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  • DNA快速檢驗全球研究進展(二)

    2.2 快速擴增檢驗一種常用的快速擴增研究方法是選用合適的快速酶并結合快速循環程序對現有的常規試劑盒進一步優化,以達到縮短PCR擴增時間為目的。如2008年Vallone等[13]將PyroStart和SpeedSTAR兩種酶結合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burnie,MD)可實現快速擴增,SpeedSTAR酶(Takara Bio USA,Madison,WI)可提高腺苷酸化,優化各位點間的峰平衡,同時結合快速循環程序將Identifiler?擴增時間縮短為36 min;Amanda Foster[14]選擇SpeedSTARTMHS DNA聚合酶,使用Bio-Rad C1000TM擴增儀進一步提高升降溫循環的速率,同時修正每步的熱循環參數,并采用兩步代替3步的PCR方法使AmpFLSTR? Identifiler?整個擴增的時間為26 min;Bahlmann等[15]......閱讀全文

    DNA快速檢驗全球研究進展(二)

    2.2 快速擴增檢驗一種常用的快速擴增研究方法是選用合適的快速酶并結合快速循環程序對現有的常規試劑盒進一步優化,以達到縮短PCR擴增時間為目的。如2008年Vallone等[13]將PyroStart和SpeedSTAR兩種酶結合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burn

    DNA快速檢驗全球研究進展(三)

    芯片毛細管電泳具有進樣量少,靈敏度高,分析速度快等特點,非常適合法醫DNA-STR的快速檢驗。毛細管電泳芯片由于尺寸小,可施加較大場強,所以在幾秒鐘內就可完成對樣品的分離,微陣列毛細管電泳芯片可實現高通量檢測則成為目前學者研究的熱點。2002年Emrich CA等[31]報道的將高通量384孔毛

    DNA快速檢驗全球研究進展(一)

    影視作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意見從而借對話引出對案情分析的橋段,其中會包含對遇害者的情況分析診斷,也就是“古代法醫”的部分工作。1247年(中國南宋理宗淳祜七年),時任湖南提點刑獄兼大使行府參議官的宋慈編寫完成《洗冤集錄》,這是世界歷史上第一本以死亡方式系統編輯的法醫學著作。《洗冤

    DNA分子標記技術研究進展(二)

    2.第二代分子標記2.1 SSR標記技術??? 在真核生物基因組中存在許多非編碼的重復序列,如重復單位長度在15~65個核苷酸的小衛星DNA(Minisatellite DNA),重復單位長度在2~6個核苷酸的微衛星DNA(Microsatellite DNA)。小衛星和微衛星DNA分布

    基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展(二)

    2 ?qPCR與dPCR比較研究 qPCR是目前DNA定量研究的主要技術,該技術通過在PCR反應體系中加入熒光結合染料(SYBR green I) 或熒光標記的探針( 如TaqMan Probes) ,利用實時積累的熒光信號監測整個擴增過程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析,以此來評估

    HIV檢驗技術的研究進展

    【關鍵詞】 ?人類免疫缺陷病毒;聚合酶鏈反應;抗原  [摘要] 艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一種嚴重威脅人類身體健康的疾病。為有效遏止HIV的蔓延,除尋求更加有效的疫苗和治療藥物外,HIV早期診斷十分重要,其早期診斷主要靠實驗診斷,包括病原學、免疫學、分子生物學等。  [關鍵詞]

    用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法(二)

    2 結果與討論2.1 PCR模板DNA的快速制備本方法是將少量植物葉片在TE溶液或去離子水中,經鎢合金珠在離心管內的振蕩破碎,直接獲得DNA溶液。用多功能組織細胞研磨器(MTM-60)一次可操作60個樣品。瓊脂糖凝膠電泳表明,用TE和去離子水都可獲得分子量較大的DNA片段(圖1A)。用TE制備的DN

    線粒體DNA甲基化研究進展

      DNA 甲基化是表觀遺傳修飾的重要方式之一. 線粒體是真核細胞內的關鍵細胞器, 線粒體DNA(mtDNA)編碼部分線粒體基因, 其 mtDNA 的甲基化修飾可能引起所編碼基因的異常表達, 從而參與調節生理和病理過程. 近期來自西安交通大學生命科學與技術學院的研究人員就目前 mtDNA 甲基化及其

    RNAi的研究進展(二)

    三,RNAi的應用前景RNAi 技術中的相關問題主要涉及以下幾點:(1) dsRNA 序列的選擇dsRNA 主要選自已知的cDNA 的開放閱讀框架(ORF) 中的基因區域。為防止mRNA 調控蛋白對RISC 與靶RNA 結合的干擾,應避免選擇包括:1) 起始密碼子下游或終止密碼的50~100 核

    酵母DNA的快速分離

    實驗方法原理 根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。實驗材料 酵母細胞試劑、試劑盒 乙醇酚氯仿醋酸鈉STES 緩沖液TE儀器、耗材

    酵母DNA的快速分離

    根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據該方案制備的酵母 DNA 可

    酵母DNA的快速分離

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。

    快速制備酵母DNA法

    實驗概要本實驗制備了酵母轉化質粒,快速從轉化酵母菌中分離了用于Southern分析的基因組DNA。主要試劑2% Triton X-100,1%SDS,100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl(pH8),1mmol/L Na2EDTA,苯酚:氯仿:已戊醇(25:24:1),YP

    菌落總數快速檢驗紙片

    本品可用于各類食品及飲用水中菌落總數的測定,由細菌營養培養基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。與傳統方法相比,省去了配制培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時可以開始進行抽樣檢測,而且操作簡便,通過酶顯色劑的放大作用,使菌落提前清晰地顯現出來,培養十幾小時就開始出現紅色菌斑,非常適合于食品

    心肺復蘇的研究進展(二)

     三.CPR基礎與臨床的科學研究是一個系統工程?  CPR不僅是將一個突然倒地的患者經過及時按壓,自主循環恢復送到醫院進行救治的簡單過程,也不是僅憑掌握CPR技術的目擊者實施的簡單救命技術,如果詳細閱讀2010AHA版的CPR指南,更多地是強調CPR從基礎到臨床,從社區到醫院,從現場目擊者到EMSS

    質粒DNA的小量快速提取

    實驗概要本實驗介紹了質粒DNA小量快速提取的基本原理及操作步驟。實驗原理在堿性條件下,染色體DNA和質粒DNA都發生變性,但質粒DNA的超螺旋共價閉合環狀結構的兩條互補鏈不會完全分離,當用酸性的高鹽緩沖液將pH中和至中性時,變性的質粒DNA又恢復到原來的構型并溶解在溶液中,而染色體DNA不能復性而形

    轉化子DNA的快速鑒定—快速細胞破碎法

    目的:1、掌握用細胞破碎液裂解菌體細胞,并通過電泳的方法細胞中不同分子量質粒的方法;2、從實驗六的氨芐青霉素抗性轉化子中篩選僅含一個拷貝目的基因的重組載體。原理:挑選8~10個白菌落接于平板過夜培養。利用破碎細胞緩沖液中的十二烷基硫酸納(SDS)在37℃溶解膜蛋白,使細胞破裂,然后高速離心,將含有質

    唾液檢驗(二)

      (四)激素  Shannon等研究結果表明,脂溶性非結合類固醇容易通過微循環和唾液細胞時入唾液,其濃度與血漿中的非結合類固醇濃度相關。如皮質醇、醛固酮、脫氫雄甾醇、睪酮、孕酮、雌二醇、雌三醇等無可通過唾液測 定,用于評價腎上腺皮質功能和生殖醫學研究。  (五)酶類  1.淀粉酶(amylase)

    純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化

    試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L

    全球粉末涂料市場快速擴容

      美國增長咨詢公司弗若斯特沙利文5月發表的研究報告稱,全球粉末涂料市場2013年的銷售額約為77.7億美元,預計2020年銷售額將達到125.3億美元,年均增長率為7.1%。全球粉末涂料的市場集中度較高,2013年前三大粉末涂料生產商約占全球35.6%的市場份額。全球粉末涂料市場供貨量同樣將保持增

    科學家用DNA分子造出-全球最小二極管

      北京時間4月5日下午消息,佐治亞大學和以色列內蓋夫本·古里安大學的研究人員利用DNA分子制造出了新型二極管。  據新浪科技報道,這被認為是全球尺寸最小的二極管。研究人員表示,這將促進DNA元件的開發,推動分子電子學的發展。  二極管的功能是實現電流的單向流動。40多年前,科學家提出,可以將二極管

    食品的快速檢驗檢測技術

      摘要:食品安全已成為社會關注的焦點問題。文章介紹了目前常用的食品安全快檢技術,并展望了其發展方向。?  引言?  食品安全(food safety)是指食品無毒、無害,符合應當有的營養要求,對人體健康不造成任何急性、亞急性或者慢性危害。俗話說“民以食為天”,食品安全關系到人民群眾的身體健康和生命

    DNA分子標記技術研究進展(一)

    遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用,隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起,遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的,是對基因的間接反映;而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映,它具有

    多肽抗生素研究進展(二)

    β-defensins比α-defensins大一些,一般含有38~42個氨基酸殘基。都含有3個二硫鍵和4~8個精氨酸。昆蟲defensins在C末端與α-defensins相似,但是只有兩個β片層結構,中間有一段α螺旋起穩定作用。主要對革蘭陽性菌起作用,而對真菌沒有作用。植物defensins一般

    兒童腎移植研究進展(綜述)(二)

    ? 移植后需要考慮的問題??? 1、移植物的存活??? 隨著時間的推移,受助兒童移植腎存活率得到了大幅提升,無論移植物是來自存活還是死亡的捐贈者。??? 這些進展歸功于如下幾個因素:移植前準備的完善、移植技術的提高、更好的供體選擇、更有效的免疫抑制藥物、小兒特定藥代動力學的深入了解,以及詢證醫學藥物

    土壤酶化學計量研究進展(二)

    ?土壤(A)和凋落物(B)胞外酶活性對氮沉降的響應?該文的通信作者Robert L. Sinsabaugh更是土壤酶活研究領域的領軍人物,于08年在Ecology Letters上報道了全球尺度的土壤酶活化學計量研究成果(Robert L. Sinsabaugh, et al., 2008);于09

    DNA的定量(二)

    2. EB熒光分析法(1)瓊脂糖凝膠的制備。(2)樣品的準備。把待測DNA樣品進行1:2連續稀釋,并準備一份DNA標準液作對照。(3)上樣。稀釋樣品與上樣緩沖液按1:5混合均勻后上樣。(4)電泳。用100V穩壓電泳至溴酚藍指示劑遷移到凝膠的3/4處停止電泳。(5)取出凝膠,入EB熒光染液中作用20m

    基因組DNA的快速純化

    第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L Tris,pH 8??????????????????????

    哺乳動物-DNA-的快速分離

    根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 k

    哺乳動物-DNA-的快速分離

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。

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