質粒DNA的大量制備實驗
堿裂解法 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法 層析法 實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制備也簡單易行，但得到的DNA比較粗制。高純度的質粒DNA可通過氯化銫/溴化乙錠平衡離心法或層析法進一步純化粗制DNA得到。 實驗材料 培養基 菌株 試劑、試劑盒 EDTA SDS 乙醇 乙酸鉀 異丙醇 ......閱讀全文
質粒DNA大量制備實驗
堿裂解法 平衡離心法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一方案科能是最常用的質粒制備方法，該法不僅相當決捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。
質粒DNA大量制備實驗
實驗方法原理?這一方案科能是最常用的質粒制備方法，該法不僅相當決捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。實驗材料?大腸桿菌試劑、試劑盒?葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS異丙醇乙醇乙酸甲儀器、耗材?離心機漩渦混合器水浴鍋實驗步驟?1.? 往2 ml 燒瓶中加入500 ml ，含有適當抗生素的L
質粒DNA的小量制備
實驗概要本方法用于從細菌中制備提純少量質粒DNA。主要試劑1. 溶液Ｉ 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris．Cl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0) 溶液Ｉ可成批配制，每瓶約100ml，在6.895×104Pa高壓下蒸氣滅菌15分鐘，貯存于4℃。2. 溶液Ⅱ 0.2
質粒DNA的大量制備
實驗概要本方法用于從細菌中提純大量質粒DNA。主要試劑1. STE 0.1mol/L NaCl 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L EDTA(pH8.0) 2. 溶液Ｉ 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(
質粒DNA的大量制備實驗
堿裂解法 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法 層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制
質粒DNA的小量制備實驗
堿裂解小量制備法 煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
質粒DNA的大量制備實驗
實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制備也簡單易行，但得到的DNA比較粗制。高純度的質粒DNA可通過氯化銫/溴化乙錠平衡離心法或層析法進一步純化粗制DNA得到。實驗材料 培養基菌株試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇乙酸鉀異丙醇儀器、耗材 離心管實驗
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 培養基試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇VTE儀器、耗材 平板實驗步驟 1. ?接種一個單菌落于5 ml無菌LB培養液中，在37°C培養至飽和狀態（過夜）。2. ?取1.5 ml培養液以最大轉速離心20 S。棄上清。3. ?沉淀用10
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 細菌克隆試劑、試劑盒 LB培養基抗生素葡
細菌質粒－DNA－的小量制備
實驗方法原理 由于大腸桿菌染色體 DNA 比通常用作載體的質粒 DNA 分子大得多，因此在提取過程中，染色體 DNA 易斷裂成線型 DNA 分子，而大多數質粒 DNA 則是共價閉環型，根據這一差異便可以設計出各種分離、提純質粒 DNA 的方法。堿裂解法就是基于線型的大分子染色體 DNA 與小
質粒DNA的小量制備實驗——
實驗采用國產的質粒小量抽提試劑盒。它是一種新型的離子交換柱，在特定的條件下，使質粒能在離心過柱的瞬間，結合到質粒純化柱上，在一定條件下又能將質粒充分洗脫，從而實現質粒的快速純化。實驗材料DNA試劑、試劑盒LB培養基卵清溶菌酶異丙醇TE儀器、耗材離心機漩渦混合器水浴鍋實驗步驟一、實驗步驟1. ?接種一
質粒DNA的制備和純化
實驗概要質粒（plasmid）是一種染色體外的穩定遺傳因子，大小從1~200kb不等，為雙鏈、閉環的DNA分子，并以超螺旋狀態存在于宿主細胞中。質粒主要發現于細菌、放線菌和真菌細胞中，它具有自主復制和轉錄能力，能在子代細胞中保持恒定的拷貝數，并表達所攜帶的遺傳信息。質粒在細胞內的復制一般有兩種類型：
小量制備質粒DNA(強堿法)
實驗概要本文介紹了強堿法小量制備質粒DNA的原理及操作流程。有助于了解基因工程操作中運載基因的載體，掌握最常用的提取質粒DNA的方法。實驗原理堿變性抽提質粒DNA是基于染色體DNA的變性與復性的差異而達到分離的目的。利用溶菌酶、強堿(NaOH)及表面活性劑(SDS)使細胞破壁、膜，釋放出胞內染色體D
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法小量制備質粒DNA
這個方法 [ 根據 Holmes 和 Quigley 的方法（1981) 修訂而成 ] 是將細菌懸浮于含有 Triton X-100 和能消化細胞壁的溶菌酶的緩沖液中，然后加熱到 100℃ 使其裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法大量制備質粒DNA
實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處理可從大量（500 ml ) 細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心可進一步純化。試劑、試劑盒抗生素乙醇異丙醇乙酸鈉STETTE溶菌酶儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液沸水浴實驗步驟一
細菌質粒－DNA－的小量制備實驗
細菌質粒的發現是微生物學對現代分子生物學發展的重要貢獻之一。特別是自 70 年代末以來，根據質粒分子生物學特性而構建的一系列克隆和表達載體更是現代分子生物學發展、改良生物品種和獲得基因工程產品不可缺少的分子載體，發展十分迅速，而質粒的分離和提取則是最常用和最基本的實驗技術，其方法很多。僅大腸桿菌質粒
牙簽法小量制備質粒DNA實驗
用牙簽從瓊脂培養基上挑取的菌落可直接用于制備質粒 DNA。所得的閉合環狀 DNA 往往雜質太多，不能作為大多數限制酶的底物。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理用牙簽從瓊脂培養基上挑取的菌落可直接用于制備質粒 DNA。所得的閉合環狀 DNA 往往雜質太多，不能作為大多數限制酶
牙簽法小量制備質粒DNA實驗
實驗方法原理 用牙簽從瓊脂培養基上挑取的菌落可直接用于制備質粒 DNA。所得的閉合環狀 DNA 往往雜質太多，不能作為大多數限制酶的底物。試劑、試劑盒 抗生素溴酚藍溶液EDTA溴化乙錠NSS 溶液KCl瓊脂糖凝膠儀器、耗材 LB、YT 或 SOB熱循環儀木質牙簽實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液(
牙簽法小量制備質粒DNA實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用牙簽從瓊脂培養基上挑取的菌落可直接用于制備質粒 DNA。所得的閉合環狀 DNA 往往雜質太多，不能作為大多數限制酶的底物。 試劑、試劑盒
質粒DNA的小量制備實驗——煮沸小量制備法
實驗方法原理當菌體在NaOH和?SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。推薦采用本方案從1-24個菌落培養液中制備少量的質粒DNA，盡管該方案十分快捷，但制備的DNA的
SDS堿裂解法制備質粒DNA——大量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從大規模（500 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液(1) 堿
SDS堿裂解法制備質粒DNA——中量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從中度規模（20~50 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的 DNA 產物可用于電泳分析或限制性內切核酸酶消化，經柱層析進一步純化之后，還可用于轉染哺乳動物細胞。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培
SDS堿裂解法制備質粒DNA——小量制備
用堿和 SDS 處理可以從細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可以用電泳或限制性核酸內切酶消化的方法鑒定；經聚乙二醇處理進一步純化后，其可以用做 DNA 測序反應的模板。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從小量 ( 1~2 ml）細菌培養物中
SDS堿裂解法制備質粒DNA
實驗方法原理 用堿和 SDS 處理可以從小量 ( 1~2 ml）細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可以用電泳或限制性核酸內切酶消化的方法鑒定；經聚乙二醇處理進一步純化后，其可以用做 DNA 測序反應的模板。試劑、試劑盒 堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材 LB、YT 或 Terr
質粒DNA大量制備實驗——平衡離心法
實驗方法原理這種方法可以得到除去了大多數雜質的高純度質粒DNA。但它需要使用溴化乙錠，并且需要長時間的超速離心來形成密度梯度。?實驗材料DNA試劑、試劑盒TE氯化銫溴化乙錠NaCl乙醇儀器、耗材離心機平衡住實驗步驟1. ?粗裂解物制備方案最后一步得到的沉淀溶于4 ml TE緩沖液中，加入4.4 g
質粒DNA大量制備實驗——堿裂解法
用堿和SDS處理可以大規模的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl- 溴化乙錠梯度離心進一步純化。了解質粒的特性及其在分子生物學研究中的作用；掌握質粒DNA分離和純化的原理；學習堿裂解法和煮沸法分離質粒DNA的方法。實驗方法原理這一方案科能是最常用的質粒制備方法，該法不僅相
SDS堿裂解法制備質粒DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用堿和 SDS 處理可以從小量 ( 1~2 ml）細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可以用電泳或限制性核酸內切酶消化的方法鑒定；經聚乙二醇處理進一步純化后，其可以用做 DNA 測序反應的模板。
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗方法原理用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗步驟材料：緩
質粒DNA的小量制備實驗——堿裂解小量制備法
實驗采用國產的質粒小量抽提試劑盒。它是一種新型的離子交換柱，在特定的條件下，使質粒能在離心過柱的瞬間，結合到質粒純化柱上，在一定條件下又能將質粒充分洗脫，從而實現質粒的快速純化。實驗材料DNA試劑、試劑盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇儀器、耗材離心機漩渦混合器分光光度計實驗步驟1
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化 實驗步驟