賽分科技推出抗體分析液相色譜方法包
抗體是免疫系統中一類重要的蛋白質，它們通過特異性方式來結合抗原。這一特性使之在診斷、治療、基礎研究等方面具有巨大的價值。抗體由四條多肽鏈構成，兩條重鏈和兩條輕鏈，通過二硫鍵連接而成。它們通常被糖基化，其中羧基端區域高度保守，而氨基端區域在氨基酸序列上可變，從而產生抗體的特異性和多樣性。 在一系列的酶切和化學處理下，抗體分子被裂解為各種片段，通過HPLC分離，結合電泳和質譜等手段，抗體的結構可被了解和鑒定。近日，賽分科技的科學家通過體積排阻色譜、離子交換色譜和反相色譜等多種技術實現抗體異構體、各種抗體碎片的高效分離，可對抗體結構進行可靠的鑒定和驗證。此外，為抗體藥物的質量控制也提供了有效的監控手段。 一、結構研究 體積排阻色譜法(Zenix? SEC)抗體片段重鏈和輕鏈的分離 ......閱讀全文
介紹液液分配色譜法的正相色譜法和反相色譜法
??? 高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。本文講的是液液分配色譜法的正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。??? 使用將特定的液態物質涂于擔體表面，或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相，分離原理是根據被分
介紹液液分配色譜法的正相色譜法和反相色譜法
? 液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。本文講的是液液分配色譜法的正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。??? 使用將特定的液態物質涂于擔體表面，或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相，分離原理是根據被分離的組分
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級） 三氟乙酸（TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。（1）線性梯
高效反相液相色譜
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液
反相高效液相色譜
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合
高效反相液相色譜
實驗方法原理反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反
何謂反相液相色譜
液-液色譜有正相和反相之分。如果采用極性固定相和相對非極性流動相，就稱為正相；如果采用相對非極性固定相和極性流動相，則稱為反相。由于極性化合物更容易被極性固定相所保留，所以正相液-液色譜系統一般可用于分離極性化合物。相反，反相液-液色譜系統一般可用于分離非極性或弱極性化合物。正相色譜的流出順序是極性
高效反相液相色譜
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高
正相色譜法與反相色譜法比較
(1)定義：正(反)相色譜法是流動相極性小(大)于固定相極性的液相色譜法。(2)固定相：正相色譜法使用極性固定相，如氰基、氨基鍵合相；反相色譜法使用非極性固定相，如C18、C8、苯基、二醇基鍵合相，或使用極性大的流動相，使用氰基、氨基鍵合相。(3)流動相：正相色譜法的流動相為烷基加適量極性調節劑；反
高效液相色譜之高效反相液相色譜（二）
附：色譜柱操作說明，（以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例）1. 色譜柱常規參數訂貨號：Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如，Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
高效液相色譜之高效反相液相色譜（一）
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色
什么是正相色譜法和反相色譜法
正相色譜是指流動相的極性小于固定相的極性；反相色譜是指流動相的極性大于固定相的極性.對于反相色譜,極性越小的物質,流動相的極性越大,保留時間越長.極性越小的物質,流動相的極性越小,保留時間越短.對于極性大的物質來說,流動相的極性對其保留時間影響較小.而正相色譜正好相反.因此在應用上正相色譜用于分離極
什么是正相色譜法和反相色譜法
正相色譜是指流動相的極性小于固定相的極性；反相色譜是指流動相的極性大于固定相的極性.對于反相色譜,極性越小的物質,流動相的極性越大,保留時間越長.極性越小的物質,流動相的極性越小,保留時間越短.對于極性大的物質來說,流動相的極性對其保留時間影響較小.而正相色譜正好相反.因此在應用上正相色譜用于分離極
什么是正相色譜法和反相色譜法
正相色譜是指流動相的極性小于固定相的極性；反相色譜是指流動相的極性大于固定相的極性.對于反相色譜,極性越小的物質,流動相的極性越大,保留時間越長.極性越小的物質,流動相的極性越小,保留時間越短.對于極性大的物質來說,流動相的極性對其保留時間影響較小.而正相色譜正好相反.因此在應用上正相色譜用于分離極
反相高效液相色譜3
方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗實驗材料大分子量非極性多肽或蛋白質儀器、耗材層析柱HPLC 系統冷凍干燥器微量離心機標準的或專用 HPLC 儀器氮氣實驗步驟一、用于 RP-HPLC 純化的大分子非極性多肽或蛋白質樣品的制備1.將多肽樣品（如果蛋白質是通過固相化學合成法得到的，質量在 30~5
反相高效液相色譜1
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件實驗材料蛋白質標樣試劑、試劑盒乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級）三氟乙酸（TFA)儀器、耗材HPLC 色譜系統反相柱實驗步驟1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色譜6
方案6 計算機輔助方法優化梯度條件的 RP-HPLC 蛋白質分離實驗實驗材料HPLC 肽標準品蛋白質樣品試劑、試劑盒丙酮乙腈（HPLC級）磷酸磷酸二氫鈉硫脲硝酸鈉三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置色譜柱洗脫液瓶Hamilton 玻璃注射器氮氣量筒微量離心機流動相過濾裝置實驗步驟一、配制流動相以
反相高效液相色譜5
方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合物進行脫鹽實驗實驗材料蛋白質或多肽樣品試劑、試劑盒乙腈（HPLC級）2 -丙醇硝酸鈉硫脲三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置色譜柱洗脫液瓶Hamilton 玻璃注射器氮氣量筒微量離心機流動相過濾裝置實驗步驟一、流動相的配制1.配制緩沖液 A(弱流
反相高效液相色譜4
方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗實驗材料用于分析的肽或蛋白試劑、試劑盒丙酮乙腈（HPLC級）2 -丙醇乙醇硝酸鈉硫酸鈉硫脲三氟乙酸儀器、耗材分析型 HPLC 裝置離心機錐形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮氣冷凍干燥機流動相過濾裝置氦氣制備型 HPLC 裝置實驗步驟一、
反相高效液相色譜概述
結果與保留值之間的關系：利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結構的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數，Wilce 等利用多線性回歸方法對2106 種肽的保留性質與結構進行分析，得出了不同氨基酸組成對保留系數影響的關系，其中極性氨基酸殘基在2～20 氨基酸組成的肽中，可減少在柱上
反相高效液相色譜2
方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱試劑、試劑盒甲醇n-丙醇反相硅膠TFA 乙腈溶劑體系儀器、耗材水浴超聲波儀色譜加樣器層析柱玻璃料末端接口環氧樹脂流動池正向光學掃描檢測器加熱槍加樣器液相色譜柱填充泵微柱聚丙烯離心管聚硅酸鹽管藍寶石切刀信號數據收集裝置硅膠隔膜Teflon接頭UV檢測器實驗步驟一
反相色譜法
反相色譜法應用中性、非極性大孔的填充材料和極性流動相。分離基于被分析物質與固定相之間的相互作用，換句話說，也就是樣品的疏水性。
比較液相色譜法中正相色譜法與反相色譜法的異同
正相色譜:流動相極性小于固定相極性反相色譜:流動相極性大于固定相極性正相色譜用的固定相通常為硅膠，以及其他具有極性官能團，如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性
比較液相色譜法中正相色譜法與反相色譜法的異同
正相色譜:流動相極性小于固定相極性反相色譜:流動相極性大于固定相極性正相色譜用的固定相通常為硅膠，以及其他具有極性官能團，如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性
反相高效液相色譜的原理
在反相液相色譜中，固定相的極性小于流動相，洗脫順序取決于溶質分子的疏水性，疏水性強的保留時間長！
離子交換色譜法流動相
?離子交換色譜法流動相 ：水的緩沖溶液。陰離子離子交換樹脂作固定相，采用酸性水溶液；陽離子離子交換樹脂作固定相，采用堿性水溶液；應用：離子及可離解的化合物，氨基酸、核酸等。
什么是反相鍵合相色譜法
反相鍵合相色譜法 典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大于固定相的流動相組成。 (1) 分離機制 反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團，及未被取代
反相薄層色譜法
反相薄層色譜法反相薄層色譜是利用化學鍵合反應，將烴基硅烷鍵合到硅膠表面，制成非極性固定相，用極性較大的液體作流動相進行分離分析的方法，可克服疏水板對溶劑、系統的限制，其流動相含水量根據鍵合相不同可達20%～80%不等。常用展開劑是水和甲醇混合溶劑，其次是水和乙腈，并可使用強酸或強堿作流動相。本法可用
常用色譜法介紹反相色譜法
反相色譜法（英語：Reversed-phase chromatography，RPC）反相色譜法(IGC)一反普通氣相色譜的測定方式。以被測的高分子為固定相、以惰性氣體為流動相，為了測定需要，在流動相中加入一些探針分子，它們是揮發性的低分子。將探針分子注入氣化室氣化后，由載氣帶入色譜柱，測定它們在兩
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質復雜，色譜柱極易被污染，是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一，通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物，堵在柱頭篩板上，極易導致柱壓高；上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題，一般有0.22和0.45um規格，根據您的需要選擇合