干擾素生物學活性檢測
實驗方法原理干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺單層細胞)產生抗病毒蛋白,從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊,根據待測樣品不同稀釋度的保護能力,計算出干擾素生物學活性單位。實驗材料VSVWISHHeP-2細胞株試劑、試劑盒MTT二甲亞砜剛果紅結晶紫FCS RPMI1640儀器、耗材培養板培養瓶CO2孵箱超凈臺檢測儀實驗步驟1. 96 孔培養板中加入不同稀釋度的IFN和標準IFN,每個稀釋度設3 孔,每孔50 μl,病毒對照不加IFN 2. 每孔加入100 μl 1.5~2×105 /ml Wish或Hep-2細胞懸液,37℃、CO2孵箱培養6~12 h,使細胞貼壁為單層 3. 每孔加入50 μl含100個TCID50 VSV,細胞對照不加病毒液 ......閱讀全文
干擾素生物學活性檢測
實驗方法原理干擾素能刺激某些指示細胞(如人羊膜上皮細胞Wish株、人喉癌細胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺單層細胞)產生抗病毒蛋白,從而使細胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊,根據待測樣品不同稀釋度的保護能力,計算出干擾素生物學活性單位。實驗材料VSVWISHHeP-2細胞株試劑、試劑盒MTT二甲亞
Ⅰ型干擾素的生物學活性
Ⅰ型干擾素的生物學活性:(1)抗病毒、抗腫瘤作用:①誘導宿主細胞產生抗病毒蛋白,干擾病毒復制,抑制病毒感染或擴散;②增強NK細胞、巨噬細胞和Tc細胞對病毒感染細胞和腫瘤靶細胞的殺傷破壞作用,促進病毒從宿主體內清除和產生抗腫瘤作用;③直接作用于腫瘤細胞,使其生長受到抑制。(2)參與免疫調節作用,促進M
細胞因子生物學活性檢測
實驗方法原理 白細胞介素1是一種重要的細胞因子,主要由單核-巨噬細胞產生,IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能,而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原
TNFα生物學活性檢測方法
光密度法 實驗材料 小鼠L929細胞 試劑、試劑盒 TNF標準品
TNFα生物學活性檢測方法
基本原理TNF的生物學活性之一是能直接殺傷腫瘤細胞。TNF與相應受體結合后向細胞內移,被靶細胞溶酶體攝取導致溶酶體穩定性降低,各種酶外泄,引起細胞溶解。腫瘤細胞株對TNF-α的敏感性有很大的差異,用放線菌素D、絲裂酶素C、放線菌酮等處理腫瘤細胞,可明顯增強TNF-α殺傷腫瘤細胞活性。材料和試劑1,完
α、β和γ干擾素誘導的抗病毒活性的檢測
基 本 方 案 小 鼠 干 擾 素 誘 導 的 抗 病 毒 活 性 的 檢 測材 料干擾素敏感的 L 929 成纖維細胞E M E M 培 養 基(Eagle 氏最低要求培養基)胰酶消化液檢 測 樣 品(具干擾素活性的血清或培養上清)小鼠干擾素的參照標準品 α -干擾素、β-干擾素、 γ-干 擾 素
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于100mlddH2
表達蛋白的生物學活性的檢測
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理??? 活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(二)試劑準備1、???青鏈霉素溶液(100X):青霉素100萬U,鏈霉素100萬U,溶于10
腫瘤壞死因子α生物學活性檢測
實驗方法原理TNF-α受體廣泛地分布于多種腫瘤細胞和血細胞,根據TNF-α與相應靶細胞結合后引起不同的生物學效應,建立了多種檢測TNF-α生物學活性方法。某些腫瘤細胞膜表面的TNF-α受體與TNF-α結合后,可導致這些腫瘤細胞的死亡,可通過檢測對腫瘤細胞的殺傷能力,來反映TNF-α的生物學活性。若這
IL10生物學活性檢測
實驗材料 小鼠IL-4試劑、試劑盒 FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥
IL4生物學活性檢測
實驗材料 IL-4誘生試劑、試劑盒 生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材 細胞培養板培養箱實驗步驟 一、IL-4生物學活性測定?CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待
IL1生物學活性檢測
實驗方法原理 IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠胸腺細胞增殖。進一步通過3H-TdR摻入法或染料攝入法判定小鼠胸腺細胞增殖量,推定IL-1的生物學活性。通過檢測IL-1的生物學活性,可了解單核-巨噬細胞等的功能。實驗材料 小鼠胸腺細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液L
IL8生物學活性檢測
(一)原理IL-8對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理鹽水溶液。 (2)淋巴細胞分層液比重為1.077+(-)0.001。 (3)2%瓊脂糖:稱取2g瓊脂糖,加入到10
檢測細胞生物學活性有哪些方法
根據每細胞定重量設計用于單細胞、細胞及絲狀體微物測定定體積品通離或濾菌體離經洗滌再離直接稱重求濕重絲狀體微物濾用濾紙吸菌絲間自由水再稱重求濕重論細菌品絲狀菌品放已知重量平皿或燒杯內于一05℃烘干至恒重取放入干燥器內冷卻再稱量求微物干重 要測定固體培養基放線菌或絲狀真菌先加熱至50℃使瓊脂熔化濾菌絲體
IL4生物學活性檢測實驗
實驗材料IL-4誘生試劑、試劑盒生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材細胞培養板培養箱實驗步驟一、IL-4生物學活性測定?CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的
IL10生物學活性檢測實驗
實驗材料小鼠IL-4試劑、試劑盒FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥展開?注
IL6生物學活性檢測實驗
實驗材料IL-6的誘生試劑、試劑盒FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材離心機培養箱搖床實驗步驟?1. ?IL-6的誘生:誘生過程與IL-2基本相同。用于誘導產生IL-6的細胞可用PBMC。誘生劑用PHA。2. ?IL-6的生物學活性測定:采用MH60
IL2生物學活性檢測實驗
白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性,可
IL8生物學活性檢測實驗
IL-8中對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。實驗材料IL-8的誘生試劑、試劑盒右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材潔凈載玻片打孔器離心機培養箱實驗步驟一、IL-
IL6生物學活性檢測實驗
實驗材料 IL-6的誘生試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材 離心機培養箱搖床實驗步驟 1. ?IL-6的誘生:誘生過程與IL-2基本相同。用于誘導產生IL-6的細胞可用PBMC。誘生劑用PHA。2. ?IL-6的生物學活性測定:采用M
TNFα生物學活性檢測方法——光密度法
TNF的生物學活性之一是能直接殺傷腫瘤細胞。TNF與相應受體結合后向細胞內移,被靶細胞溶酶體攝取導致溶酶體穩定性降低,各種酶外泄,引起細胞溶解。腫瘤細胞株對TNF-α的敏感性有很大的差異,用放線菌素D、絲裂酶素C、放線菌酮等處理腫瘤細胞,可明顯增強TNF-α殺傷腫瘤細胞活性。實驗材料小鼠L929細胞
IL2生物學活性檢測實驗
實驗方法原理實驗材料 人外周血T細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 一、人外周血T細胞分泌IL-2的誘生1. ?人PBMC分離:采用常規淋巴細胞分層液濃度梯度離心法分離PBMC,用10%FCS-RPM
IL8生物學活性檢測實驗
實驗材料 IL-8的誘生試劑、試劑盒 右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材 潔凈載玻片 打孔器離心機培養箱實驗步驟 一、IL-8的誘生1. ?常規分離PBMC,洗滌后,調細胞濃度為5×106/ml。2. ?將細胞接種于24孔細胞培養板,每孔0
生物學活性測定方法
用于細胞因子生物學活性測定,對細胞因子前體或其降解產物與可溶性受體結合的細胞因子、細胞因子聚合物等,均不能用此法檢測。細胞因子受體拮抗物、細胞因子的天然抗體和類細胞因子等,也將干擾細胞因子活性的測定。細胞因子生物學活性測定法主要具有以下特點:①操作繁瑣;②易受干擾;③敏感性較高;④特異性不高。
補體的生物學活性
? 補體系統是人和某些動物種屬,在長期的種系進化過程中獲得的非特異性免疫因素之一,它也在特異性免疫中發揮效應,它的作用是多方面的。補體系統的生物學活性,大多是由補體系統激活時產生的各種活性物質(主要是裂解產物)發揮的。補體成分及其裂解產物的生物活性列于表3-6。補體成分或裂解產物生物活性作用機制C5
抗體的生物學活性
抗體的生物學功能:可以中和毒素和阻止病原體入侵。識別并特異性結合抗原,執行該功能的結構是抗體的V區,其中CDR部位在識別和結合特異性抗原的過程中起決定性作用;激活補體產生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人的抗體IgG1~3和IgM與相應抗原結合后,可因構象改變而使其CH2和CH3結構域內的補體結合點暴露,
細胞因子生物學活性檢測和濃度測定方法
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。但是,由于細胞因子
細胞因子生物學活性檢測實驗-古朵實驗√
白細胞介素1是一種重要的細胞因子,主要由單核-巨噬細胞產生,IL-1不僅對多種免疫活性細胞有重要的調節功能,而且與發熱、炎癥發生以及某些疾病的病理變化有關。目前對IL-1產生水平的檢測主要應用生物學活性檢測的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺細胞檢測IL-1生物學活性?小鼠胸腺細胞在絲裂原刺激下表達IL
簡述抗體的生物學活性
抗體的生物學功能:可以中和毒素和阻止病原體入侵。識別并特異性結合抗原,執行該功能的結構是抗體的V區,其中CDR部位在識別和結合特異性抗原的過程中起決定性作用;激活補體產生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人的抗體IgG1~3和IgM與相應抗原結合后,可因構象改變而使其CH2和CH3結構域內的補體結合點暴露,