重組蛋白作為生物制藥在醫學中作用顯著,一般用轉基因動物的乳腺產生。重組蛋白真核表達包括酵母表達系統、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統、腺病毒表達系統等。一般可以正確折疊,包含各種修改。但是價格高,周期長。
重組蛋白真核表達系統技術平臺的特色
快速、highly-stringent篩選:只篩選到高表達穩定株;4~5個月獲得穩定高表達細胞株(常規方法要9~12個月)
高效表達:超強啟動子和超強分泌信號肽,很容易達到30p/c/d/以上(傳統方法需要用藥物篩選9~11輪以上才能達到)
穩定表達:表達質粒上的AGE穩定子,能夠抑制染色體gene silencing,保障細胞株的長時間穩定表達
用GS篩選:質粒上有谷氨酰胺合成酶(GS)基因,可以做為備選篩選標記,也可以直接用MSX加壓篩選,顯著提高重組蛋白的表達產率;
高產率:單克隆細胞株在普通搖瓶里的蛋白表達量已能達到1.5~2克/升
工藝放大優化潛力:經工藝放大優化(Process Development)后,蛋白產量可提高5-10倍以上。本表達系統可容易達到3~5克/升的蛋白的產量。較大地節約生產成本。
目前的表達系統各有利弊,但一般理想的表達系統滿足以下幾點:一是特異性,不受其他內源性因素影響,只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾,不干擾細胞通路。以及誘導劑的誘導性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。
因此,在選擇表達系統時,必須充分考慮各種因素,如蛋白質性質、實驗條件、生產成本、表達水平和安全性。權衡利弊后,選擇相應的表達系統。
美國梅奧診所團隊在新一期《臨床研究雜志》發表報告稱,癌細胞會借助一種名為TRAILshort的蛋白,巧妙關閉人體的免疫反應。這一突破有望催生全新的癌癥療法,或提升現有免疫療法的效力。約15年前,團隊在......
在人類中,活到百歲已是長壽,而在鯨類中,這個歲數還算“年輕”,因為該家族中的弓頭鯨有時能活200多年。但沒人知道弓頭鯨長壽的原因。一項10月29日發表于《自然》的研究發現,弓頭鯨能夠活數百年且不患癌癥......
美國加州大學舊金山分校科學家發現,大腦衰老背后隱藏著一種名為FTL1的關鍵蛋白。實驗顯示,過量FTL1蛋白會導致小鼠記憶力衰退、大腦神經連接減弱以及細胞反應遲鈍。一旦阻斷這種蛋白,老年小鼠就能恢復年輕......
中國科學院上海藥物研究所研究員羅成、周兵、陳奕和華東師范大學研究員陳示潔合作,提出“強支點占據-杠桿干擾”(FOLP)的蛋白-蛋白相互作用(PPI)先導化合物設計策略,為PPI領域研究提供新的概念和方......
水稻作為最重要的糧食作物,為超過半數的世界人口提供主食。然而,水稻黑條矮縮病毒(SRBSDV)等病毒嚴重危害水稻生長,威脅糧食生產安全,解析病毒—水稻互作的分子機制對水稻病毒病的防控具有重要意義。近日......
記者從安徽農業大學獲悉,該校王曉波教授團隊聯合中國農業科學院作物科學研究所邱麗娟、李英慧研究員團隊,解析了關鍵基因對大豆種子油脂和蛋白比例(油蛋比)的調控機制,為高油或高蛋白大豆品種選育提供了新方向。......
中國科學院院士施一公團隊解析了BAX線狀/環狀聚合物所共享的基本重復單元結構,解答了“死神”BAX究竟是如何讓細胞走上死亡命運的不歸路。6月27日,相關研究成果發表在《科學》。BAX多邊形結構。課題組......
澳大利亞沃爾特和伊麗莎霍爾醫學研究所團隊在對抗帕金森病的斗爭中取得重大突破:他們成功解開了一個長達數十年的謎團,確定了人類PINK1蛋白與線粒體結合的具體結構,為開發治療帕金森病的新藥開辟了新道路。這......
暨南大學生命科學技術學院教授鄒奕團隊在廣東省重點研發項目、廣東省自然科學基金等項目的資助下,研究發現轉甲狀腺激素蛋白或成術后認知功能障礙診斷新標志物,有望助力早期干預。近日,相關成果發表于《分子精神病......
過去幾年里,單細胞蛋白質組學技術取得了長足發展,單細胞蛋白質組學逐漸走向成熟,后續有望廣泛應用于腫瘤異質性分析、免疫學研究、發育生物學、神經科學以及精準醫學等領域。然而,從技術發展成熟到實際場景應用分......