caspase分子各異,但是它們活化的過程相似。首先在caspase前體的N-端前肽和大亞基之間的特定位點被水解去除N-端前肽,然后再在大小亞基之間切割釋放大小亞基,由大亞基和小亞基組成異源二聚體,再由兩個二聚體形成有活性的四聚體。去除N-端前肽是Cas
細胞凋亡的mRNA檢測
研究者們發現了很多在細胞凋亡時表達異常的基因,檢測這些特異基因的表達水平也成為檢測細胞凋亡的一種常用方法。據報道,Fas?蛋白結合受體后能誘導癌細胞中的細胞毒性T細胞(cytotoxic T cells)等靶細胞。Bcl-2 和bcl-X (長) 作為抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的調節物,它們
細胞凋亡的研究歷史
1. 凋亡概念的形成 1965年澳大利亞科學家發現,結扎鼠門靜脈后,電鏡觀察到肝實質組織中有一些散在的死亡細胞,這些細胞的溶酶體并未被破壞,顯然不同于細胞壞死。這些細胞體積收縮、染色質凝集,從其周圍的組織中脫落并被吞噬,機體無炎癥反應。1972年Kerr等三位科學家首次提出了細胞凋亡的概念,宣告了對
細胞凋亡的效應機制
凋亡細胞的特征性表現,包括DNA裂解為200bp左右的片段,染色質濃縮,細胞膜活化,細胞皺縮,最后形成由細胞膜包裹的凋亡小體,然后,這些凋亡小體被其他細胞所吞噬,這一過程大約經歷30-60分鐘,Caspase引起上述細胞凋亡相關變化的全過程尚不完全清楚,但至少包括以下三種機制:凋亡抑制物正常活細胞因
細胞凋亡實驗操作細則
一、實驗目的: 1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事
細胞凋亡原理是什么
細胞凋亡是一種正常的基因程序性細胞死亡,其中老化細胞在其生命周期結束時收縮,其剩余片段被吞噬而沒有任何炎癥反應。1972 年,Kerr、Wyllie 和 Currie 在一篇論文中首次引入了細胞凋亡這一術語,以描述一種形態上不同的細胞死亡類型。它由一系列導致細胞形態變化或死亡的生化變化組成。它導致普
細胞凋亡檢測方法介紹
細胞凋亡是指細胞在生長到一定階段及某些生理過程中,會受到多因素和機制的嚴格調控而進入死亡。這是一個動態的過程,會涉及一系列復雜的生化反應, 是一個需要酶參與的級聯反應,同時也涉及不同基因的表達及調控、信號傳導。其中有幾項生理過程能被用來檢測凋亡的發生,因此多參數分析法對于準確檢測這一過程十分
ELISA法檢測細胞凋亡
(一)?原理細胞凋亡的發生,是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp~200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法,應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體,與核小體片段形成夾心結構,可特
staurosporine誘導的細胞凋亡
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)強有力的抑制劑。通過阻斷磷酸二酯鍵從DNA轉移到活化的酪氨酸位點而直接抑制拓普異構酶II的活性。可用于誘導CHO細胞凋亡。
細胞凋亡有什么意義
1、細胞凋亡在個體發育和組織穩態的維持中具有重要的作用:如蝌蚪尾巴退化涉及細胞凋亡。2、細胞凋亡也與許多疾病的發生和防治密切相關:多種病毒感染可引起細胞凋亡,細胞凋亡可有效地阻止病毒繁殖,但大量細胞凋亡可使機體嚴重致病。3、通過細胞增殖與細胞凋亡共同調節成體的組織器官穩態的維持。
細胞凋亡的染色觀察
細胞凋亡 1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。 3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整、
細胞凋亡的染色觀察
細胞凋亡1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整、破裂,臺
細胞凋亡的檢測方法
(一) 測原理細胞發生凋亡時,其細胞膜?的通透性也增加,但其程度介于正常細胞和壞死細胞之間。利用這一特點,被檢測細胞懸液用熒光素染色,利用流式細胞儀測量細胞懸液中熒光強度來區分正常細胞、壞死細胞和凋亡細胞。(二) 用價值流式細胞儀檢測有下列特點:(1)檢測的細胞數量大,因此其反映群體細胞的凋亡狀態比
細胞凋亡的早期檢測
1) PS(磷脂酰絲氨酸)在細胞外膜上的檢測:PS從細胞膜內側轉移到外側在細胞受到凋亡誘導后不久發生,可能作為免疫系統的識別標志。AnnexinV,一個鈣依賴性的磷脂結合蛋白,能專一性的結合暴露在膜外側的PS,再通過簡單的顯色或發光系統進行檢測。由于這是一種凋亡早期的活細胞檢測(懸浮細胞和貼壁細胞都
細胞凋亡的過程機理
細胞凋亡的過程大致可分為以下幾個階段:接受凋亡信號→凋亡調控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→進入連續反應過程啟動階段細胞凋亡的啟動是細胞在感受到相應的信號刺激后胞內一系列控制開關的開啟或關閉,不同的外界因素啟動凋亡的方式不同,所引起的信號轉導也不相同,客觀上說對細胞凋亡過程中信
細胞凋亡檢測方法簡介
細胞凋亡是指細胞在生長到一定階段及某些生理過程中,會受到多因素和機制的嚴格調控而進入死亡。這是一個動態的過程,會涉及一系列復雜的生化反應, 是一個需要酶參與的級聯反應,同時也涉及不同基因的表達及調控、信號傳導。其中有幾項生理過程能被用來檢測凋亡的發生,因此多參數分析法對于準確檢測這一過程十分
細胞凋亡的晚期檢測
晚期檢測細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200 bp 的DNA片段。對于這一現象的檢測通常有以下兩種方法:1)?TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
細胞凋亡的途徑分類
凋亡發生的途徑分為內源性線粒體途徑、內源性內質網途徑、外源性死亡受體途徑;或者某些條件下的granzyme B介導的凋亡過程。
ELISA法測細胞凋亡
細胞凋亡時,Ca2+,Mg2+離子依靠的內源性核酸內切酶將雙鏈DNA從各核小體間連接區裂斷,發生單或寡合苷酸小體,各核小體的DNA與核組蛋白H2A,H2B,H3,H4構成嚴密的復合物而對內源性核酸酶有抵抗使之不被內源性核酸酶裂解。主要運用單克隆抗DNA抗體和抗組蛋白抗體直接檢測DNA和組蛋白。愈加安