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  • 甲醛洋菜膠體電泳實驗

    甲醛洋菜膠體電泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一種常用的RNA 變性劑。用于(1)RNA的分離測定(2)RNA提純。實驗方法原理rRNA 占細胞RNA總量的80~85%,以ethidium bromide 染色后,呈現于膠體上的兩個主要RNA色帶應該分別是large 與small rRNAs (真核生物為28S 與18S,原核生物為23S 與16S);散布于small rRNA 附近,呈淡淡smear 的就是mRNAs,這是因為mRNAs 存在量不多,而且長度不一的緣故。長度較短的5S rRNA 及tRNA 等則在膠體下方也以特定色帶呈現。實驗材料RNA樣品試劑、試劑盒formaldehyde gel running bufferFormaldehyde gel loading buffer Ethidium bromide DEPC儀器、耗材恒溫......閱讀全文

    免疫電泳實驗_電泳

    試劑、試劑盒Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟電泳時溫度可控制在 10~15℃,同前述電泳的方法一樣,先在冷卻板上鋪一層煤油,再鋪膠。電極芯與凝膠的邊緣接觸 5~10 mm,并保持平行,電泳時的電場強度約為 20 V/cm。

    制備電泳實驗——連續電泳

    儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖電泳實驗步驟1. 連續洗脫電泳使用連續洗脫的聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖電泳能制備微克到毫克級的多肽,蛋白或核酸。裝置可以是各種各樣的。有的是把樣品直接加在固體凝膠的表面,分子經過電泳分離后,由流動的緩沖液洗脫,純化后的分子被濃縮,并由蠕動泵和部分收集器收集。2. 連

    制備電泳實驗

    洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品

    制備電泳實驗

    實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后,再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品,繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗

    火箭電泳實驗

    實驗方法原理在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。實驗材料待檢血清試劑、試劑盒巴比妥緩沖液瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀實驗步驟1. ?抗體瓊脂板的

    核酸電泳實驗

    瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶EB(德元國際Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外

    火箭電泳實驗

    實驗方法原理 在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。實驗材料 待檢血清試劑、試劑盒 巴比妥緩沖液瓊脂粉儀器、耗材 微量進樣器打孔器玻璃板電泳儀實驗步驟 1. ?抗

    火箭電泳實驗

    火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。一、材料1. 診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清。2. 待檢血清(抗原)

    免疫電泳實驗_免疫電泳

    實驗材料待檢抗原試劑、試劑盒抗體瓊脂巴比妥緩沖液儀器、耗材電泳儀載物玻片打孔器玻璃鑄型微量進樣器實驗步驟1. ?取載物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%瓊脂凝膠,制成2毫米厚的瓊脂板。2. ?按圖位置,在瓊脂板未凝固時,放入抗血清槽鑄型,注意勿使鑄型全部浸入瓊脂中,待凝固時再打孔。3.

    交叉電泳實驗技術

    (一)原理 ??? 交叉免疫電泳是把瓊脂平板電泳和火箭電泳結合起來的一種方法。先將抗原樣品在瓊脂凝膠中進行電泳分離,然后使已分開的各抗原成分與原泳動方向呈90度角的方向泳向含抗體的瓊脂凝膠中,于是該抗原樣品中的各個抗原成分和它相對應的抗體依次形成若干錐形沉淀線,根據沉淀線的位置及面積(或高度)可

    腦脊液蛋白電泳實驗

    1、原理 與血清蛋白電泳相同,利用各種蛋白質在電場作用下遷移率不同來進行檢測。由于CSF蛋白質含量較低,電泳前須進行濃縮處理。一般采用透析法濃縮,將CSF加入透析袋內,置于吸水的透析液中,CSF中的水分移至透析液內,CSF的蛋白質濃度增加后,再進行電泳分析醫`學教育網搜集整理。 2、試劑與器材

    免疫電泳實驗

    溶液的準備 倒膠 打孔與加樣 電泳 檢測 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Tris-巴比妥緩沖液

    免疫電泳實驗

    試劑、試劑盒 Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液實驗步驟 1. Tris-巴比妥緩沖液貯液2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸鈣,0.065 g 疊氮鈉,用雙蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。2. 電極緩沖液用雙蒸水稀釋 4 倍。3. 1%

    交叉電泳實驗技術

    (一)原理????? 交叉免疫電泳是把瓊脂平板電泳和火箭電泳結合起來的一種方法。先將抗原樣品在瓊脂凝膠中進行電泳分離,然后使已分開的各抗原成分與原泳動方向呈90度角的方向泳向含抗體的瓊脂凝膠中,于是該抗原樣品中的各個抗原成分和它相對應的抗體依次形成若干錐形沉淀線,根據沉淀線的位置及面積(或高度)可確

    免疫電泳實驗

    實驗方法原理免疫電泳的基本原理是將電泳和瓊脂免疫擴散結合起來應用,即先將蛋白質抗原在瓊脂內進行電泳,使分離成不同的電泳區帶,然后在一定距離的抗體槽內加入抗血清,使進行免疫擴散沉淀反應,這樣,每一電泳區帶又可能產生一個以上的沉淀線條。因而此法克服了單純瓊脂擴散方法中的沉淀線重疊成束,不易鑒別的缺點,大

    免疫電泳實驗

    實驗方法原理 免疫電泳的基本原理是將電泳和瓊脂免疫擴散結合起來應用,即先將蛋白質抗原在瓊脂內進行電泳,使分離成不同的電泳區帶,然后在一定距離的抗體槽內加入抗血清,使進行免疫擴散沉淀反應,這樣,每一電泳區帶又可能產生一個以上的沉淀線條。因而此法克服了單純瓊脂擴散方法中的沉淀線重疊成束,不易鑒別的缺點,

    凝膠電泳實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺儲存液 過硫酸銨 乙醇 上樣(終止)緩沖液 甲酰胺 EDTA 溴酚藍 二

    凝膠電泳實驗

    在優化實驗條件時,應該同時用含有甘油和不含甘油的凝膠分離PCR產物,并對放射性自顯影的結果進行比較。利用這兩種凝膠分析同一種樣品的預實驗結果可以在24h之內獲得。一旦實驗條件確定下來,特定實驗所優選的凝膠類型就可以應用到該基因座的所有樣品的分析中。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康

    凝膠電泳實驗

    試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺儲存液過硫酸銨乙醇上樣(終止)緩沖液甲酰胺EDTA溴酚藍二甲苯腈酶和酶緩沖液PCR 產物(放射性)凝膠培養基儀器、耗材 ZapCap 過濾器108 孔深井式梳子色譜紙上樣器丙烯酸防護板膠片暗盒凝膠印跡膜蓋革計數器凝膠干燥系統膠片S2 型測序儀石蠟封口膜移液管剃須刀片

    雙向電泳實驗

    試劑、試劑盒 尿素去污劑儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠實驗步驟 一、第一向1. 等電聚焦凝膠的準備雙向電泳通常用聚丙烯酰胺凝膠作介質,但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非離子或兩性離子去污劑。為了增加樣品的可溶性,可加 0.5% CHAPS。在第一向電泳中,最重要的是用載體兩性電解

    制備電泳實驗——洗脫

    蛋白質的分離純化是研究其結構、特性和功能的基礎,諸如一級結構、溶液構象、晶體結構、免疫功能和生物機理等研究都必須用一定量并具有活性的純樣品作為研究材料。本實驗來源「蛋白質電泳實驗技術」主編:郭堯君。實驗方法原理嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品

    雙向電泳實驗

    ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電

    制備電泳實驗——等電聚焦制備電泳

    實驗方法原理等電聚焦制備電泳是一種非變性制備技術。由于等電聚焦電泳技術的特點,因而是一種理想的制備方法。試劑、試劑盒電極液兩性電解質Ultrodex實驗步驟一、液體介質垂直柱狀蔗糖密度梯度等電聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制備和分析目的的等電聚焦方法。載體兩性電解質在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

    免疫電泳實驗_檢測

    檢測 試劑、試劑盒 Tris-巴比妥緩沖液貯液電極緩沖液瓊脂糖溶液 實驗步驟 如用考馬斯亮藍染色,先用生理鹽水洗去沒有反應的蛋白。為了加速染色步驟,將凝膠壓干。(將凝膠放在玻璃板上,先用蒸餾水濕潤。在小孔中注入雙蒸水,以防止凝膠壓扁時,小孔中的空氣使凝膠破裂。用一張濕濾紙和

    微量免疫電泳實驗

    實驗方法原理免疫電泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白質電泳分離技術(瓊脂電泳)和免疫學檢測技術(雙向擴散)結合起來的檢測法。此法在微量的基礎上具有分辨率高,靈敏度高, 時間短等優點, 是很理想的分離和鑒定蛋白質混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測定。在臨床診斷方面也有

    微量免疫電泳實驗

    實驗方法原理 免疫電泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白質電泳分離技術(瓊脂電泳)和免疫學檢測技術(雙向擴散)結合起來的檢測法。此法在微量的基礎上具有分辨率高,靈敏度高, 時間短等優點, 是很理想的分離和鑒定蛋白質混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測定。在臨

    RNA電泳實驗方法

    Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)for use withRibonuclease Protection Assay (RPA):1. Making the Gel:? 5% Denaturing gel for Ribonuclease Protec

    電泳遷移實驗-EMSA

    1、核蛋白的提取①用 細 胞 刮子刮取RAW264.7細胞與VSMC,移入2.5mlEP?管中。②將細胞用冰冷PBS洗兩遍,于4℃,?5000g離心3min,沉淀細胞。③加5倍細胞體積的冰浴緩沖液A洗細胞一次,于4℃,5000g離心3 min沉淀細胞.④加3倍細胞體積的冰浴緩沖液A懸浮細胞,冰上放置

    電泳遷移實驗-EMSA

    核蛋白的提取①用細胞刮子刮取RAW264.7 細胞與VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②將細胞用冰冷PBS 洗兩遍,于4 ℃ , 5000g 離心3min ,沉淀細胞。③加5 倍細胞體積的冰浴緩沖液A 洗細胞一次,于4 ℃ ,5000g 離心3 min 沉淀細胞. ④加3 倍細胞體積的冰

    電泳遷移實驗-EMSA

    核蛋白的提取 ①用細胞刮子刮取RAW264.7 細胞與VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②將細胞用冰冷PBS 洗兩遍,于4 ℃ , 5000g 離心3min ,沉淀細胞。③加5 倍細胞體積的冰浴緩沖液A 洗細胞一次,于4 ℃ ,5000g 離心3 min 沉淀細胞. ④加3 倍細胞體積的冰

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