鈣調蛋白的溴化氰裂解實驗
試劑、試劑盒 甲酸純的鈣調蛋白 溴化氰乙腈實驗步驟 材料甲酸(市售最髙級(如AldrichChemicalCo.,Inc.)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶體)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Baker)操作程序本操作程序是根據Gross和Witkop(1962)的文獻修改而成的。1)用水稀釋甲酸至終濃度為70%(w/v)。對于>99% 的甲酸,用 2.1 ml 甲酸和 0.9 ml 水。對于 88% 的甲酸, 用 2.lml 甲酸和 0.54 ml 水。2) 將鈣調蛋白溶于 70% 甲酸溶液,終濃度1mg/ml, 置冰上。3) 稱重 1.5-ml 具蓋聚丙烯離心管。戴手套,于通風櫥中,打開 CNBr 瓶,將一小粒晶體移至預稱重的離心管中。蓋好離心管和 CNBr 瓶。稱重裝有 CNBr 的離心管,減去離心管重,算出......閱讀全文
鈣調蛋白基本介紹
Ebashi 等在 1965 年報道了細胞中存在介導鈣信號的鈣結合蛋白,隨后 Cheung 將這一類能結合鈣離子的磷酸二酯酶(PDE)激活蛋白命名為“鈣調蛋白”(calmodulin,簡稱 CaM)。 [4] 鈣調蛋白是一種廣泛存在于真核細胞中,進化上高度保守的一類鈣離子受體蛋白。鈣調蛋白是由
鈣調蛋白的定義
鈣調蛋白(calmodulin, CaM)又稱鈣調素,是一種普遍存在于各種真核細胞內,并能與鈣離子結合的多功能蛋白質。? 鈣調蛋白參與細胞內多種信號轉導途徑,并在Ca2+依賴性信號轉導途徑中起到關鍵作用,是動態Ca2+傳感器,能夠響應廣泛的Ca2+濃度,并向下游傳遞信號。 鈣調蛋白分子是由
?鈣調蛋白的功能特點
鈣調蛋白是細胞第二信使系統的重要成分,在Ca信號系統傳導中起著關鍵的作用,調控生理代謝及基因表達,控制細胞正常的生長和發育。鈣調蛋白作為第二信使在植物信號轉導中的作用一直是植物生理、細胞生物學和發育生物學研究的熱點。Ca/CaM是有機體進化過程中最保守的信號轉導級聯反應系統,這一信號途徑廣泛存在于真
鈣調蛋白的溴化氰裂解實驗
鈣調蛋白的溴化氰裂解實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲酸 純的鈣調蛋白 溴化氰
鈣調蛋白的溴化氰裂解實驗
試劑、試劑盒甲酸純的鈣調蛋白溴化氰乙腈實驗步驟材料甲酸(市售最髙級(如AldrichChemicalCo.,Inc.)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶體)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Baker)
鈣調蛋白的溴化氰裂解實驗
試劑、試劑盒 甲酸純的鈣調蛋白 溴化氰乙腈實驗步驟 材料甲酸(市售最髙級(如AldrichChemicalCo.,Inc.)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶體)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Bak
鈣調蛋白調節微管解聚簡介
微管的組裝需要微管結合蛋白和 Tau因子的共同作用,由于依賴于鈣調蛋白激酶的底物而徹底被磷酸化,導致微管解聚。當體系中存在一定的 Ca2+的時候,鈣調蛋白就會與微管 Tau 因子競爭結合,微管的聚合就會被抑制,細胞的生理活動恢復正常。利用顯微注射法注入鈣調蛋白,可以有效的延長有絲分裂中期持續的時
關于鈣調蛋白的結構介紹
鈣調蛋白的外形似啞鈴,有兩個球形的末端,中間被一個長而富有彈性的螺旋結構相連,長度為 6.5nm,每個末端有兩個Ca2+結構域,每個結構域可以結合一個Ca2+,這樣一個鈣調蛋白可以結合4個Ca2+ ,每個位點都是由12個氨基酸殘基組成的套環,門冬氨酸和谷氨酸的側鏈提供 Ca2+結合基團。其中C端
鈣調蛋白樣品的測活實驗
試劑、試劑盒 MLCK 的底物肽ATP鈣調蛋白儲液 MLCK 酶磷酸丙酮(任選)MLCK 測活緩沖液儀器、耗材 聚丙烯微量離心管 Whatman*P81 磷酸纖維素紙(切成條)玻璃燒杯加樣器閃爍瓶閃爍計數器吹干機(任選)實驗步驟 材料與設備聚丙烯微量離心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10m
鈣調蛋白的苯基Sepharose-層析實驗
試劑、試劑盒含鈣調蛋白的組分CaCl2(固體)碳酸氫銨緩沖液 E緩沖液 F儀器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃層析柱蠕動泵紫外線檢測器、分部收集器和硼硅玻璃試管凍干機 冷凍干燥器實驗步驟材料與設備含鈣調蛋白的組分,從 DEAE 柱收集后合并所得(見實驗 4)透析袋(標稱截留分子量
從雞胗提取鈣調蛋白實驗
試劑、試劑盒雞胗2-巰基乙醇緩沖液 H(10X)儀器、耗材聚丙烯燒杯勻漿器聚碳酸酯離心管超速離心機帶刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗實驗步驟材料與設備雞胗(25 個;保存于-20°C)(如,Pel-Freez,Inc.)2-巰基乙醇(2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙烯燒杯
從雞胗提取鈣調蛋白實驗
從雞胗提取鈣調蛋白實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 雞胗 2-巰基乙醇 緩沖液 H(10X)
大鼠鈣調蛋白(Calmodulin)ELISA檢測法
大鼠鈣調蛋白(Calmodulin)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?Calmodulin?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?Calmodulin與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠Calmodulin,形成免
鈣調蛋白的苯基Sepharose-層析實驗
鈣調蛋白的苯基-Sepharose 層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 含鈣調蛋白的組分 CaCl2(固體)
鈣調蛋白的苯基Sepharose-層析實驗
試劑、試劑盒?含鈣調蛋白的組分CaCl2(固體)碳酸氫銨緩沖液 E緩沖液 F儀器、耗材?透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃層析柱 蠕動泵紫外線檢測器、分部收集器和硼硅玻璃試管凍干機 冷凍干燥器實驗步驟?材料與設備含鈣調蛋白的組分,從 DEAE 柱收集后合并所得(見實驗 4)透析袋(標稱截
鈣調蛋白樣品的測活實驗
試劑、試劑盒MLCK 的底物肽ATP鈣調蛋白儲液MLCK 酶磷酸丙酮(任選)MLCK 測活緩沖液儀器、耗材聚丙烯微量離心管Whatman*P81 磷酸纖維素紙(切成條)玻璃燒杯加樣器閃爍瓶閃爍計數器吹干機(任選)實驗步驟材料與設備聚丙烯微量離心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10mmol/L
鈣調蛋白參與調控靶酶活性
Ca2+-CaM復合體具有結合并調控下游靶酶的功能。現已確定的靶酶有磷酸化酶激酶、鳥苷酸環化酶、磷脂酶A2、肌球蛋白輕鏈激酶、磷酸二酯酶、鈣調蛋白激酶(CaMK)等。Ca2+-CaM復合體形成后,下游的靶酶活力會有不同程度的增加。在動物中,鈣調蛋白在腎上腺和腦中 cAMP的合成與降解的過程中扮演
從雞胗提取鈣調蛋白實驗
試劑、試劑盒 雞胗2-巰基乙醇緩沖液 H(10X)儀器、耗材 聚丙烯燒杯勻漿器聚碳酸酯離心管超速離心機帶刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗實驗步驟 材料與設備雞胗(25 個;保存于-20°C)(如,Pel-Freez,Inc.)2-巰基乙醇(2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙
鈣調蛋白樣品的測活實驗
鈣調蛋白樣品的測活實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 MLCK 的底物肽 ATP 鈣調蛋白儲液
關于鈣調蛋白的作用機理介紹
鈣調蛋白分子本身無酶的活性,在無Ca2+的情況下,也無生物學活性;但在胞內Ca2+結合后,鈣調蛋白發生構型上的變化,暴露疏水區,疏水區與依賴于 鈣調蛋白的靶酶相互作用而調節酶的活性。 [4] 作為一個多功能的Ca2+傳感器,鈣調蛋白能夠應對不同Ca2+濃度。結合Ca2+后,鈣調蛋白會發生構象轉變
鈣調蛋白的胰蛋白酶消化實驗
試劑、試劑盒消化緩沖液經 TPCK 處理的胰蛋白酶HCl純的鈣調蛋白實驗步驟材料經 TPCK 處理的胰蛋白酶(其干粉可從 WorthingtonBiochemicalCorp. 買到)HCl(1 mmol/L)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)試劑消化緩沖液(配方,見"試劑的配制'
鈣調蛋白的胰蛋白酶消化實驗
試劑、試劑盒 消化緩沖液經 TPCK 處理的胰蛋白酶HCl純的鈣調蛋白實驗步驟 材料經 TPCK 處理的胰蛋白酶(其干粉可從 WorthingtonBiochemicalCorp. 買到)HCl(1 mmol/L)純的鈣調蛋白(干粉;無鹽(0.1~1 mg)試劑消化緩沖液(配方,見"試劑的配制
鈣調蛋白的胰蛋白酶消化實驗
鈣調蛋白的胰蛋白酶消化實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 消化緩沖液 經 TPCK 處理的胰蛋白酶
鈣調蛋白的粗分級分離實驗
試劑、試劑盒?上清固體硫酸銨濃硫酸Tris 堿緩沖液 B儀器、耗材?聚丙烯燒杯磁力攪拌器與攪拌子聚碳酸酯離心管超速離心機帶刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗橡皮淀帚 刮勺透析袋實驗步驟?材料與設備上清,得自實驗 2(約 700~1000 ml)固體硫酸銨聚丙烯燒杯(2x4000-ml)磁力攪拌器與攪拌
人鈣調蛋白(CaM)酶聯免疫分析
人鈣調蛋白(CaM)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中鈣調蛋白(CaM)的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人鈣調蛋白(CaM)水平。用純化的人鈣調蛋白(CaM)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的
人鈣調蛋白(Calponin)ELISA試劑盒
人鈣調蛋白(Calponin)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?Calponin?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?Calponin與單抗結合,加入生物素化的抗人Calponin,形成免疫復合物連接在板上
鈣調蛋白的粗分級分離實驗
鈣調蛋白的粗分級分離實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 上清 固體硫酸銨 濃硫酸 Tris
鈣調蛋白的粗分級分離實驗
為純化鈣調蛋白,對平滑肌組織提取物的粗分級分離采取了兩步不同的操作:硫酸銨沉淀和等電點沉淀。這兩步操作利用了鈣調蛋白的兩個不同的性質,即它在中性以上 pH 條件下的高溶解度和它的酸性等電點。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒上清固體硫酸銨濃硫酸Tris 堿緩沖液 B儀器
大鼠鈣調蛋白(Calmodulin)ELISA試劑盒說明
原理本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Calmodulin 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 Calmodulin與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠Calmodulin,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色
揭示鈣調蛋白調節RyR2受體機制
心肌收縮是由鈣離子流入細胞質觸發的,最初是由Cav1.2介導的細胞外環境中的鈣離子流入觸發的,隨后是由蘭尼堿受體2(ryanodine receptor 2, RyR2)介導的肌漿網鈣庫中的鈣離子流入觸發的。蘭尼堿受體是已知最大的離子通道,由分子量大于2兆道爾頓(MDa)的同源四聚體組成。80%