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  • 銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗

    近年來發現,雖然人的端著絲粒染色體短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,稱核仁形成區,但銀染的物質不是rDNA和rRNA,而是與活性的rDNA轉錄有關的一類酸性蛋白質,容易將Ag離子還原為Ag的顆粒,從而在核仁形成區鍍上銀、呈棕黑色,稱為銀染核仁形成區。實驗方法原理生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁,因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活性。實驗材料HL-60細胞HeLa細胞試劑、試劑盒Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白膠硫代硫酸鈉戊二醛乙醇丙酮醋酸鈾檸檬酸鉛染液儀器、耗材顯微鏡電子顯微鏡超薄切片機水浴箱離心機天平染色缸平皿乳頭吸管離心管擦鏡紙實驗步驟一、中期染色體核仁形成區的銀染和觀察1. 取制備好的正常或腫瘤細胞染色體標本,直接放入裝有5 N HCl溶液中,常溫處理5分鐘。2. 用自來水反復沖洗幾次,甩干,標本面朝上......閱讀全文

    銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗

    實驗方法原理?生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁,因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活性。實驗材料?HL-60細胞HeLa細胞試劑、試劑盒?Carnoy固定液HCl甲酸AgNO3蛋白膠硫代硫酸鈉戊二醛乙醇丙酮醋酸鈾檸檬酸鉛染液儀器、耗材?

    銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁,因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活

    銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗

    近年來發現,雖然人的端著絲粒染色體短臂是28S、18S、和5.8S rRNA基因存在部位,稱核仁形成區,但銀染的物質不是rDNA和rRNA,而是與活性的rDNA轉錄有關的一類酸性蛋白質,容易將Ag離子還原為Ag的顆粒,從而在核仁形成區鍍上銀、呈棕黑色,稱為銀染核仁形成區。實驗方法原理生化和免疫化學研

    銀染核仁形成區的標本制備及觀察實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 生化和免疫化學研究證明銀染蛋白是RNA聚合酶I,其功能是催化rDNA轉錄rRNA形成核仁,因此通過這種反應能夠特異顯示rRNA轉錄的活

    銀染核仁形成區的光鏡和電鏡標本制備及觀察

    實驗原理?在細胞分裂中期核型中,人的端著絲粒染色體短臂區和在間期細胞核的核仁中有與銀離子特異親合物質,通過銀染可以顯示它們的致量,因此一直被人們所關注。近年來發現,雖然人的端著絲粒染色體短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,稱核仁形成區(Nucleolar organizer

    核酸染色實驗——核仁組成區嗜銀蛋白

    實驗方法原理核仁組成區是 DNA 的襻,具有核糖體基因(rDNA),在一定條件下可用銀反應法進行定位,是通過銀的聚合物沉積于胱氨酸和半胱氨酸的雙硫鍵位置上,所以在鏡下能夠清楚可見顆粒狀的核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水明膠粉雙蒸水硝酸銀儀

    銀染實驗

    試劑、試劑盒甲醇(50% 和5%v v)二硫蘇糖醇AgNO3檸檬酸(固態)顯影液實驗步驟試劑甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫蘇糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)檸檬酸(固態)顯影液操作程序此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下,凝膠在旋轉平臺上緩慢搖動

    銀染實驗

    試劑、試劑盒 甲醇(50% 和5%v v)二硫蘇糖醇 AgNO3檸檬酸(固態)顯影液實驗步驟 試劑甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫蘇糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)檸檬酸(固態)顯影液操作程序此操作程序是根據Merril(1987)的方法修改而成。室溫下,凝膠在旋轉平臺上緩

    銀染實驗

    銀染實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲醇(50% 和5%v v) 二硫蘇糖醇 AgNO3

    人核仁形成區嗜銀蛋白(AgNORs)試劑盒技術原理

      人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒技術原理   本文由:樊克生物專業技術人員提供!本試劑盒僅供研究使用。   檢測范圍: 48T 25 ng/L -800 ng/L   使用目的:   本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)含量。   

    人核仁形成區嗜銀蛋白(AgNORs)試劑盒技術原理

      人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒技術原理   本文由:樊克生物專業技術人員提供!本試劑盒僅供研究使用。   檢測范圍: 48T 25 ng/L -800 ng/L   使用目的:   本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)含量。   

    人核仁形成區嗜銀蛋白(AgNORs)試劑盒技術原理

    檢測范圍:????48T???????25?ng/L?-800?ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)水平。用純化的人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)抗

    人核仁形成區嗜銀蛋白(AgNORs)試劑盒技術原理

      人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒技術原理   本文由:樊克生物專業技術人員提供!本試劑盒僅供研究使用。   檢測范圍: 48T 25 ng/L -800 ng/L   使用目的:   本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)含量。   

    銀染實驗用水指南

    SDS聚丙烯酰胺凝膠染色是蛋白質研究的一個基礎方法。染色方法有很多,實際應用中,考馬斯亮藍染色(考染)和銀染是運用的最多的方法。考馬斯亮藍G250在游離狀態下呈紅色,它與蛋白質結合后變為藍色,結合物在595 nm波長下有最大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比,因此可用于蛋白質的定量測定。銀染實驗中

    銀染實驗的操作流程

    實驗目的檢測聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質。實驗原理在堿性條件下,用甲醛將蛋白帶上的硝酸銀(銀離子)還原成金屬銀,以使銀顆粒沉積在蛋白帶上。染色的程度與蛋白中的一些特殊的基團有關,不含或者很少含半胱氨酸殘基的蛋白質有時候呈負染。銀染的詳細機制還不是非常清楚。試劑:乙醇、冰醋酸(純乙酸)、乙酸鈉、硫代硫酸鈉

    洋蔥根尖有絲分裂染色體標本制備及觀察實驗

    實驗方法原理 有絲分裂是細胞均等增殖的過程,是體細胞分裂的主要方式.在有絲分裂過程中,細胞內每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數目、形態和性質上均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂。分生組織→固定→解離→染色→壓片→觀察(間期、早期、中

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    實驗方法原理高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質網、線粒體、高爾基體、溶酶體等生物膜系統被完整地保存下來。高錳酸鉀固定劑在固定標本的過程中,能形成二氧化錳,可在細胞的各種膜結構的脂類親水端形成微細的沉淀

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質

    電子顯微鏡生物標本的制備及觀察實驗

    透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 電子顯微鏡是細胞生物學研究的重要工具,它以電子束為照明源,利用電子流具有波動的性質,在電磁場的作用下,

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質

    整裝培養細胞生物膜系統的標本制備及觀察實驗

    實驗方法原理 高錳酸鉀固定液能除掉細胞內的蛋白質成份,而保留膜的脂類成分,其結果,細胞骨架和細胞內可溶性蛋白質等被去除,增加了標本的透明度,同時內質網、線粒體、高爾基體、溶酶體等生物膜系統被完整地保存下來。高錳酸鉀固定劑在固定標本的過程中,能形成二氧化錳,可在細胞的各種膜結構的脂類親水端形成微細的沉

    電子顯微鏡生物標本的制備及觀察實驗

    透射電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 電子顯微鏡是細胞生物學研究的重要工具,它以電子束為照明源,利用電子流具有波動的性質,在電磁場的作用下,

    銀染

    1.將固定液中的凝膠搖動過夜或至少1小時。2.將保溫液中的凝膠輕微振蕩2小時。3.去離子水清洗凝膠3次,每次20分鐘。4.將硝酸銀溶液中凝膠輕微振蕩30分鐘。5.用去離子水快速洗膠30秒。6.將定影液中凝膠搖動5~30分鐘,時間由所加的蛋白質量決定。7.如果已經達到所需的顏色深度,將凝膠放到定影液中

    PCR-產物電泳銀染實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理聚丙烯酰胺凝膠(PAG)是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺,在引發劑過硫酸胺(AP)提供自由基和催化劑四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合,所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中,置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性

    PCR-產物電泳銀染實驗

    常用的核酸電泳法有兩種。①水平電泳:瓊脂糖凝膠,紫外光下判斷條帶。此法經濟省時,但分辨率較低。②垂直電泳:聚丙烯酰胺凝膠,可見光下判斷條帶。此法相對費力,但分辨率較高。分辨率高是聚丙烯酰胺電泳法被優先用于克隆性基因重排條帶判斷的關鍵。在聚丙烯酰胺凝膠上較寬彌散被判斷為假陽性(陰性)的條帶,在瓊脂糖膠

    PCR-產物電泳銀染實驗

    實驗方法原理 聚丙烯酰胺凝膠(PAG)是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺,在引發劑過硫酸胺(AP)提供自由基和催化劑四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合,所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中,置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性較差,通常 2 個月內用完為好。

    電子顯微鏡生物標本的制備及觀察實驗2

    實驗方法原理電子槍發射出的熱電子,在加速電壓作用下,形成高速電子流,經聚光鏡和物鏡的作用形成一極細的電子束,掃描于標本表面。入射電子與標本中的原子相互作用產生二次電子,二次電子的數量和每個電子的能量隨標本表面形狀及元素成分的不同而變化。二次電子被接收并經過放大,即可在熒光屏上顯現出被放大的標本表面圖

    電子顯微鏡生物標本的制備及觀察實驗1

    實驗方法原理電子顯微鏡是細胞生物學研究的重要工具,它以電子束為照明源,利用電子流具有波動的性質,在電磁場的作用下,電子改變前進軌跡,產生偏轉、聚焦,因而電子束透過標本后在電磁透鏡的作用下可放大成像。高速運動的電子流其波長遠比光波波長短,所以電鏡分辨率遠比光鏡高,可達0.14 nm,放大倍率可達80萬

    洋蔥根尖有絲分裂染色體標本制備及觀察實驗_壓片法

    實驗方法原理有絲分裂是細胞均等增殖的過程,是體細胞分裂的主要方式.在有絲分裂過程中,細胞內每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數目、形態和性質上均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂。?分生組織→固定→解離→染色→壓片→觀察(間期、早期、中

    銀染實驗的操作注意事項

    1.固定時間較長,則加一步水洗30min,以免膠太脆而破碎。2.甲醛在使用前加入。3.最好多配制一份顯色液,第一次顯色到溶液變混濁時換一份顯色液,顯色到點清晰。4.顯色過程很快,要注意把握時間,避免染色過度。5.銀染液和顯色液需要預冷。6.所用器皿要很潔凈,不用手直接接觸,以免雜蛋白污染!7.清洗用

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