酵母菌基因組轉座子誘變實驗—?mTn誘變基因產物表位標記
實驗材料mTn誘變酵母菌株試劑、試劑盒pGAL-cre含有2% (W V)棉籽糖的-Leu-Ura Raff CM缺失成分培養基平板和培養基含有2% {m V)半乳糖的-Leu Gal CM缺失成分培養基含有2% (m V)葡萄糖的-Leu Glc CM缺失成分培養基5-FOA培養基平板（5-FOA)丙三醇 無菌 30×儀器、耗材帶混合的孵育器實驗步驟1)用pGAL-cre(pB277)標準操作轉化mTn誘變酵母菌株。在CM- Leu, -Ura缺失成分培養基平板上選擇轉化株。此質粒包含以下元件：amp、ori、CEN和LEU2。2)將轉化株接種到2 mL的含有2% (m/V)棉籽糖的-Leu，-Ura的Raff/CM缺失成 分培養基里，棉籽糖作為碳源抑制GAL啟動子。30℃通風孵育直到培養物生長到飽和狀態。3)在2 mL含有2%的半乳糖的Gal/CM-Leu缺失培養基中100倍稀釋培養物，以半乳糖作為碳源。在2 mL含有2%的......閱讀全文
酵母菌基因組轉座子誘變實驗—?mTn誘變基因產物表位標記
實驗材料mTn誘變酵母菌株試劑、試劑盒pGAL-cre含有2% (W V)棉籽糖的-Leu-Ura Raff CM缺失成分培養基平板和培養基含有2% {m V)半乳糖的-Leu Gal CM缺失成分培養基含有2% (m V)葡萄糖的-Leu Glc CM缺失成分培養基5-FOA培養基平板（5-FOA
酵母菌基因組轉座子的誘變實驗
實驗方法原理 實驗材料 誘變轉座子基因組文庫質粒DNA試劑、試劑盒 10×TE緩沖液 pH 8.0無菌 E. coli tets kans (如 DH5c×)14 cm的LB培養基平板培養基中加入3 mg mL的四環素和40μg mL的卡那霉素LB培養基丙三醇無菌NotⅠ非限制性內切核酸酶及
酵母菌基因組轉座子的誘變實驗
基本方案 小載體聚合酶鏈反應 mTn誘變基因產物的表位標記 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
酵母菌基因組轉座子的誘變實驗——基本方案
實驗材料誘變轉座子基因組文庫質粒DNA試劑、試劑盒10×TE緩沖液 pH 8.0無菌 E. coli tetskans (如 DH5c×)14 cm的LB培養基平板培養基中加入3 mg mL的四環素和40μg mL的卡那霉素LB培養基丙三醇無菌NotⅠ非限制性內切核酸酶及緩沖液Ura3_酵母菌培養一
酵母菌基因組轉座子的誘變實驗—－小載體聚合酶鏈反應
實驗材料誘變轉座子基因組文庫質粒DNA試劑、試劑盒錨定囊泡引物1和2 、1 mol L MgCl2、普通小載體（UV)和mTn引物、轉座子誘變酵母菌株、合適的限制性內切核酸酶（如AZmI或DraI)和緩沖液、10×T4 DNA連接酶緩沖液、5 mmol L ATP、400 U μL T4 DNA連接
酵母菌細胞的誘變實驗——甲乙硫醚誘變
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPD磷酸鈉緩沖液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸鈉儀器、耗材試管搖床離心機平板實驗步驟1. ?將過夜培養的待誘變酵母菌株轉接于5 ml YPD培養基，于30℃繼續培養。檢查細胞密度，記錄并調整到2×108細胞/ml。2. ?轉移1 ml 的菌懸液到無菌的離心管中。高速離心5~10
酵母菌細胞的誘變實驗——紫外光誘變
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPD刀豆氨酸儀器、耗材紫外光殺菌燈紫外光放射量測定器實驗步驟1. ?將過夜培養的酵母菌培養液接種到5 ml YPD培養基中，于30℃培養。離心5~10 s，用1 ml 無菌水重懸沉淀細胞，重復洗滌1次，再用1 ml 無菌水重懸。?2. ?檢查細胞密度，記錄數據后將細胞密度調
酵母菌細胞的誘變實驗
實驗材料?酵母試劑、試劑盒?YPD磷酸鈉緩沖液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸鈉儀器、耗材?試管搖床離心機平板實驗步驟 1.? 將過夜培養的待誘變酵母菌株轉接于5 ml YPD培養基，于30℃繼續培養。檢查細胞密度，記錄并調整到2×108細胞/ml。2.? 轉移1 ml 的菌懸液到無菌的離心管中。高速離心5
誘變－PCR－實驗
試劑、試劑盒?氯仿 異戊醇乙醇礦物油或者一個蠟珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突變 PCR 緩沖液DNA 聚合酶Native Taq 或 AmpliTaq DNA 聚合酶高純度的脫氧核苷 5'-三磷酸dNTP 混合物模板 DNA引物瓊脂糖凝膠用溴化乙錠染色儀器、
誘變－PCR－實驗
誘變 PCR 最大的優勢是以一種沒有偏好的方式引入了各種類型的突變，而不是獲得高水平的單一的擴增。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒氯仿 異戊醇乙醇礦物油或者一個蠟珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突變 PCR 緩沖液DNA 聚合酶Nati
USE－誘變實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 帶 mutS 表型（例如 BMH71-18) 的轉化用大腸桿菌感受態 帶 mut+表型的轉化用大腸桿菌感受態 試劑、試劑盒
誘變－PCR－實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 氯仿 異戊醇 乙醇 礦物油或者一個蠟珠 3mol L NaOAc 5 mmol L MnCl2 突變 PCR 緩沖液
USE－誘變實驗
本方法中，兩條寡核苷酸引物雜交到變性重組質粒 DNA 雙鏈的同一條鏈上。一條引物（誘變引物）攜帶一個擬引進靶 DNA 序列的突變，第二條引物攜帶一個能破壞質粒單一限制酶位點的突變。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料帶 mutS 表型（
USE－誘變實驗
實驗材料 帶 mutS 表型（例如BMH71-18) 的轉化用大腸桿菌感受態帶 mut+表型的轉化用大腸桿菌感受態試劑、試劑盒 退火緩沖液貯存液合成緩沖液噬菌體 T4DNA 連接酶噬菌體 T4DNA 聚合酶或測序酶單一位點的限制性內切核酸酶瓊脂糖凝膠誘變引物選擇引物質粒 DNA儀器、耗材 70°C
基因突變的誘變機制定向誘變
利用重組DNA技術使DNA分子在指定位置上發生特定的變化,從而收到定向的誘變效果。例如將DNA分子用某一種限制性核酸內切酶處理,再用分解DNA單鏈的核酸酶S1處理,以去除兩個粘性末端的單鏈部分,然后用噬菌體T4連接酶將兩個平頭末端連接起來,這樣就可得到缺失了相應于這一限制性內切酶的識別位點的幾個核苷
耐高溫酵母菌株的誘變選育
實驗概要通過實驗，觀察紫外線對酵母菌的誘變效應，并學習物理因素誘變育種的方法。實驗原理紫外線對微生物有誘變作用，主要引起是DNA的分子結構發生改變（同鏈DNA的相鄰嘧啶間形成共價結合的胸腺嘧啶二聚體），從而引起菌體遺傳性變異。測定紫外光的劑量有直接法（以爾格/平方毫米表示絕對劑量）和間接法（以輻照時
關于基因誘變的微波誘變劑的介紹
微波輻射屬于一種低能電磁輻射，具有較強生物效應的頻率范圍在300MHz~300GHz，對生物體具有熱效應和非熱效應。其熱效應是指它能引起生物體局部溫度上升，從而引起生理生化反應；非熱效應指在微波作用下，生物體會產生非溫度關聯的各種生理生化反應。在這兩種效應的綜合作用下，生物體會產生一系列突變效應
關于基因誘變的激光誘變劑的介紹
激光在微生物誘變育種方面的研究與開發應用比較晚。激光誘變育種技術研究始于20世紀60年代，經過世界各國40多年的開發應用研究，不僅證明激光和普通光在本質上都是電磁波，它們發光的微觀機制都與組成發光物質的原子、分子能量狀態和變化密切相關。激光是一種與自然光不同的輻射光，它具有能量高度集中、顏色單一
關于基因誘變的γ射線誘變劑的介紹
γ-射線屬于電離輻射，是電磁波.一般具有很高的能量，能產生電離作用，因而能直接或間接地改變DNA結構.其直接效應是，脫氧核糖的堿基發生氧化，或脫氧核糖的化學鍵和糖-磷酸相連接的化學鍵斷裂，使得DNA的單鏈或雙鏈鍵斷裂.其間接效應是電離輻射使水或有機分子產生自由基，這些自由基與細胞中的溶質分子起作
定點誘變實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 TE寡核苷酸引物質粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蠟油無水乙醇儀器、耗材 離心管熱循環儀離心機實驗步驟 1. ?利用突變區兩側的限制性內切酶位點將待誘變的DNA片段亞克隆進高拷貝數的載體中。?2. ?用小量制備的質粒提取模板DNA，用TE緩沖液重懸100 ng DNA至終濃
定點誘變實驗
基本方案 利用PCR引物點突變 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
什么是位點專一誘變？
中文名稱位點專一誘變英文名稱site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 義使DNA分子中某一特定的核苷酸序列發生改變。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
位點專一誘變的定義
中文名稱位點專一誘變英文名稱site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 義使DNA分子中某一特定的核苷酸序列發生改變。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
位點專一誘變的定義
中文名稱位點專一誘變英文名稱site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 義使DNA分子中某一特定的核苷酸序列發生改變。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
位點專一誘變的概念
中文名稱位點專一誘變英文名稱site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 義使DNA分子中某一特定的核苷酸序列發生改變。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
關于基因誘變的離子束誘變劑的介紹
離子注入是20世紀80年代初興起的一項高新技術，主要用于金屬材料表面的改性。1986年以來逐漸用于農作物育種，近年來在微生物育種中逐漸引入該技術 [2] 離子注入誘變是利用離子注入設備產生高能離子束（40~60keV）并注入生物體引起遺傳物質的永久改變，然后從變異菌株中選育優良菌株的方法。離子束
關于基因誘變的紫外線誘變劑的介紹
我們知道，DNA和RNA的嘌呤和嘧啶有很強的紫外光吸收能力，最大的吸收峰在260nm，因此波長260nm的紫外輻射是最有效的誘變劑.對于紫外線的作用已有多種解釋，但研究的比較清楚的一個作用是使DNA分子形成嘧啶二聚體，即兩個相鄰的嘧啶共價連接，二聚體出現會減弱雙鍵間氫鍵的作用，并引起雙鏈結構扭曲
關于基因誘變的室溫等離子體誘變劑的介紹
常壓室溫等離子體（Atmospheric and Room Temperature Plasma）的簡稱，（縮寫為ARTP）能夠在大氣壓下產生溫度在25-40 °C之間的、具有高活性粒子（包括處于激發態的氦原子、氧原子、氮原子、OH自由基等）濃度的等離子體射流。按照熱力學平衡狀態，等離子體可分為
區域特異性誘變實驗
區域特異性誘變實驗，用于（1）基因誘導改造（2）基因的特定表達（3）臨床抗腫瘤等靶點的發揮。 實驗方法原理 可在長達3‘的克隆化DNA片段上產生大量的隨機分布的核苷酸替換突變，在將DNA克隆到一個可用來分離單鏈DNA的載體后，用各種可造成特定堿基損傷的化學試劑處理。 實驗材料
區域特異性誘變實驗
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?乙酸鈉亞硝酸鈉TE無水乙醇dNTP反轉錄酶RNA酶洗脫液溴化乙錠儀器、耗材?水浴鍋培養箱實驗步驟 1.? 用限制性內切核酸酶消化DNA以獲得目的DNA片段，將靶片段雙向克隆到M13噬菌體載體或含有M13復制起始子的質粒載體中。從100 ml 感染細抱培養物中提取單鏈DN