蛋白質的生物合成標記實驗（一）
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞生物按照從脫氧核糖核酸 (DNA)轉錄得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遺傳信息合成蛋白質的過程。由于mRNA上的遺傳信息是以密碼（見遺傳密碼）形式存在的，只有合成為蛋白質才能表達出生物性狀，因此將蛋白質生物合成比擬為轉譯或翻譯。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS儀器、耗材培養箱離心管實驗步驟1. 培養懸浮細胞至對數增長期，室溫300 g 離心5 min。回收107~108細胞。 2. 每2×107細胞用約10 ml 37℃的短時間標記培養基在圓錐型試管中洗滌，于室溫300 g 離心5 min 回收細胞，小心重懸細胞并重復洗滌過程。3. 以37℃的短時間標記培養基重懸至5×106細胞/ml，于37℃保溫15 min 以耗盡細胞內的甲硫氮酸，間歇搖動。4. 室溫解凍［35S］甲硫氨酸，并用37℃短時間標記培養基來配制含0.1~0.2 mC......閱讀全文
蛋白質的生物合成標記實驗（一）
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞生物按照從脫氧核糖核酸 (DNA)轉錄得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遺傳信息合成蛋白質的過程。由于mRNA上的遺傳信息是以密碼（見遺傳密碼）形式存在的，只有合成為蛋白質才能表達出生物性狀，因此將蛋白質生物合成比擬為轉譯或翻譯。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS
蛋白質的生物合成標記實驗
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞 甲硫氨酸短時間標記貼壁培養細胞 甲硫氨酸對細胞進行脈沖追蹤標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
蛋白質的生物合成標記實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 甲硫氨酸PBS儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?培養懸浮細胞至對數增長期，室溫300 g 離心5 min。回收107~108細胞。?2. ?每2×107細胞用約10 ml 37℃的短時間標記培養基在圓錐型試管中洗滌，于室溫300 g 離心5 min 回收細胞，小
蛋白質的生物合成標記實驗
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞 甲硫氨酸短時間標記貼壁培養細胞 甲硫氨酸對細胞進行脈沖追蹤標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
蛋白質的生物合成標記實驗（二）
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS甲硫氨酸儀器、耗材培養箱離心機實驗步驟1. ?在100 mm 直徑的培養皿上培養貼壁細胞（0.5~2×107）至70%~90%匯片，吸去培養液，用10 ml 于37℃短時間標記培養基輕輕搖晃冼兩次細胞。2. ?加入5 ml 于37℃短時間標記培養基，在5%CO2的加濕培
蛋白質的生物合成標記實驗（三）
實驗材料細胞試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?準備和用［35S］甲硫氨酸標記細胞，用0.2~1 mCi/ml 的［35S］甲疏氨酸脈沖標記細胞5~30 min。?2. ?脈沖標記后，除去［35S］甲硫氨酸培養基，用10 ml 于37℃追加培養基冼細胞1次，加入10 ml
蛋白質的生物合成
生物按照從脫氧核糖核酸?(DNA)轉錄得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遺傳信息合成蛋白質的過程。由于mRNA上的遺傳信息是以密碼(見遺傳密碼)形式存在的,只有合成為蛋白質才能表達出生物性狀,因此將蛋白質生物合成比擬為轉譯或翻譯。所以,RNA是蛋白質合成的直接模板。
蛋白質合成實驗
實驗步驟 材料無菌細胞培養，如 1X104～ 1X106 個細胞，24 孔板3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特異活性并不重要，因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定）非無菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH
蛋白質合成實驗
實驗步驟材料無菌細胞培養，如 1X104～ 1X106?個細胞，24 孔板3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特異活性并不重要，因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定）非無菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三
蛋白質合成實驗
實驗步驟 材料 無菌 細胞培養，如 1X104～ 1X106 個細胞，24 孔板 3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特異活性并不重要，因為它將由培養基中的亮氨酸濃度決定） 非無菌 SLS 或
蛋白質合成實驗
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 材料 無菌 細胞培養，如 1X104～ 1X106 個細胞，24 孔板 3H-亮氨酸。無血淸培養基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特異活性并不重要
蛋白質生物合成的調控
生物體內蛋白質合成的速度,主要在轉錄水平上,其次在翻譯過程中進行調節控制。它受性別、激素、細胞周期、生長發育、健康狀況和生存環境等多種因素及參與蛋白質合成的眾多的生化物質變化的影響。由于原核生物的翻譯與轉錄通常是偶聯在一起的,且其mRNA的壽命短,因而蛋白質合成的速度主要由轉錄的速度決定。弱化作用是
蛋白質生物合成的調控
生物體內蛋白質合成的速度，主要在轉錄水平上，其次在翻譯過程中進行調節控制。它受性別、激素、細胞周期、生長發育、健康狀況和生存環境等多種因素及參與蛋白質合成的眾多的生化物質變化的影響。由于原核生物的翻譯與轉錄通常是偶聯在一起的，且其mRNA的壽命短，因而蛋白質合成的速度主要由轉錄的速度決定。弱化作用是
蛋白質生物合成過程
1．氨基酸的活化與搬運：氨基酸的活化以及活化氨基酸與tRNA的結合，均由氨基酰tRNA合成酶催化完成。反應完成后，特異的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羥基與相應的活化氨基酸以酯鍵相連接，形成氨基酰tRNA。 2．活化氨基酸的縮合——核蛋白體循環：活化氨基酸在核蛋白體上反復翻譯mRNA
蛋白質的生物合成過程一般包括哪些步驟
蛋白質合成是指生物按照從脫氧核糖核酸?（DNA）轉錄得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遺傳信息合成蛋白質的過程。蛋白質生物合成亦稱為翻譯（Translation），即把mRNA分子中堿基排列順序轉變為蛋白質或多肽鏈中的氨基酸排列順序過程。這是基因表達的第二步，產生基因產物蛋白質的最后階段。不同的組織
蛋白質生物合成過程的介紹
1．氨基酸的活化與搬運：氨基酸的活化以及活化氨基酸與tRNA的結合，均由氨基酰tRNA合成酶催化完成。反應完成后，特異的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羥基與相應的活化氨基酸以酯鍵相連接，形成氨基酰tRNA。 2．活化氨基酸的縮合——核蛋白體循環：活化氨基酸在核蛋白體上反復翻譯mRNA
蛋白質生物合成翻譯模板
不同mRNA序列的分子大小和堿基排列順序各不相同,但都具有5ˊ-端非翻譯區、開放閱讀框架區、和3ˊ-端非翻譯區;真核生物的mRNA的5ˊ-端還有帽子結構、3ˊ-端有長度不一的多聚腺苷酸(polyA)尾。帽子結構能與帽子結合,在翻譯時參與mRNA在核糖體上的定位結合,啟動蛋白質生物的合成;帽子結構和p
蛋白質的生物合成過程的介紹
第一步，氨基酸活化與轉運。這個過程是在氨基酸活化酶和鎂離子作用下把氨基酸激活成為活化氨基酸。當然，這一過程還有許多其它因子的參與，其發生部位在細胞質。 第二步，肽鏈(蛋白質)合成的起動。以原核細胞中肽鏈合成的起動為例：首先是原核細胞中的起始因子結合在核蛋白體的小亞基上，使大小亞基分開，再與信使
關于蛋白質生物合成的第一個階段介紹
蛋白質生物合成的第一個階段—氨基酸的激素和轉運： 階段在胞質中進行,氨基酸本身不認識密碼,自己也不會到Ribosome上,須靠tRNA。 氨基酸+tRNA→→氨基酰tRNA復合物： 每一種氨基酸均有專一的氨基酰-tRNA合成酶催化,此酶首先激活氨基酸的羥基,使它與特定的tRNA結合,形成氨
重組蛋白質的代謝標記實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材 培養瓶離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病毒分別準備一個平皿供感染用，并準備一個對照平皿供野生型桿狀病毒感染。于27℃溫育
重組蛋白質的代謝標記實驗
由于重組蛋白質表達的時候，宿主蛋白質的合成基本終止，因此體內代謝標記是檢測重組蛋白質的敏感方法。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材培養瓶離心機轉子實驗步驟1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病
重組蛋白質的代謝標記實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
蛋白質生物合成的抑制劑
蛋白質生物合成的抑制劑 許多蛋白質生物合成抑制劑具有高度專一性,這對于研究合成機制很重要。許多臨床有效的抗生素是通過特異抑制原核生物的蛋白質合成而發揮作用的,它們抑制細菌生長而不損害人體細胞。利用兩類生物蛋白質合成的差異,可以找出治療細菌感染引起的疾病的藥物。表中列出一些較為重要的蛋白質生物合成抑制
蛋白質生物合成的抑制劑
蛋白質生物合成的抑制劑 許多蛋白質生物合成抑制劑具有高度專一性，這對于研究合成機制很重要。許多臨床有效的抗生素是通過特異抑制原核生物的蛋白質合成而發揮作用的，它們抑制細菌生長而不損害人體細胞。利用兩類生物蛋白質合成的差異，可以找出治療細菌感染引起的疾病的藥物。表中列出一些較為重要的蛋白質生物合成抑制
蛋白質的生物合成的過程相關介紹
蛋白質在生物體內常處于合成和分解的動態平衡。因而各種蛋白質都以其固有的速度進行分解或重新合成。在細胞內合成蛋白質的場所是核蛋白體。核蛋白體在細胞內以游離的或結合在粗面內質網上的狀態而存在，前者主要進行細胞質（酶）的合成，后者主要是以分泌蛋白質（酶）及膜組成成分的蛋白質的合成。蛋白質的一級結構，即
蛋白質的生物合成遺傳密碼的特點
一方向性:密碼子及組成密碼子的各堿基在mRNA序列中的排列具有方向性(direction),翻譯時的閱讀方向只能是5ˊ→3ˊ;二連續性:mRNA序列上的各個密碼子及密碼子的各堿基是連續排列的,密碼子及密碼子的各個堿基之間沒有間隔,每個堿基只讀一次,不重疊閱讀;三簡并性:一種氨基酸可具有兩個或兩個以上
蛋白質標記
Biosynthetic labeling?(Sefton Lab)Biotinylation of Antibody?(Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl?(ScienceXchange)Protein (
蛋白質磷酸化的測定實驗—代謝標記
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶實驗步驟1. 用 60 mm 或 100 mm 培養瓶，在完全培養基中培養細胞至所希望的密度。2. 用預熱的低磷酸培養基（無放射性磷酸鹽）沖洗兩次，然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培養基（50~100 μmol/L 無機磷酸）。3. 培養結束后，回收?
靶蛋白的放射標記實驗—酵母和細菌蛋白質代謝放射標記
實驗材料細胞儀器、耗材基本培養基實驗步驟1. 接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基，于合適溫度中度振蕩培養過夜。2. 用新鮮的基本培養基稀釋培養物，繼續溫育至 107?細胞/ml （酵母）或對數期中期（細菌）。3. 5000 g 室溫離心 10 分鐘收集細胞，用無硫酸鹽基本培養基
蛋白質的生物合成相關內容
蛋白質在生物體內常處于合成和分解的動態平衡。因而各種蛋白質都以其固有的速度進行分解或重新合成。在細胞內合成蛋白質的場所是核蛋白體。核蛋白體在細胞內以游離的或結合在粗面內質網上的狀態而存在，前者主要進行細胞質（酶）的合成，后者主要是以分泌蛋白質（酶）及膜組成成分的蛋白質的合成。蛋白質的一級結構，即