鮭精擔體DNA制備實驗
實驗材料 鮭精DNA試劑、試劑盒 TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材 離心機搖床超聲儀實驗步驟 1. 將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后，用攪拌棒于4℃攪拌過夜，最終獲得一種均勻粘稠液體。 2. 將一個較大的超聲波探頭插入燒杯液體中，通過超聲波將DNA剪切至2~15 kb（平均7 kb ）大小的DNA片段。3. 用緩沖液平衡酚抽提，將經剪切的鮭精DNA溶液移50 ml 錐形管中，加入等體積緩沖液平衡酚，混勻后于3 000 g 離心5~10 min（或直到清晰地分相為止）。將含有DNA的上相轉移到一個干凈的試管中。4. 再用1：1 （v/v）緩沖液平衡酚/氯仿、氯仿分別抽提，然后將含DNA的上相轉移到一個適合髙速離心的離心管中。 5. 分別加入1/10體積的3 mol/l 乙酸鈉和2......閱讀全文
鮭精擔體DNA制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 鮭精DNA 試劑、試劑盒
鮭精擔體DNA制備實驗
利用這一方案可獲得剪切好的高質量鮭精擔體DNA，它可用于轉化實驗和其他需要高質量擔體DNA的實驗中。實驗材料鮭精DNA試劑、試劑盒TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材離心機搖床超聲儀實驗步驟1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后
鮭精擔體DNA制備實驗
實驗材料 鮭精DNA試劑、試劑盒 TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材 離心機搖床超聲儀實驗步驟 1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后，用攪拌棒于4℃攪拌過夜，最終獲得一種均勻粘稠液體。?2. ?將一個較大的超聲波探頭插入燒杯
酵母轉化實驗_單鏈高分子量的擔體DNA制備
實驗材料DNA試劑、試劑盒TE酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材超聲波發生器實驗步驟1. ?將DNA溶于pH8.0的1×TE緩沖液，終濃度為10 mg/ml。于4℃攪拌過夜。?2. ?用一個大的超聲探頭，在75%的滿功率下超聲處理DNA 30 s，以降低DNA溶液的粘度。取1 μg DNA在0.8%瓊脂糖凝
擔體介紹
擔體是一種多孔性化學惰性固體，在氣相色譜中用來支撐固定液。對擔體有如下幾點要求：１、表面積較大，一般應在0.5－2米/克之間；２、具有化學惰性和熱穩定性；３、有一定的機械強度，使涂漬和填充過程不引起粉碎；４、有適當的孔隙結構，利于兩相間快速傳質；５、能制成均勻的球狀顆粒，利于氣相滲透和填充均勻性好；
什么叫擔體？對擔體有哪些要求？
擔體是一種多孔性化學惰性固體，在氣相色譜中用來支撐固定液。對擔體有如下幾點要求：１、表面積較大，一般應在０、５－２米 ／克之間；２、具有化學惰性和熱穩定性；３、有一定的機械強度，使涂漬和填充過程不引起粉碎；４、有適當的孔隙結構，利于兩相間快速傳質；５、能制成均勻的球狀顆粒，利于氣相滲透和填充均勻性好
什么是氣相色譜的擔體擔體有何作用對擔體有何要求
擔體也稱作載體，它的作用是提供一個具有較大表面積的惰性表面，使固定液能在它的表面上形成一層均勻的液膜。由于載體結構和表面性質會直接影響柱的分離效果，因此在氣液色譜中，要求載體表面應是化學惰性的，即無吸附性、無催化性，且熱穩定性要好。為了能涂布更多的固定液又不增加液膜厚度，要求載體比表面積要大，孔
擔體的用途
高沖擊聚苯乙烯可用于制作電視機、收錄機的外殼和部件；冰箱內襯材料、空調設備、洗衣機、電話機、吸塵器、照明裝置和辦公用機械的零部件；電器、儀表、汽車零件和醫療設備零部件玩具、家具及日用生活制品和包裝材料等
擔體的分類
不同型號的擔體 （1）硅藻土型擔體：由天然硅藻土經煅燒而成，因含少量氧化鐵而呈粉紅色，故稱為紅色擔體，如201型、6201型、C 22保溫磚、Chromsorb P等；如果在煅燒前加少量碳酸鈉作助溶劑，煅燒后使氧化鐵生成無色的鐵硅酸鈉，則稱為白色擔體，如101型、102型、Celite 545
擔體的加工處理
一個理想的擔體的表面應該對組分和固定液都是惰性的，但硅藻土擔體由于在加工過程中加入了粘合劑或助熔劑，以及晶格的改變，使其表面含有相當數量的硅酸基團此外擔體表面的金屬氧化物形成酸堿活性作用點。使得擔體表面即有催化活性，又有吸附活性。特別是對化學性質活潑的樣品（如萜烯、二熔、含氮雜環化合物、氨基衍生
擔體分類和特點
? 通常分為硅藻土和非硅藻土兩大類，每一類又有種種小類。 1、硅藻土類型： （1）白色的：表面積小，疏松，質脆，吸附性能小，經適當處理，可分析強極性組分； （2）紅色的：有較大的表面積和較好的機械強度，但吸附性較大。 2、非硅藻土類型： （1）氟擔體：表面惰性好，可用來分析高極性和腐蝕性物
擔體的使用范圍
各種擔體，名目繁多。在常用硅藻土擔體中：紅色擔體（如6201、201），可用于非極性或弱極性物質的分離。白色擔體（如101）可用于極性物質或堿性物質。釉化紅色擔體（如301）可用于中等極性物質。硅烷化白色擔體可用于強極性氫鍵型物質如廢水測定。分離酸性物質，如酚類，要用酸洗處理的擔體。分離堿性物質
常用的擔體有哪些？
各種擔體,名目繁多。在常用硅藻土擔體中:紅色擔體(如6201、201),可用于非極性或弱極性物質的分離。白色擔體(如101)可用于極性物質或堿性物質。釉化紅色擔體(如301)可用于中等極性物質。硅烷化白色擔體可用于強極性氫鍵型物質如廢水測定。分離酸性物質,如酚類,要用酸洗處理的擔體。分離堿性物質,如
常用的擔體目數
常用的４－６毫米內徑的色譜柱：對于較長色譜柱，選用擔體目數一般為４０－８０目；對于較短色譜柱選用擔體目數一般為８０－１００目（每英寸內的篩孔數目為目）。
擔體的相關知識介紹
常用的擔體表面并非惰性，它具有不同程度的催化作用和吸附性（特別是固定液含量低時和分離極性物質時）造成峰拖尾和柱效下降，保留值改變等影響，因而需要預處理。現將一般處理方法簡述如下：1、酸洗法：用濃鹽酸加熱處理擔體20-30分鐘，然后用自來水沖洗至中性，再用甲醇漂洗，烘干備用。此法主要除去擔體表面的鐵等
擔體的分類及特點
通常分為硅藻土和非硅藻土兩大類，每一類又有種種小類。１、硅藻土類型：（１）白色的：表面積小，疏松，質脆，吸附性能小，經適當處理，可分析強極性組分；（２）紅色的：有較大的表面積和較好的機械強度，但吸附性較大。２、非硅藻土類型：（１）氟擔體：表面惰性好，可用來分析高極性和腐蝕性物質，但裝柱不易，柱效率低
擔體的性質要求
填充色譜柱用的擔體（載體）。是用于涂布液體固定相（固定液）的固體支持物。一般為化學惰性的，多孔性的固體顆粒。擔體的作用是提供一個大的惰性表面，用以承擔固定液，使固定液以薄膜狀態分布在其表面。對擔體的要求： （1）表面積大，孔徑分布均勻； （2）化學惰性好，其表面沒有吸附性或吸附性很弱，與被分
擔體的種類和特點
通常分為硅藻土和非硅藻土兩大類,每一類又有種種小類。1、硅藻土類型:(1)白色的:表面積小,疏松,質脆,吸附性能小,經適當處理,可分析強極性組分;(2)紅色的:有較大的表面積和較好的機械強度,但吸附性較大。2、非硅藻土類型:(1)氟擔體:表面惰性好,可用來分析高極性和腐蝕性物質,但裝柱不易,柱效率低
常用的擔體怎樣選擇？
各種擔體，名目繁多。在常用硅藻土擔體中：紅色擔體（如6201、201），可用于非極性或弱極性物質的分離。白色擔體（如101）可用于極性物質或堿性物質。釉化紅色擔體（如301）可用于中等極性物質。硅烷化白色擔體可用于強極性氫鍵型物質如廢水測定。分離酸性物質，如酚類，要用酸洗處理的擔體。分離堿性物質，如
質粒DNA大量制備實驗
實驗方法原理?這一方案科能是最常用的質粒制備方法，該法不僅相當決捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。實驗材料?大腸桿菌試劑、試劑盒?葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS異丙醇乙醇乙酸甲儀器、耗材?離心機漩渦混合器水浴鍋實驗步驟?1.? 往2 ml 燒瓶中加入500 ml ，含有適當抗生素的L
質粒DNA大量制備實驗
堿裂解法 平衡離心法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一方案科能是最常用的質粒制備方法，該法不僅相當決捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。
使用擔體處理原因和方法
?? 常用的擔體表面并非惰性，它具有不同程度的催化作用和吸附性（特別是固定液含量低時和分離極性物質時）造成峰拖尾和柱效下降，保留值改變等影響，因而需要預處理。現將一般處理方法簡述如下： 1、酸洗法：用濃鹽酸加熱處理擔體20－30分鐘，然后用自來水沖洗至中性，再用甲醇漂洗，烘干備用。此法主要除去擔體
哺乳動物中制備基因組DNA實驗——制備DNA
在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續的實驗打下基礎。一般真核細胞基因組DNA有107-9bp，可以從新鮮組織、培養細胞或低溫保存的組織細胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞，隨后用酚抽提而實現的。實驗材料動物組織試劑、
質粒DNA的大量制備實驗
實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制備也簡單易行，但得到的DNA比較粗制。高純度的質粒DNA可通過氯化銫/溴化乙錠平衡離心法或層析法進一步純化粗制DNA得到。實驗材料 培養基菌株試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇乙酸鉀異丙醇儀器、耗材 離心管實驗
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 細菌克隆試劑、試劑盒 LB培養基抗生素葡
制備DNA測序模板實驗
制備單鏈M13噬菌體DNA 小量裂解物中制備λ噬菌體DNA 雙脫氧測序的雙鏈質粒DNA的堿變性 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌
質粒DNA的小量制備實驗
堿裂解小量制備法 煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 培養基試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇VTE儀器、耗材 平板實驗步驟 1. ?接種一個單菌落于5 ml無菌LB培養液中，在37°C培養至飽和狀態（過夜）。2. ?取1.5 ml培養液以最大轉速離心20 S。棄上清。3. ?沉淀用10
質粒DNA的大量制備實驗
堿裂解法 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法 層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制
制備DNA測序模板實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 LBTEM13聚乙二醇容易讓頂層瓊脂乙酸鈉乙醇儀器、耗材 巴斯德吸管試管離心機實驗步驟 1. ?如果起始用M13復制型DNA或M13單鏈DNA，以0.5 ng 重組M13mp復制型DNA或5~10 ng 單鏈DNA轉化40 μl ?感受態大腸桿菌DH5αF'株