酵母菌基因組轉座子誘變實驗—?mTn誘變基因產物表位標記
實驗材料mTn誘變酵母菌株試劑、試劑盒pGAL-cre含有2% (W V)棉籽糖的-Leu-Ura Raff CM缺失成分培養基平板和培養基含有2% {m V)半乳糖的-Leu Gal CM缺失成分培養基含有2% (m V)葡萄糖的-Leu Glc CM缺失成分培養基5-FOA培養基平板（5-FOA)丙三醇 無菌 30×儀器、耗材帶混合的孵育器實驗步驟1)用pGAL-cre(pB277)標準操作轉化mTn誘變酵母菌株。在CM- Leu, -Ura缺失成分培養基平板上選擇轉化株。此質粒包含以下元件：amp、ori、CEN和LEU2。2)將轉化株接種到2 mL的含有2% (m/V)棉籽糖的-Leu，-Ura的Raff/CM缺失成 分培養基里，棉籽糖作為碳源抑制GAL啟動子。30℃通風孵育直到培養物生長到飽和狀態。3)在2 mL含有2%的半乳糖的Gal/CM-Leu缺失培養基中100倍稀釋培養物，以半乳糖作為碳源。在2 mL含有2%的......閱讀全文
DNA的接頭分區誘變實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒 霧水乙醇 EDTA T4 DNA連接酶 TE
區域特異性誘變實驗
區域特異性誘變 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 可在長達3‘的克隆化DNA片段上產生大量的隨機分布的核苷酸替換突變，在將DNA克隆到一個可用來分離單鏈DNA的載體后，用各種可造
區域特異性誘變實驗
區域特異性誘變實驗，用于（1）基因誘導改造（2）基因的特定表達（3）臨床抗腫瘤等靶點的發揮。實驗方法原理可在長達3‘的克隆化DNA片段上產生大量的隨機分布的核苷酸替換突變，在將DNA克隆到一個可用來分離單鏈DNA的載體后，用各種可造成特定堿基損傷的化學試劑處理。實驗材料DNA試劑、試劑盒乙酸鈉亞硝酸
DNA的接頭分區誘變實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 霧水乙醇EDTAT4 DNA連接酶TENaCl儀器、耗材 培養箱水浴鍋實驗步驟 1. ?用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在質粒的目的區域產生一嵌套式的5’或3端'缺失突變體。首先在目的序列附近用一限制酶使質粒線性化，在用Bal 31消化時，應確定其切割效
關于基因誘變的化學誘變劑烷化劑的介紹
烷化劑通常帶有1個或多個活性烷基，此基團能夠轉移到其它電子密度高的分子上去，使堿基許多位置上增加了烷基，從而在多方面改變氫鍵的能力。例如EMS被證明是最為有效而且負面影響小的誘變劑。與其他烷化誘變劑類似，是通過與核苷酸中的磷酸、嘌呤和嘧啶等分子直接反應來誘發突變。EMS誘發的突變主要通過兩個步驟
關于基因定點誘變的概述
對于任何一種遺傳學研究，尤其是有關基因的結構與功能的分析，突變都是最基本的手段。經典的方法是，應用能夠修飾DNA分子的化學誘變劑或物理誘變劑處理生物體。此類誘變方法雖然已得到了廣泛的應用，獲得了大量的突變體，但亦存在著諸多的不便之處。 第一、經受誘變劑處理的生物體，它的任何基因都有可能發生突變
定點誘變與盒式誘變的比較介紹
構建一個位點導向的文庫涉及使用含有一個或多個簡并密碼子的合成DNA片段替代一個基因片段。這可以通過雙鏈盒式誘變或單鏈寡核苷酸定向誘變來實現。我們相對傾向于寡核苷酸定向誘變，因為不同于盒式誘變，它不需要在目的區域附近有獨特的限制性酶切位點，并且構建一個文庫只需要一個寡核苷酸片段。因此，這個方法相當
分子遺傳學詞匯位點專一誘變
中文名稱：位點專一誘變英文名稱：site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 義：使DNA分子中某一特定的核苷酸序列發生改變。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
簡并寡核苷酸誘變實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS無水乙醇儀器、耗材 水浴鍋離心機分光光度計實驗步驟 1. ?設計寡核苷酸，其3‘端含有由8個核苷酸組成的回文結構，且包含某一限制性內切酶的識別位點；如果可能的話，5’端也應有一含某個限制性內切酶位點的序列。中間區段則應含目
簡并寡核苷酸誘變實驗
本方法的一個重要特點就是將單鏈的簡并寡核苷酸轉變成同源雙鏈分子后直接克隆進常規載體。由于不同的寡核苷酸可通過其3’末端的回文結構雜交，因此，寡核苷酸實際上起互為引物的作用，在大腸桿菌DNA聚合酶I klenow片段作用下延伸。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS
定點誘變實驗——基本方案
定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質粒）中引入所需變化（通常是表征有利方向的變化），包括堿基的添加、刪除、點突變等。定點突變能迅速、高效的提高DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征，是基因研究工作中一種非常有用的手段。實驗材料DNA試劑、試劑盒TE寡核
簡并寡核苷酸誘變實驗
小段DNA序列中產生大量突變 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
誘變物質的微核測定實驗
實驗方法原理 微核（micronuclei)簡稱（MCN）是真核類生物細胞中的一種異常結構，往往是細胞經輻射或化學藥物的作用而產生的。在細胞間期，微核呈圓形，游離于主核之外，大小應在主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性質和主核一樣，也具有伍萬DNA的能力。一般認為微核是由有絲分裂后期喪失著絲
誘變物質的微核測定實驗
實驗方法原理：微核（micronuclei)簡稱（MCN）是真核類生物細胞中的一種異常結構，往往是細胞經輻射或化學藥物的作用而產生的。在細胞間期，微核呈圓形，游離于主核之外，大小應在主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性質和主核一樣，也具有伍萬DNA的能力。一般認為微核是由有絲分裂后期喪失著絲
誘變物質的微核測定實驗
1、了解微核測定的方法與意義2、尋找新的測試系統及新的更安全有效的植物誘變劑實驗方法原理微核（micronuclei)簡稱（MCN）是真核類生物細胞中的一種異常結構，往往是細胞經輻射或化學藥物的作用而產生的。在細胞間期，微核呈圓形，游離于主核之外，大小應在主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性
枯草芽孢桿菌的紫外線誘變選育實驗——紫外線誘變法
紫外線對微生物有誘變作用，主要引起是DNA的分子結構發生改變（同鏈DNA的相鄰嘧啶間形成共價結合的胸腺嘧啶二聚體），從而引起菌體遺傳性變異。將細胞計數后的平板，分別向菌落數在5-6個左右的平板內加碘液數滴，在菌落周圍將出現透明圈。分別測量透明圈直徑與菌落直徑并計算其比值（HC值），并與對照平板進行比
關于誘變的化學誘變劑的介紹
1、堿基類似物 堿基類似物是與DNA正常堿基結構類似的化合物，能在DNA復制時取代正常堿基摻入并與互補堿基配對。如5-溴尿嘧啶（BU）和2-氨基嘌呤（AP），都能引起AT堿基對轉換為GC堿基對。 2、氯化鋰 氯化鋰誘變，普遍認為是它導致AT-GC堿基對的轉換或導致堿基的缺失。 3、疊氮化
基因組重排的重組方法介紹
基因組重排技術大致的過程可分為突變體庫的構建、原生質體融合與融合子篩選、遞歸原生質體融合三個基本環節。首先需要對常規的菌種進行傳統誘變從而建立突變體庫,誘變的方式有紫外誘變、X射線誘變、化學誘變劑誘變等,其誘變依然有其不定向性。因此要在此基礎上篩選擁有較優良性狀的菌株構建突變體庫。接下來是原生質體的
關于基因誘變的基本信息介紹
是人為的措施誘導植物遺傳基因產生變異，然后在產生變異的植株中按照需要選育出新的優良品種。誘變育種常用的有物理因素和化學因素，物理因素如各種射線、微波或激光等處理誘變材料，習慣上稱之為輻射育種；化學因素是運用能導至遺傳物質改變的一些化學藥物——誘變劑處理誘變材料促使變異，常稱之為化學誘變。
基因突變的誘變機制移碼突變
誘發移碼突變的誘變劑種類較少,主要是吖啶類染料(圖6)。這些染料分子能夠嵌入DNA分子中,從而使DNA復制發生差錯而造成移碼突變。
基因突變的誘變機制自發突變
所謂自發突變是指未經誘變劑處理而出現的突變。從誘變機制的研究結果來看,自發突變的原因不外乎以下幾種。①背景輻射和環境誘變。短波輻射在宇宙中隨時都有,實驗說明輻射的誘變作用不存在閾效應,即任何微弱劑量的輻射都具有某種程度的誘變作用,因此自發突變中可能有一小部分是短波輻射所誘發的突變,有人估計果蠅的這部
復合誘變的概念
復合誘變包括：兩種或多種誘變劑的先后使用，同一種誘變劑的重復作用和兩種或多種誘變劑的同時使用.普遍認為，復合誘變具有協同效應.如果兩種或兩種以上誘變劑合理搭配使用復合誘變較單一誘變效果好. 如賀筱蓉等采用紫外同平板梯度濃度的亞硝基胍、純銅蒸氣混合誘變，篩選到高產菌株效價提高了53.2%，其原理可能是
誘變育種的概念
是人為的措施誘導植物遺傳基因產生變異，然后在產生變異的植株中按照需要選育出新的優良品種。誘變育種常用的有物理因素和化學因素，物理因素如各種射線、微波或激光等處理誘變材料，習慣上稱之為輻射育種；化學因素是運用能導至遺傳物質改變的一些化學藥物——誘變劑處理誘變材料促使變異，常稱之為化學誘變。
碳離子束輻射對擬南芥基因組誘變效應研究獲進展
重離子輻射誘變育種是植物品種改良的重要手段，輻射誘變效應及分子機制的研究是涉及多學科交叉的重要共性課題。目前，對重離子輻射誘變效應的研究集中在表型、染色體畸變、遺傳物質多態性及特定基因序列分析等方面，而分子水平的突變特征研究仍相對薄弱，欠缺全基因組水平大視角、多方位及大樣本量數據支持。 中國科
重疊延伸產生特異位點誘變實驗
試劑、試劑盒 擴增緩沖液熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠寡核苷酸引物模板 DNA儀器、耗材 帶屏障裝置的自動移液器吸頭微型離心管酶可調式移液器可按所需擴增條件設定程序的熱循環儀實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液，緩沖液的成分及所需試劑請見附錄 1。將貯存液稀釋釋到適當的濃度。10x 擴
重疊延伸產生特異位點誘變實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 擴增緩沖液 熱穩定 DNA 聚合酶 瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠 寡核苷酸引物 模板 DNA
寡核苷酸介導的誘變實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
寡核苷酸介導的誘變實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 PEGTEATP寡核苷酸誘變引物T4多核苷酸激酶EDTASSC儀器、耗材 水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟 1. ?將一個單鏈噬菌體產生的噬斑轉移至含有1 ml 滅菌TY培養基的1.5 ml 微量離心管中，60℃溫育5 min，以殺滅細菌細胞，劇烈振蕩以釋放瓊脂中的噬菌體，
寡核苷酸介導的誘變實驗
用突變的寡核苷酸引導模板的合成，從而改變DNA序列，突變效率可達50~80%。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒PEGTEATP寡核苷酸誘變引物T4多核苷酸激酶EDTASSC儀器、耗材水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟1. ?將一個單鏈噬菌體產生的噬斑轉移至含有1 ml 滅菌TY培養基的1.5 ml 微量離心管中
重疊延伸產生特異位點誘變實驗
重疊延伸法進行特異位點誘變需要四種引物（請見圖 13-4)(Higuchi et al.1988, Hetal.1989)。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒擴增緩沖液熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠寡核苷酸引物模