高產學者Nature揭示RNA甲基化的新功能
MicroRNA（miRNA）是一類約22nt大小的內源RNA，在基因表達中起著重要的調控作用，參與了多種生理和病理過程。miRNA生成是一個復雜的過程，初級miRNA（pri-miRNA）需要經過細胞核和細胞質內的一系列加工才能形成成熟的miRNA。 整個流程的第一步是microprocessor復合體加工pri-miRNA。microprocessor復合體由RNA結合蛋白DGCR8和內切酶Drosha組成，DGCR8負責識別pri-miRNA莖環結構，然后招募DROSHA切割雙鏈RNA，生成前體miRNA（pre-miRNA）。雖然人們對pri-miRNA加工機制研究得比較透徹，但至今還不清楚DGCR8在眾多轉錄本二級結構中識別并結合pri-miRNA的機制。 洛克菲勒大學的研究團隊發現，m6A是促進miRNA生成的關鍵性轉錄后修飾。這項研究發表在三月十八日的Nature雜志上，文章的通訊作者是洛克菲勒大學副教授S......閱讀全文
RNA加工修飾
中文名RNA加工修飾所屬領域生物學定義RNA加工修飾，主要加工方式是切斷和堿基修飾，真核生物tRNA前體一般無生物學特性，需要進行加工修飾。
RNA－反轉錄
? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo
RNA－反轉錄
?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p
RNA的轉錄和逆轉錄
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程，經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中，再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的，以RNA分子中的一條鏈為模板，在逆轉錄酶的作用下，以四種脫氧核苷酸為原料，合成方向仍是5'→3'，完成cDNA的合成。大
RNA復制、轉錄與逆轉錄
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程，經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中，再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的，以RNA分子中的一條鏈為模板，在逆轉錄酶的作用下，以四種脫氧核苷酸為原料，合成方向仍是5'→3'，完成cDNA的合成。大
Nature：RNA－修飾研究有助表觀轉錄組學進一步發展
這是一個與 mRNA 結合的細菌核糖體的分子模式圖，該核酸蛋白復合體正在合成蛋白質。 隨著科研人員逐漸揭開 RNA 修飾的奧秘，幫助我們了解表觀轉錄組學（epitranscriptomics）的工具也變得越來越多了。 2004 年，以色列特拉維夫大學（Tel Aviv University
RNA－大量轉錄合成
實驗材料 模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒 TE TE 飽和酚 氯仿異內醇 3mol LNaAc 無水乙醇 5X 轉錄緩沖液 lOOmmoL LDTT RNasin rATPrGTPrUTPrCTP SF6T3 或 T7RNA 聚合酶 異戊醇 DNase 7.5mol L 乙酸銨 無水乙醇 乙醇實驗
3.5－RNA－反轉錄
利用 RNA 模板通過反轉錄獲得 DNA,進而復制和感染細胞實驗材料poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒oligo(dT)12-18lmol LTris-Cl1mol LTris-Cllmol LKC125 mmol LMgCl2dNTP 混合物0.lmol LDTT
RNA－標準轉錄反應
? ? ? ? ? ? 實驗材料 模板 DNA 或質粒 試劑、試劑盒 TE 異丙醇 3mol LNaAc
RNA－大量轉錄合成
? ? ? ? ? ? 實驗材料 模板 DNA 或質粒 試劑、試劑盒 TE ? TE 飽和酚 ? 氯仿
RNA－標準轉錄反應
實驗材料 模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒 TE 異丙醇 3mol LNaAc 無水乙醇 5×轉錄緩沖液 l00 mmol L DTT RNasin rATPrGTPrUTP 各 2.5 mmol L [α42P] rCTP SPGT3 或 T7RNA 聚合酶 TE-飽和的酚氯仿異戊醇 DN
3.1.2－RNA－大量轉錄合成
RNA 標準轉錄體系的一般回收率為 lugRNA/ug 質粒 DNA, 使用下面的方法，可以提高回收率至 5?l0ug RNA/ug 質粒 DNA。大量制備 RNA 可以用于體外翻譯。實驗材料模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒TETE 飽和酚氯仿異內醇3mol LNaAc無水乙醇5X 轉錄緩沖液lOO
信使RNA轉錄的調控
一、遺傳信息的表達有時序調控和適應調控，轉錄水平的調控是關鍵環節，因為這是表達的第一步。轉錄調控主要發生在起始和終止階段。 二、操縱子是細菌基因表達和調控的單位，有正調節和負調節因子。阻遏蛋白的作用屬于負調控。環腺苷酸通過其受體蛋白（CRP）促進轉錄，可促進許多誘導酶的合成。操縱子可構成綜合性
RNA轉錄的技術特點
轉錄時，細胞通過堿基互補的原則來生成一條帶有互補堿基的mRNA，通過它攜帶密碼子到核糖體中可以實現蛋白質的合成。與DNA的復制相比，轉錄有很多相同或相似之處，亦有其自己的特點。轉錄中，一個基因會被讀取并復制為mRNA。就是說，以特定的DNA片段作為模板，以DNA依賴的RNA聚合酶作為催化劑，合成前體
3.1.1－RNA－標準轉錄反應
利用 DNA 聚合酶 I 的大片段（Klenow 酶）的 3＇— 5＇外切酶活性將 3＇黏性末端轉化成平末端。具體方法是在體外轉錄體系尚未加入核苷酸和 RNA 聚合酶時，加入 Klenoow 片段 (終濃度為 5U/ug)，于 22℃ 孵育 15mim, 然后再加入核苷酸混合物和RNA 聚合酶實驗材
篩選或驗證RNA修飾直接靶點，研究RNA修飾靶基因的調控...
篩選或驗證RNA修飾直接靶點，研究RNA修飾靶基因的調控機制技術簡介用體外轉錄法標記生物素RNA探針，然后與胞漿蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白質復合物。該復合物可與鏈霉親和素標記的磁珠結合，從而與孵育液中的其他成分分離。復合物洗脫后，通過Western Blot檢測特定的RNA結合蛋白是否與R
RNA修飾相關酶PCR芯片
應用場景：通過關鍵酶/蛋白的RNA表達變化，確定樣品表型與特定RNA 修飾的聯系 優勢：預制的PCR板,覆蓋68個針對不同RNA修飾的Writers/Erasers/Readers基因。精心優化的引物Tm值均一，并經過了嚴格的預實驗驗證，無須摸索引物設計和測試。工業化生產的高度均一的PCR
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄的區別
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄過程在總體上基本相同，但是，其過程要復雜得多，主要有以下幾點不同： 1、真核生物RNA的轉錄有的是在細胞核內進行的，而蛋白質的合成則是在細胞質內進行的。且真核生物線粒體和葉綠體的遺傳信息系統被稱為真核細胞的第二遺傳信息系統，或核外基因及其表達體系。這是
RNA的轉錄與逆轉錄相關介紹
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程，經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中，再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的，以RNA分子中的一條鏈為模板，在逆轉錄酶的作用下，以四種脫氧核苷酸為原料，合成方向仍是5'→3'，完成cDNA的合成。大
RNA逆轉錄(RT)過程
一，準備工作? ? 1， 實驗器具與材料: (1)移液槍:200ul、10ul (2)吸頭:200ul、20ul (3)EP 管 1.5ml、100ul (4)水浴箱 2，實驗器具的處理與準備? ? 逆轉錄(RT)? ? 塑料制品:(包括吸頭、EP 管等)? ? 將塑料制品逐個浸泡于 1‰DEPC
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄過程差異
⒈ 真核生物RNA的轉錄有的是在細胞核內進行的，而蛋白質的合成則是在細胞質內進行的。且真核生物線粒體和葉綠體的遺傳信息系統被稱為真核細胞的第二遺傳信息系統，或核外基因及其表達體系。這是因為研究發現，線粒體和葉綠體中除有DNA外，還有RNA（mRNA、tRNA、 RNA）、核糖體、氨基酸活化酶等。說明
RNA足跡和修飾干擾分析實驗
RNA 足跡和修飾干擾分析（RNA footprinting and modification interference analysis）是用來研究 RNA 與蛋白質相互作用的技術。RNA 測序及其結構分析的原理是 RNA 足跡試驗的理論基礎，它們都是建立在變性、半變性或自然條件下采用堿基特異性
RNA足跡和修飾干擾分析實驗
實驗方法原理 RNA 足跡和修飾干擾分析（RNA footprinting and modification interference analysis）是用來研究 RNA 與蛋白質相互作用的技術。RNA 測序及其結構分析的原理是 RNA 足跡試驗的理論基礎，它們都是建立在變性、半變性或
Cell綜述：RNA修飾的新作用
迄今為止，科學家們已經發現了上百種RNA修飾類型，但是其中大多數在mRNA和調控非編碼RNAs中還是很罕見的。近期的一些研究發現指出，這些修飾中有至少有一些含量豐富，且保守性強。本期Cell雜志以此為中心，介紹了兩種RNA修飾方式的分子機制，和生物學功能。 這兩種RNA修飾方式分別是N6-甲基
RNA足跡和修飾干擾分析實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNA 足跡和修飾干擾分析（RNA footprinting and modification interference analysis）是用來研究 RNA 與蛋白質相互作用的技術。RNA 測序及其結構分析的原理是 RNA
信使RNA的反轉錄酶與反轉錄過程
定義：以反義RNA為模版，通過反轉錄酶，進行的RNA轉錄 1．概念反轉錄是以RNA為模板合成DNA的過程，也稱逆轉錄。這是DNA生物合成的一種特殊方式。 2．反轉錄酶與反轉錄過程 反轉錄過程由反轉錄酶催化，該酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合
RNA復制的轉錄與逆轉錄的過程介紹
轉錄是以DNA為模板合成RNA的過程,經過轉錄DNA分子中的貯存信息傳遞到RNA分子中,再由mRNA做為模板合成蛋白質分子。逆轉錄也是從RNA的一個特定位置開始的,以RNA分子中的一條鏈為模板,在逆轉錄酶的作用下,以四種脫氧核苷酸為原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成
真核生物RNA的轉錄與原核生物RNA的轉錄過程的區別
⒈ 真核生物RNA的轉錄有的是在細胞核內進行的,而蛋白質的合成則是在細胞質內進行的。且真核生物線粒體和葉綠體的遺傳信息系統被稱為真核細胞的第二遺傳信息系統,或核外基因及其表達體系。這是因為研究發現,線粒體和葉綠體中除有DNA外,還有RNA(mRNA、tRNA、 RNA)、核糖體、氨基酸活化酶等。說明
轉錄組的重編寫：RNA編輯
基因的功能探索是生命科學研究的永恒主題。近幾年以CRISPR-Cas9技術的發展讓直接在高等生物體內進行基因的功能研究成為可能。但除了DNA之外， DNA的轉錄產物--RNA在生命活動中也發揮著極其重要的作用，且與癌癥等多種疾病的發生密切相關。因此，對RNA進行功能研究和錯誤RNA的糾正，成為了
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsR