新穎的融合蛋白表達系統
研究者們在分離到某一基因后，要對其編碼蛋白質進行研究最理所當然的工作就是表達——即：有目的性地合成外源基因產物。在重組DNA技術的發展早期，人們認為在基因的前面有一個強啟動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨后，認識到獲得有效的翻譯所需的條件要復雜得多，除了要有強啟動子和起始密碼子外，良好的表達尚需編碼目的蛋白的mRNA中含有核糖體結合位點，表達水平受密碼子喜好程度的影響，也受編碼序列中其他目前尚未明了的因素影響。通過改變起始密碼子前端的序列，或者在不改變蛋白質序列的條件下利用密碼子的簡并性改變5’末端編碼序列往往有助于解決問題。 通常，兩個基因之間的融合表達能更快地解決這些問題。在這種方式中，目的基因被引入某個高表達蛋白序列（fusion tag）的3’末端，比如大腸桿菌的一段序列，或者任一可在大腸桿菌中高度表達的基因，它提供良好表達所必需的信號，而表達出的融合......閱讀全文
新穎的融合蛋白表達系統
?研究者們在分離到某一基因后，要對其編碼蛋白質進行研究最理所當然的工作就是表達——即：有目的性地合成外源基因產物。在重組DNA技術的發展早期，人們認為在基因的前面有一個強啟動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨后，認識到獲得有效的翻譯所需的條件要復雜得多，除了要有強啟動子和起始密碼
桿狀病毒表達系統用于表達融合型蛋白的轉染質粒
是一類早期構建的轉染質粒，它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每個載體中，多角體蛋白基因啟動子下游ATG啟始密碼后含有一個單一的BamHⅠ酶切位點，當外源基因和多角體基因的讀碼框架正確時，就可以獲得含1個或幾個多角體蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。
桿狀病毒表達系統用于表達多個非融合蛋白的轉染載體
這種載體的主要特征是含有2個或2個以上相同的啟動子，可表達2條或2條以上多肽鏈的蛋白。 如Emery和Bishop[8]等構建的pAcVC2轉染質粒，含有兩個方向相反的多角體基因啟動子。重組病毒可同時表達多角體蛋白和淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV） N蛋白。Takehara[9]等構
桿狀病毒表達系統用于表達單一非融合蛋白的轉染質粒
由于外加的多角體蛋白或其它的氨基酸可能對外源蛋白的生物活性或細胞定位產生影響，所以用于表達非融合型蛋白的轉移載體被廣泛應用。幾種不同的策略被用于設計高水平表達非融合蛋白的轉移載體： (1)如pAcRP[5]系列等，都在多角體基因啟動子啟始密碼ATG上游引入一個單一的限制性多克隆位點； (2)
有關融合蛋白表達載體的克隆
在構建融含蛋白表達載體時除了要注意插入片段的方向、讀碼框架與載體保持一致外，注意以下問題可能會減少一些不必要的麻煩，當外源片的插入載體起始密碼的后面，另一個基因的前面時，注意檢查插入后基因的兩端是否引入了新的終止密碼，特別是用到Klenow mung bean 核酸酶，T4 Polymerase
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM融合標簽表達系統純化－重組蛋白
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合標簽表達系統純化無標簽的重組蛋白 親和標簽已成為后基因組學時代純化重組蛋白常用手段。此方法無需了解蛋白質的生化特性或生理活性，就可通過帶標簽的重組融合蛋白選擇性地與層析基質上的配體結合，從而得以純化任何蛋白質。此方法與常規的層析方
GST融合蛋白純化——篩選表達株
Purification of GST fusion proteins in?E.coli?GSTSugden lab,McArdle Laboratory for?Cancer Research?,University of Wisconsin-Madison Medical SchoolScre
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
實驗材料 融合蛋白試劑、試劑盒 氨芐青霉素甘油色氨酸儀器、耗材 電泳儀培養箱搖床試管實驗步驟 1. ?將編碼目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS質粒上的trxA基因3‘末端，構建符合讀框的融合基因，或者于pALtrxA-781的單一Rsr 2位點上插入短肽編碼序列。2. ?用含
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒氨芐青霉素甘油色氨酸儀器、耗材電泳儀培養箱搖床試管實驗步驟1. ?將編碼目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS質粒上的trxA基因3‘末端，構建符合讀框的融合基因，或者于pALtrxA-781的單一Rsr 2位點上插入短肽編碼序列。2. ?用含有重組硫
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒
揭秘：綿羊精卵融合的關鍵蛋白表達規律
近日，中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所肉羊遺傳育種科技創新團隊揭示了綿羊精卵融合關鍵蛋白表達規律，為進一步研究相關基因調控機制奠定了理論基礎。相關研究成果發表在《畜牧與生物技術雜志（Journal of Animal Science and Biotechnology）》上。 據儲明星研究員介
LSCM綠色熒光融合蛋白表達載體的構建
綠色熒光融合蛋白表達載體的構建?綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP)?及其突變體能在各種不同的生物系統中表達，這對細胞生物學的研究具有重要意義。而熒光蛋白的折疊能力及其同細胞內蛋白的融合能力，使研究?者能直接在細胞體內觀察到蛋白質的特性。研究者不需要把蛋白質經過
亞細胞定位的GFP融合蛋白表達法
GFP是綠色熒光蛋白，在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發出綠色熒光，從而可以精確地定位蛋白質的位置。綠色螢光蛋白（GFP）是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質，從藍光到紫外線都能使其激發，發出綠色熒光。通過基因工程技術，綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉進不同物種的基因組，在后代中持續表達，并且能根
無細胞表達系統——難度蛋白表達的福音
1964年有兩個人開創了體外蛋白表達的先河，這兩個人的名字大家必定不會陌生—馬太和尼倫伯格。因為他們的創新思維讓人類破譯了編碼氨基酸的64種翻譯密碼子。從此，體外蛋白表達開始為科學界所關注，不過彼時這個系統蛋白表達量低、持續時間短、穩定性差，使其未能得到進一步發展。 到80年代中期Sp
無細胞表達系統——難度蛋白表達的福音
1964年有兩個人開創了體外蛋白表達的先河，這兩個人的名字大家必定不會陌生—馬太和尼倫伯格。因為他們的創新思維讓人類破譯了編碼氨基酸的64種翻譯密碼子。從此，體外蛋白表達開始為科學界所關注，不過彼時這個系統蛋白表達量低、持續時間短、穩定性差，使其未能得到進一步發展。到80年代中期Spirin等對其進
重組蛋白表達系統
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用。在這里，我
重組蛋白表達系統
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。 目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用
重組蛋白表達系統
選擇合適的蛋白表達系統是重組蛋白成功表達的關鍵。需要考慮以下方面的因素，包括：目標蛋白性質、用途、蛋白質產量和成本。此外，許多蛋白質表達項目也存在著風險，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻譯后修飾的蛋白質。 目前卡梅德生物可以提供幾種表達系統可供客戶選擇，不同的系統有不同的特性和應用
LacZ和trpE融合蛋白的表達及純化實驗
實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒 氨芐青霉素IAAIPTGPBS鹽酸胍Tris·Cl 儀器、耗材 超聲波發生器透析袋轉子離心機 實驗步驟 利用pUR載體表達lacZ融合蛋白： ? 1a. ?按正確的讀框將目的基因亞克隆入pUR載體中，轉化大腸桿菌感
LacZ和trpE融合蛋白的表達及純化實驗
基本方法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
LacZ和trpE融合蛋白的表達及純化實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 氨芐青霉素IAAIPTGPBS鹽酸胍Tris·Cl儀器、耗材 超聲波發生器透析袋轉子離心機實驗步驟 利用pUR載體表達lacZ融合蛋白：?1a. ?按正確的讀框將目的基因亞克隆入pUR載體中，轉化大腸桿菌感受態細胞，在LB/氨芐青霉素平皿上挑選轉化子。2a. ?接種含
融合基因的表達物
融合基因的表達產物為融合蛋白。
關于蛋白表達系統的基本介紹
蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系。通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。一般由以下幾個部分組成： 1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同，適合表達蛋白的種類也不相同。 2、載體。載體的種類與宿主相匹配。根
myTXTL?－體外蛋白表達系統的特點
體外蛋白表達系統 Arbor Biosciences是基于大腸桿菌的體外蛋白表達系統：myTXTL無細胞體外蛋白表達系統(Arbor Biosciences中國代理)? 在大腸桿菌蛋白表達實驗中，我們經常會遇到蛋白表達不出來、表達出的蛋白沒有活性、蛋白表達過程中容易形成包涵體等情況，還要分析出現這
無細胞蛋白表達系統的選擇
圖1.? 與細胞內蛋白表達相比，無細胞蛋白表達系統能夠顯著地節約時間。 與基于細胞的蛋白表達系統相比較，無細胞蛋白表達系統具有獨特的優勢，包括節約時間、提高具有功能的、可溶的、全長蛋白的總體產量。本文介紹了根據模板類型、期望產率以及下游實驗等因素來選擇無細胞蛋白表達系統的標準。
重組蛋白真核表達系統與原核表達系統的區別
重組蛋白真核表達采用原核表達系統進行研究，主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉化到細菌中，通過IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優點是可以在短時間內獲得基因表達產物，所需成本相對較低。? 目前的表達系統各有利弊，但一般理想的表達系統滿足以下幾點：一是特異性，不受其他內源性因素
BIORAD－采用－Profinity－eXactTM融合標簽表達系統純化無標簽...
BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合標簽表達系統純化無標簽的重組蛋白親和標簽已成為后基因組學時代純化重組蛋白常用手段。此方法無需了解蛋白質的生化特性或生理活性，就可通過帶標簽的重組融合蛋白選擇性地與層析基質上的配體結合，從而得以純化任何蛋白質。此方法與常規的層析方法不同之處在于
GST融合蛋白（GST－fusion－protein－purification）的表達與純化
原理GST 純化系統是利用GST （glutathione-S-transferase ）融合蛋白與固定的谷胱甘肽（GSH）通過硫鍵共價親和，通過GSH交換洗脫的原理來進行純化 。1ml樹脂大約可結合5-8 mg融合蛋白，并可反復使用數次。試劑u IPTG（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷） 2
桿狀病毒表達系統的影響蛋白質表達的因素
在桿狀病毒系統中，要獲得蛋白質的有效表達，首先要選擇合適的轉染載體。依據表達的蛋白質屬融合型或非融合型，選擇單啟動子型或多啟動子型。另外目的基因的選擇要注意以下因素：①該目的基因應不含內含子；②去除其mRNA 5′端非編碼區的異源序列；③翻譯啟始密碼子AUG應處于適當的序列之間（如Kozak 序列）
谷胱甘肽S轉移酶融合蛋白的表達及純化實驗
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒氨芐青霉素LBPBSSDS甘油谷胱甘肽儀器、耗材離心機搖床轉子超聲波發生器實驗步驟1. ?按正確讀框將DNA片段亞克隆入合適的pGEX載體中，轉化大腸桿菌感受態細胞， 在LB/氨芐青霉素平皿上篩選轉化子，以不插入外源DNA的自連載體作對照，平皿置37℃孵育12~15 h。