芪參健骨顆粒的制備工藝及急性毒性研究

制劑工藝是指應用質量源于設計QbD的理念來指導制劑處方、工藝開發程序，并以產品質量目標為開發導向，通過結合研究保證產品的安全性、有效性和質量可控性。制劑工藝外包是一些CRO公司提供的服務之一，有的醫藥公司會將創新藥API和制劑研發生產中的一部分業務或全部業務委托給CRO公司去做。芪參健骨顆粒是治療股骨頭壞死的中藥新藥，該藥開發具有較好的臨床基礎，為了保證該制劑的質量和臨床用藥安全性，需要對其進行制劑工藝和毒理學研究，以確定芪參健骨顆粒的最佳制劑工藝及其安全性。

在制劑工藝研究中，目前顆粒劑常用的制粒方法有：濕法制粒、干法制粒、流化床制粒、噴霧制粒、熔融法制粒等，濕法制粒技術應用最廣泛。干法制粒不加入任何液體，靠壓縮力的作用使粒子間產生結合力，干法制粒需要特殊的設備，在實際生產中只有少部分產品使用此法。流化床制粒技術、噴霧制粒、熔融法制粒在實驗室研究中應用不多。美迪西是一家綜合性的生物醫藥研發服務公司，提供制劑工藝外包服務，其特有的“定制化”工藝研發模式致力于為客戶提供快捷高效的服務，能夠讓客戶盡早得到API以便展開臨床研究。

1、芪參健骨顆粒的制備工藝

進行芪參健骨顆粒的制備工藝研究的目的是優選芪參健骨顆粒的制劑(成型)工藝，方法是以吸濕率、成型率、溶化性、休止角和制粒難易程度為評價指標，單因素試驗考察輔料的種類及用量、混合輔料的配比、潤濕劑濃度及用量的影響，并采用正交試驗法進一步優選制劑工藝條件。

結果發現芪參健骨顆粒最佳制粒工藝條件為:浸膏粉與輔料(糊精∶乳糖=2∶1)按4∶1的比例混合均勻，加1%甜菊素，以90%乙醇為潤濕劑，潤濕劑用量為輔料與浸膏總量的30%。最終得出優選的制劑工藝制備的成品顆粒流動性好,吸濕率、成型率、溶化性、休止角均符合要求，為芪參健骨顆粒制粒工藝條件的確定提供了科學的實驗依據。

2、芪參健骨顆粒的毒性研究

進行芪參健骨顆粒的小鼠急性毒性研究，選用SPF級ICR小鼠100只、雌雄各半，按體重隨機分成空白對照組、試藥1組、試藥2組、試藥3組和試藥4組，每組20只，雌雄各半。根據預實驗結果，以1．25倍間距設計給藥劑量，各試藥組小鼠分別灌胃給予劑量為256、320、400及500g生藥/kg芪參健骨中試流浸膏藥液，給藥前禁食不禁水12h，給藥后即刻觀察小鼠的反應情況，包括小鼠外觀、行為活動、精神狀態、食欲、大小便及其顏色、皮毛、鼻、眼、口有無異常分泌物和死亡情況，死亡動物及時尸檢，肉眼觀察有無病變臟器。并于給藥第1天每隔30min觀察1次，之后每天觀察1次，連續觀察14d，記錄動物毒性反應、體重變化及死亡分布情況。以體重變化、毒性反應及死亡情況，綜合評價實驗結果。

實驗結束，處死所有小鼠，剖檢作肉眼觀察，若肉眼觀察有病變臟器，以一般反應、體重、死亡綜合評價。以Bliss法分別計算藥物對雌雄小鼠的半數致死量（LD50）及95%的可信限、5%致死量（LD5）和95%的致死量（LD95）。

各試藥組小鼠分別灌胃給予不同劑量的芪參健骨中試流浸膏藥液后，出現自發活動、探究、梳理毛發、運動減少，豎毛、體涼、皮膚血於或蒼白、拉稀的現象，各藥物組均有小鼠死亡，解剖后肉眼觀察發現，大小腸有脹氣和充水，肺臟有一定的淤血。實現結束后，處死所有各組小鼠，解剖并肉眼觀察，未發現有病變臟器。結合急性毒性研究的試驗結果發現芪參健骨顆粒的臨床用藥劑量是安全的。