隨機引物法
此法系可用于從低熔點瓊脂糖凝膠中回收 DNA 的放射性標記 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983，1984)。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理此法系可用于從低熔點瓊脂糖凝膠中回收 DNA 的放射性標記 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983，1984)。實驗材料大腸桿菌 DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段模板 DNA試劑、試劑盒醋酸氨牛血清白蛋白乙醇溴化乙啶NA 終止 貯存緩沖液隨機引物緩沖液儀器、耗材堿性瓊脂糖凝膠或變性聚丙烯酰胺凝膠沸水浴Sephadex G-50 離心柱實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液醋酸氨（10 mol/L)牛血清白蛋白（10 mg/ml)乙醇溴化乙啶（10 mg/ml）或 SYBR Gold 染液NA 終止/貯存緩沖液（50 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5)，50 mmol/L NaCl，5 mmol/L EDTA (p......閱讀全文
寡核苷酸的性質
寡核苷酸極易與它們的互補對鏈接。
寡核苷酸微陣列
中文名稱寡核苷酸微陣列英文名稱oligonucleotide array定 義將一定長度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物（如玻璃片、尼龍膜等）上，供分子雜交分析的系統。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
反義寡核苷酸簡介
反義寡核苷酸(AON)是一類通過序列特異地與靶基因DNA或mRNA結合而抑制該基因表達，在基因水平調控的分子藥物。而硫代反義寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides，簡稱PS2ODNs)，是用硫原子將磷酸骨架上的非成鍵氧原子取代后形成的一類新的寡核苷酸類似物
寡核苷酸的相關操作
In this section, you will find techniques related to oligonucleotides, such as oligo purification by acrylamide gel, annealing two oligos to make doub
簡并寡核苷酸誘變實驗
本方法的一個重要特點就是將單鏈的簡并寡核苷酸轉變成同源雙鏈分子后直接克隆進常規載體。由于不同的寡核苷酸可通過其3’末端的回文結構雜交，因此，寡核苷酸實際上起互為引物的作用，在大腸桿菌DNA聚合酶I klenow片段作用下延伸。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS
簡并寡核苷酸誘變實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS無水乙醇儀器、耗材 水浴鍋離心機分光光度計實驗步驟 1. ?設計寡核苷酸，其3‘端含有由8個核苷酸組成的回文結構，且包含某一限制性內切酶的識別位點；如果可能的話，5’端也應有一含某個限制性內切酶位點的序列。中間區段則應含目
簡并寡核苷酸誘變實驗
小段DNA序列中產生大量突變 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
寡核苷酸的優化設計
關鍵詞：寡核苷酸；優化設計中圖分類號：Q524???? 在核酸分子雜交、DNA序列測定和通過PCR放大DNA片段等實驗中，都需要使用寡核苷酸作為探針或引物，而對這些反應的質量起最重要影響作用的，就是這些寡核苷酸探針或引物。用優化的寡核苷酸進行實驗能夠很快得到好的結果，而用不夠合適的寡核苷酸時，常常得
寡核苷酸的主要應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中?[2]??。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA
寡核苷酸的主要應用
反義寡核苷酸(AON)是一類通過序列特異地與靶基因DNA或mRNA結合而抑制該基因表達，在基因水平調控的分子藥物。而硫代反義寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides，簡稱PS2ODNs)，是用硫原子將磷酸骨架上的非成鍵氧原子取代后形成的一類新的寡核苷酸類似物(圖
寡核苷酸引物的作用
PCR技術中的引物的本質和作用。引物是一小段單鏈DNA或RNA，引物可以做為DNA復制開始時DNA聚合酶的結合位點，在細胞外的條件下，只有通過引物，DNA才可以開始進行復制。引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個引物與感興趣區域一端的一條DNA模板鏈互補，另一個引物與感興趣區域另一端的另一條DNA模
細胞化學詞匯寡核苷酸
寡核苷酸(Oligonucleotide)，一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段，但在使用這一術語時，對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定，在不少文獻中，把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成，它可作為DNA合成的引物(Primer)
寡核苷酸的應用介紹
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中??。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防
關于寡核苷酸的簡介
寡核苷酸(Oligonucleotide)，一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段，但在使用這一術語時，對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定，在不少文獻中，把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成，它可作為DNA合成的引物(Prime
簡述寡核苷酸的應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 [2] 。 寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。 調控寡核苷酸用于
寡核苷酸的應用特點
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防止
寡核苷酸的應用介紹
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防止
寡核苷酸陣列的概念
微陣列（DNA Microarray）也叫寡核苷酸陣列（Oligonucleotide array），是人類基因組計劃（Human Genome Project，HGP）的逐步實施和分子生物學的迅猛發展及運用的產物，它是生物學家受到計算機芯片制造和廣為應用的啟迪，融微電子學、生命科學、計算機科學和光
寡核苷酸探針的簡介
基因探針，即核酸探針，是一段帶有檢測標記，且順序已知的，與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結合，產生雜交信號，能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據雜交原理，作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件：①應是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。②應帶有容
寡核苷酸的基本介紹
寡核苷酸(Oligonucleotide)，一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段，但在使用這一術語時，對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定，在不少文獻中，把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成，它可作為DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸探針技術介紹
利用寡核苷酸探針可檢測到靶基因上單個核苷酸的點突變。常用的寡核苷酸探針主要有兩種:單一已知序列的寡核苷酸探針和許多簡并性寡核苷酸探針組成的寡核苷酸探針庫。單一已知序列寡核苷酸探針能與它們的目的序列準確配對,可以準確地設計雜交條件,以保證探針只與目的序列雜交而不與序列相近的非完全配對序列雜交,對于一些
寡核苷酸介導的誘變實驗
用突變的寡核苷酸引導模板的合成，從而改變DNA序列，突變效率可達50~80%。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒PEGTEATP寡核苷酸誘變引物T4多核苷酸激酶EDTASSC儀器、耗材水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟1. ?將一個單鏈噬菌體產生的噬斑轉移至含有1 ml 滅菌TY培養基的1.5 ml 微量離心管中
寡核苷酸微陣列的定義
中文名稱寡核苷酸微陣列英文名稱oligonucleotide array定 義將一定長度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物（如玻璃片、尼龍膜等）上，供分子雜交分析的系統。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
篩選寡核苷酸針的原則
篩選寡核苷酸針的原則下面是篩選寡核苷酸針的一些原則。一.長18～50nt，較長探針雜交時間較長，合成量低；較短探針特異性會差些。二.堿基成分：G+C含量為40%～60%，超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區，否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現（不
寡核苷酸介導的誘變實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 PEGTEATP寡核苷酸誘變引物T4多核苷酸激酶EDTASSC儀器、耗材 水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟 1. ?將一個單鏈噬菌體產生的噬斑轉移至含有1 ml 滅菌TY培養基的1.5 ml 微量離心管中，60℃溫育5 min，以殺滅細菌細胞，劇烈振蕩以釋放瓊脂中的噬菌體，
簡并寡核苷酸基因混編實驗
實驗材料 pBSII KS 質粒大腸桿菌 DH5α試劑、試劑盒 Pfx 聚合酶堿性磷酸酶通用緩沖液覆蓋液剛果紅溶液脫色液樺木木聚糖底物溶液PAHBAH 儲液實驗步驟 我們以 DNA 重組 D.thermophilum Rt46B.1 木聚糖酶基因（ xynB) 及其 5 個相關的木聚糖酶基因為例
簡并寡核苷酸基因混編實驗
蛋白酶生化性質的改善可以通過對該酶基因的錯摻突變和 DNA 混編方法實現。混編技術可用于同一基因的一組突變體，或者對相關家族基因的片段進行新的組合，產生嵌合突變基因產物。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料pBSII KS 質粒大腸桿菌 DH5α試劑、
寡核苷酸介導的誘變實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
簡并寡核苷酸基因混編實驗
簡并寡核苷酸基因混編 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 pBSII KS 質粒 大腸桿菌 DH5α
篩選寡核苷酸針的原則
一.長18～50nt，較長探針雜交時間較長，合成量低；較短探針特異性會差些。二.堿基成分：G+C含量為40%～60%，超出此范圍則會增加非特異雜交。三.探針分子內不應存在互補區，否則會出現抑制探針雜交的“發夾”狀結構。四.避免單一堿基的重復出現（不能多于4個），如-CCCCC-。五.一旦選定某一序更